NU ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI Ph ar m ac y ,V KHOA Y DƢỢC an d ĐỖ THỊ THU TRANG Sc ho ol o fM ed ici ne XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG ALISOL A & ALISOL B 23 – ACETAT TRONG DƢỢC LIỆU TRẠCH TẢ (Alisma plantago – aquatica) TRỒNG TẠI VIỆT NAM Co py rig ht @ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Hà Nội 2018 NU ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI Ph ar m ac y ,V KHOA Y DƢỢC an d ĐỖ THỊ THU TRANG Sc ho ol o fM ed ici ne XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƢỢNG ALISOL A & ALISOL B 23 – ACETAT TRONG DƢỢC LIỆU TRẠCH TẢ (Alisma plantago – aquatica) TRỒNG TẠI VIỆT NAM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Khóa: QH.2013.Y Co py rig ht @ Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Phƣơng Ths Nguyễn Thúc Thu Hƣơng Hà Nội 2018 NU LỜI CẢM ƠN Ph ar m ac y ,V Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến T.S Nguyễn Thị Phƣơng (Khoa Hóa phân tích – Tiêu chuẩn, Viện Dược liệu) Ths Nguyễn Thúc Thu Hƣơng (Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Khoa Y Dược, ĐHQGHN) người thầy hướng dẫn, bảo, góp ý đưa ý kiến q báu để em hồn thiện khóa luận Em xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Dược liệu PGS.TS Phƣơng Thiện Thƣơng nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành khóa luận ne an d Em xin chân thành cảm ơn cán bộ, nhân viên khoa Hóa phân tích – Tiêu chuẩn, Viện Dược liệu, đặc biệt anh Nguyễn Đình Quân anh Lê Ngọc Duy – người theo sát, hướng dẫn cho em suốt trình thực đề tài ici Em xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô Khoa Y – Dược dạy dỗ, trang bị kiến thức cho em suốt năm theo học trường fM ed Sau cùng, em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè bên cạnh, ủng hộ, động viên em suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Co py rig ht @ Sc ho ol o Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2018 Sinh viên Đỗ Thị Thu Trang NU MỤC LỤC ,V DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG ac y DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne an d Ph ar m ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Trạch tả (Alisma orientale (Sam.) Juzep.) 1.1.1 Tên khoa học 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố 1.1.3 Bộ phận dùng 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Một số tác dụng dược lý 1.2 Tổng quan alisol A alisol B 23 – acetat 1.2.1 Tổng quan alisol A 1.2.2 Tổng quan alisol B 23 – acetat 11 1.3 Một số nghiên cứu định tính, định lượng AA AB23 Trạch tả 13 1.3.1 Các nghiên cứu giới 13 1.3.2 Các nghiên cứu nước 14 1.3.3 Tiêu chuẩn dược liệu Trạch tả số Dược điển 14 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị nghiên cứu 16 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 16 2.1.2 Hóa chất dung mơi 17 2.1.3 Thiết bị dùng nghiên cứu 17 2.2 Nội dung nghiên cứu 17 2.2.1 Định tính AA AB23 sắc ký lớp mỏng 17 2.2.2 Định lượng AA HPLC 17 2.2.3 Phân tích mẫu thực 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3.1 Định tính AA AB23 sắc ký lớp mỏng 18 2.3.2 Định lượng AA HPLC 19 Co py rig ht @ Sc ho ol o fM TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ed ici ne an d Ph ar m ac y ,V NU 2.3.3 Phân tích mẫu thực 22 CHƢƠNG 3: THỰC NGHIỆM KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1 Định tính AA AB23 TLC 23 3.1.1 Định tính AB23 23 3.1.2 Định tính AA 24 3.1.3 Định tính AA AB23 số mẫu Trạch tả sắc ký lớp mỏng 25 3.2 Định lượng AA HPLC 27 3.2.1 Lựa chọn pha tĩnh 27 3.2.3 Khảo sát quy trình xử lý mẫu 28 3.2.4 Thẩm định phương pháp định lượng 30 3.3 Ứng dụng phương pháp 35 3.4 Bàn luận 35 3.4.1 Tính cấp thiết việc tiêu chuẩn hóa dược liệu Trạch tả Việt Nam 35 3.4.2 Xây dựng phương pháp định tính 36 3.4.4 Phương pháp định lượng 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 Từ viết tắt AA ACN AB23 Alisol A Acetonitril Alisol B 23 - acetat AOAC Association of Official Analytical Chemists Hiệp hội phân tích EtOH Ethanol Ethanol HPLC High performance liquid chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao ac y Alisol A Acetonitrile Alisol B 23 - acetate nhà Hóa an d Ph ar m Khối lượng/ khối lượng Giới hạn phát Limid of Detection LOQ Limid of Qualification MeOH Methanol MS Mass Spectrometry Phổ khối RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối S/N Tín hiệu/nhiễu đường fM ed ici ne LOD Sc ho ol o kl/kl Signal/Noise STT TLC py rig ht Giới hạn định lượng Methanol Số thứ tự Thin layer chromatography Sắc ký mỏng Ultraviolet Visible Phổ tử ngoại - khả kiến @ UVVIS v/v Co Tên tiếng Việt ,V Tên tiếng Anh tên khoa học NU DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Volume/volume Thể tích/thể tích Tên bảng Trang ,V STT NU DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số nghiên cứu giới định lượng AA AB23 Trạch tả Bảng 1.2 Chương trình dung môi theo Dược điển Hồng Kông Bảng 2.1 Mẫu Trạch tả Bảng 3.1 Kết khảo sát dung môi chiết 28 Bảng 3.2 Kết khảo sát tỷ lệ dung môi chiết 29 Bảng 3.3 Kết khảo sát thời gian chiết 29 Bảng 3.4 Kết đánh giá tính thích hợp hệ thống 31 Bảng 3.5 Quan hệ tuyến tính nồng độ diện tích pic AA 32 Bảng 3.6 Kết đánh giá độ lặp lại 33 10 Bảng 3.7 Kết thẩm định độ phương pháp 34 11 Bảng 3.8 Kết định lượng AA số mẫu Trạch tả 35 Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne an d Ph ar m ac y 13 14 16 ,V STT Tên hình vẽ Trang Hình 1.1 Hình ảnh hoa Trạch tả 2 Hình 1.2 Thân rễ thân rễ thái lát Trạch tả Hình 1.3 Công thức số triterpenoid thân rễ Trạch tả 4 Hình 1.4 Cơng thức số diterpenoid thân rễ Trạch tả 5 Hình Công thức số sequiterpenoid thân rễ Trạch tả 6 Hình 1.6 Cơng thức cấu tạo AA Hình 1.7 Cơng thức cấu tạo AB23 11 Hình 2.1 Hình ảnh dược liệu Trạch tả lưu trữ Viện Dược liệu 16 Hình 3.1 Khảo sát định tính AB23 23 10 Hình 3.2 Khảo sát định tính AA 24 11 Hình 3.3 Sắc ký đồ định tính AA số mẫu Trạch tả Hình 3.4 Sắc ký đồ định tính AB23 số mẫu Trạch tả 26 Hình 3.5 Sắc ký đồ khảo sát thành phần pha động 28 Sc ho ol o @ 13 fM ed ici ne an d Ph ar m ac y 12 26 14 Hình 3.6 Sơ đồ quy trình xử lý mẫu lựa chọn 30 15 Hình 3.7 Sắc ký đồ đánh giá độ đặc hiệu phương pháp HPLC - UV 31 16 Hình 3.8 Sắc ký đồ mẫu thử LOD 32 17 Hình 3.9 Đường chuẩn AA 33 py rig ht Co NU DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ NU ĐẶT VẤN ĐỀ Ph ar m ac y ,V Trạch tả có tên khoa học Alisma orientale (Sam.) Juzep., tên đồng danh (Alisma plantago – aquatica) Thuộc họ Trạch tả Alismataceae Bộ phận dùng làm thuốc thân rễ khôn cạo vỏ Trạch tả vị thuốc quý sử dụng lâu đời Y học cổ truyền Việt Nam Trung Hoa với tác dụng: lợi tiểu, hạ mỡ máu, tăng cường miễn dịch, kháng viêm, giảm đường huyết… ne an d Nhóm chất có hoạt tính sinh học Trạch tả hợp chất triterpenoids, có alisol A alisol B 23 - acetat AB23 chứng minh có tác dụng lợi tiểu, chống viêm gan nhiễm mỡ không rượu, giảm ung thư buồng trứng, chống dị ứng… Alisol A hướng tác dụng chủ yếu tế bào viêm gan cịn có tác dụng khác kháng khuẩn, tăng cường miễn dịch… Sc ho ol o fM ed ici Ở Việt Nam, việc đánh giá chất lượng dược liệu Trạch tả thường sử dụng theo Dược điển Việt Nam IV, nhiên tiêu chuẩn hạn chế, chưa đáp ứng yêu cầu đánh giá nên chất lượng dược liệu Trạch tả thị trường chưa đảm bảo Các nghiên cứu phân tích thành phần hóa học giới hầu hết sử dụng alisol B 23 - acetat làm tiêu chí đánh giá chất lượng dược liệu Trạch tả Tuy nhiên, alisol B 23 - acetat alisol A chiếm hàm lượng lớn, có nhiều tác dụng quý với tiềm nghiên cứu, phát triển để ứng dụng điều trị Vì vậy, alisol A thành phần quan trọng, sử dụng làm ―maker‖ kiểm nghiệm chất lượng dược liệu Trạch tả @ Từ thực tiễn trên, nhằm xây dựng phương pháp đánh giá chất lượng dược liệu Trạch tả, thực đề tài “Xây dựng Co py rig ht phƣơng pháp định tính định lƣợng alisol A alisol B 23 - acetat dƣợc liệu Trạch tả (Alisma plantago – aquatica) trồng Việt Nam” với mục tiêu: - Xây dựng phương pháp định tính định lượng alisol A alisol B 23 – acetat dược liệu Trạch tả trồng Việt Nam - Áp dụng phương pháp phân tích số mẫu Trạch tả 1.1 Tổng quan Trạch tả (Alisma orientale (Sam.) Juzep.) NU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN ac y ,V 1.1.1 Tên khoa học Trạch tả có tên khoa học Alisma orientale (Sam.) Juzep., thuộc họ Alismataceae, chi Alisma, có tên khoa học đồng nghĩa khác Alisma plantago – aquatica Ở Việt Nam, Trạch tả gọi thủy đề, mã đề nước [4] Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne an d Ph ar m 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố Cây thảo, cao 40-50 cm Thân rễ hình cầu hình quay, nạc, màu trắng, có cuống dài, bẹ to mọc ốp vào nhau, xòe hình hoa thị, phiến hình trái xoan hay hình trứng, mép ngun lượn sóng, gân 5-7 hình cung Cụm hoa mọc cán thẳng dài có đến 1m thành chùy có nhiều vịng hoa xếp thành tầng nhỏ dần phía ngọn, tầng phân nhánh thành chùy nhỏ; hoa lưỡng tính, màu trắng hay hồng, đài có màu lục, tồn đến thành quả; tràng hoa cánh có cựa màu vàng nhạt mỏng rụng sớm; nhị – 9, dẹt, bầu nhiều xếp thành vịng, có nỗn, vịi nhụy mảnh dễ rụng Quả bế dẹp, dạng màng, có đài tồn Mùa hoa quả: tháng 10 – 12 Chi Alisma L có khoảng 10 loài, phân bố rải rác từ vùng nhiệt đới đến vùng cận nhiệt đới ôn đới ẩm Trạch tả có nhiều Trung Quốc, Nhật Bản, Triều Tiên, Việt Nam Hiện biết có hai lồi dùng làm thuốc Trạch tả (A plantago – aquatica L.) loài A canaliculatum Ở Việt Nam, Trạch tả thấy trồng tỉnh Thái Bình, Hà Nam, Hải Dương, Hưng Yên [4] Hình 1.1 Hình ảnh hoa Trạch tả [57,58] NU Sắc ký đồ khảo sát với dung môi chiết methanol 80% Dataf ile Name:MeOH-80-20ul-001.lcd Sample Name:Meoh 80 Sample ID:03 ,V mAU 210nm,4nm 225 ac y 200 150 125 Ph ar m Alisol A/1781743 175 100 75 25 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 ne 0.0 an d 50 Sắc ký đồ khảo sát với dung môi chiết methanol 60% ici Dataf ile Name:MeOH-60-20ul-001.lcd Sample Name:MeOh 60 Sample ID:04 ed mAU 210nm,4nm 200 Sc ho ol o 175 Alisol A/1714439 fM 225 150 125 100 75 50 @ 25 Co py rig ht 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 NU Sắc ký đồ khảo sát với dung môi chiết methanol 40% Dataf ile Name:MeOH-40-20ul-001.lcd Sample Name:thu Sample ID:01 ,V mAU 210nm,4nm 200 ac y 175 Ph ar m Alisol A/1564098 150 125 100 75 an d 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne 0.0 Phụ lục 2: Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi 14.0 NU Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi chiết với 25ml MeOH 80% Dataf ile Name:25ml-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 ,V mAU 225 210nm,4nm ac y 200 175 Ph ar m Alisol A/1680383 150 125 100 75 an d 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 ne 0.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ici Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi chiết với 50 ml MeOH 80% ed Dataf ile Name:50ml-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 mAU 210nm,4nm fM 110 100 90 Alisol A/811828 Sc ho ol o 80 70 60 50 40 30 @ 20 10 Co py rig ht 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ dung môi chiết với 100ml MeOH 80% NU Dataf ile Name:100ml-20ul-002.lcd Sample Name:02 Sample ID:02 mAU 210nm,4nm 55 ,V 50 45 Alisol A/410738 35 Ph ar m 30 25 20 15 10 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne 1.0 an d 0.0 ac y 40 Phụ lục 3: Khảo sát thời gian chiết 13.0 14.0 NU Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 10 phút Datafile Name:T 10-20ul-001.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 ,V mAU 210nm,4nm ac y 200 175 Ph ar m Alisol A/1569966 150 125 100 75 an d 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ne 0.0 ici Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 30 phút Datafile Name:T 30-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 ed mAU 210nm,4nm 225 fM 200 Alisol A/1767704 Sc ho ol o 175 150 125 100 75 50 @ 25 Co py rig ht 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 40 phút 12.0 13.0 14.0 NU Datafile Name:T 40-20ul-003.lcd Sample Name:02 Sample ID:02 mAU 210nm,4nm ,V 200 ac y 175 Alisol A/1772650 150 Ph ar m 125 100 75 50 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 an d 25 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 12.0 13.0 14.0 ne Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 60 phút Datafile Name:T 60-20ul-004.lcd Sample Name:03 Sample ID:03 ici mAU 210nm,4nm ed 225 200 150 Sc ho ol o 125 Alisol A/1827462 fM 175 100 75 50 25 py rig ht @ 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 Co Sắc ký đồ khảo sát thời gian chiết 120 phút NU Datafile Name:T 120-20ul-005.lcd Sample Name:04 Sample ID:04 mAU 225 210nm,4nm ,V 200 Alisol A/1788354 150 ac y 175 Ph ar m 125 100 75 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne 0.0 an d Phụ lục 4: Sắc ký đồ dung dịch chuẩn 14.0 NU Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 4.168µg/ml Dataf ile Name:alisolA-4.168-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:08 ,V mAU 210nm,4nm 5.5 ac y 5.0 4.5 Alisol A/50459 4.0 Ph ar m 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 0.5 0.0 -0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ne 0.0 an d 1.0 ici Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 10.42 µg/ml Dataf ile Name:alisolA-10.42-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:07 ed mAU 210nm,4nm 13 11 10 Sc ho ol o Alisol A/124308 fM 12 @ Co py rig ht 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 20.84 µg/ml 12.0 13.0 14.0 NU Dataf ile Name:alisolA-20.84-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:06 mAU 27.5 210nm,4nm ,V 25.0 22.5 Alisol A/255642 17.5 Ph ar m 15.0 12.5 10.0 7.5 5.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 an d 2.5 0.0 ac y 20.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 41.68 µg/ml mAU 210nm,4nm ici 50 ed 45 fM 40 35 30 Sc ho ol o 25 Alisol A/520244 55 ne Dataf ile Name:alisolA-41.68-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:05 20 15 10 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 py rig ht @ 0.0 Co Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 104.2 µg/ml 12.0 13.0 14.0 NU Dataf ile Name:alisolA-104.2-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:04 mAU 210nm,4nm ,V 130 120 110 Alisol A/1282397 90 80 Ph ar m 70 60 50 40 30 10 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 an d 20 0.0 ac y 100 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ne Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 208.4 µg/ml Dataf ile Name:alisolA-208.4-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:03 mAU 210nm,4nm ici 275 ed 250 225 175 Sc ho ol o 150 Alisol A/2604167 fM 200 125 100 75 50 25 Co py rig ht @ 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn nồng độ 416.8 µg/ml 12.0 13.0 14.0 NU Dataf ile Name:alisolA-416.8-ug-ml-20ul-001.lcd Sample Name:std Sample ID:02 mAU 210nm,4nm 550 ,V 500 450 Alisol A/5215845 350 Ph ar m 300 250 200 150 100 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne 1.0 an d 50 0.0 ac y 400 Phụ lục 5: Sắc ký đồ định lƣợng mẫu thử 14.0 NU Sắc ký đồ định lượng mẫu M1 Dataf ile Name:T1-20ul-001.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 ,V mAU 210nm,4nm 130 ac y 120 110 100 Ph ar m Alisol A/1036639 90 80 70 60 50 40 30 an d 20 10 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ne 0.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M2 mAU 210nm,4nm ed 70 fM 65 60 55 Sc ho ol o 50 Alisol a/556182 75 ici Dataf ile Name:T2-20ul-002.lcd Sample Name:01 Sample ID:01 45 40 35 30 25 20 15 10 @ 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 Co py rig ht -5 0.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M3 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 NU Dataf ile Name:T3-20ul-003.lcd Sample Name:02 Sample ID:02 mAU 210nm,4nm ,V 200 175 Alisol A/1532730 125 Ph ar m 100 75 50 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ne Sắc ký đồ định lượng mẫu M4 an d 25 0.0 ac y 150 Dataf ile Name:T4-20ul-004.lcd Sample Name:03 Sample ID:03 ici mAU 210nm,4nm ed 200 175 Sc ho ol o 125 Alisol A/1473971 fM 150 100 75 50 25 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 Co py rig ht @ 0.0 Sắc ký đồ định lượng mẫu M5 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 NU Dataf ile Name:T5-20ul-005.lcd Sample Name:04 Sample ID:04 mAU 210nm,4nm 110 ,V 100 90 Alisol a/839687 ac y 80 70 Ph ar m 60 50 40 30 20 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ne Sắc ký đồ định lượng mẫu M6 an d 10 Dataf ile Name:T6-20ul-006.lcd Sample Name:05 Sample ID:05 ici mAU 210nm,4nm 150 ed 140 130 120 100 90 Sc ho ol o 80 Alisol A/1156186 fM 110 70 60 50 40 30 20 10 py rig ht @ 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 Co Sắc ký đồ định lượng mẫu M7 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 NU Dataf ile Name:T7-20ul-007.lcd Sample Name:06 Sample ID:06 mAU 210nm,4nm ,V 225 200 Alisol A/1746494 150 Ph ar m 125 100 75 50 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 Co py rig ht @ Sc ho ol o fM ed ici ne 1.0 an d 25 0.0 ac y 175 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 ... CHƢƠNG 3: THỰC NGHIỆM KẾT QUẢ VÀ B? ?N LUẬN 23 3.1 Định tính AA AB23 TLC 23 3.1.1 Định tính AB23 23 3.1.2 Định tính AA 24 3.1.3 Định tính AA AB23 số mẫu Trạch tả sắc ký... KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 Từ viết tắt AA ACN AB23 Alisol A Acetonitril Alisol B 23 - acetat AOAC Association of Official Analytical Chemists Hiệp hội phân tích EtOH Ethanol Ethanol HPLC... (Alisma plantago – aquatica) trồng Việt Nam” với mục tiêu: - Xây dựng phương pháp định tính định lượng alisol A alisol B 23 – acetat dược liệu Trạch tả trồng Việt Nam - Áp dụng phương pháp phân