TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG LÊ THANH PHONG THỰC HIỆN MỘT SỐ TIÊU BẢN VI THỂ: GAI LƯỠI, KHÍ QUẢN, PHỔI, THẬN, BÀNG QUANG, DỊCH HOÀN Luận văn tốt nghiệp Ngành: BÁC SĨ THÚ Y Cần Thơ, 2013 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Luận văn tốt nghiệp Ngành: BÁC SĨ THÚ Y Tên đề tài: THỰC HIỆN MỘT SỐ TIÊU BẢN VI THỂ: GAI LƯỠI, KHÍ QUẢN, PHỔI, THẬN, BÀNG QUANG, DỊCH HOÀN Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: ThS. Lê Hoàng Sĩ Lê Thanh Phong MSSV: 3092631 Lớp: TY K35 Cần Thơ, 2013 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu thân. Các số liệu, kết trình bày luận văn tốt nghiệp trung thực chưa công bố công trình luận văn trước. Tác giả luận văn Lê Thanh Phong i TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NỘNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Tên đề tài: “Thực tiêu vi thể: gai lưỡi, khí quản, phổi, thận, bàng quang, dịch hoàn” sinh viên Lê Thanh Phong lớp Thú Y Khóa 35 thực phòng thí nghiệm mô học (Histology), môn Thú Y, Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng Trường Đại học Cần Thơ từ tháng 09 đến tháng 11 năm 2013. Cần Thơ, ngày….tháng….năm…. Cần Thơ, ngày….tháng….năm…. Duyệt Bộ môn Cán hướng dẫn Lê Hoàng Sĩ Cần Thơ, ngày….tháng….năm…. Duyệt khoa Nông Nghiệp & SHƯD ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian giảng đường Đại học bốn tháng thực luận văn tốt nghiệp mình, gặp nhiều khó khăn vướng mắc bên cạnh có động viên, ủng hộ gia đình, đặc biệt người mẹ thân yêu tôi, có giúp đỡ thầy cô, bạn bè, cố gắng hoàn thành tốt khóa học luận văn tốt nghiệp mình. Xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Lê Hoàng Sĩ thầy Trần Hiền Nhơn hết lòng hướng dẫn, quan tâm, lo lắng động viên hoàn thành luận văn tốt nghiệp. Với tất lòng kính trọng em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến quý thầy cô Bộ môn Thú Y, thầy cô trường Đại học Cần Thơ dạy dỗ suốt thời gian học tập trường. Cuối cảm ơn tất người bạn tập thể lớp Thú Y khóa 35 chia sẻ, động viên, giúp đỡ khó khăn học tập sống. Xin chân thành biết ơn kính chúc quý thầy cô, người thân bạn bè dồi sức khỏe, có thật nhiều niềm vui thành công sống. iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i TRANG DUYỆT ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC . iv DANH MỤC HÌNH vii TÓM LƯỢC viii Chương I: ĐẶT VẤN ĐỀ . Chương 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU . 2.1 Tổng quan phương pháp thực tiêu hiển vi . 2.2 Lưỡi . 2.2.1 Gai . 2.2.2 Gai nấm . 2.2.3 Gai . 2.2.4 Gai đài . 2.3 Khí quản phế quản gốc . 2.3.1 Lớp niêm mạc . 2.3.2 Lớp niêm mạc . 2.3.3 Lớp mạc (vỏ ngoài) . 2.4 Phổi 2.4.1 Đường dẫn khí . 2.4.2 Phần hô hấp . 2.5 Thận . iv 2.5.1 Tiểu cầu thận . 2.5.2 Ống lượn gần . 2.5.3 Quai Henle 2.5.4 Ống lượn xa . 2.5.5 Ống góp . 2.6 Bàng quang 2.7 Tinh hoàn . 2.7.1 Sự sinh tinh . 2.7.2 Tổ chức kẻ . Chương 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP . 11 3.1 Phương tiện 11 3.1.1 Địa điểm thực 11 3.1.2 Dụng cụ, trang thiết bị hóa chất . 11 3.2 Phương pháp tiến hành 11 3.2.1 Lấy mẫu . 11 3.2.2 Cố định mẫu 11 3.2.3 Lấy mẫu nhỏ 12 3.2.4 Rửa nước . 12 3.2.5. Khử nước 12 3.2.6. Tẩm dung môi trung gian . 12 3.2.7 Tẩm paraffin 13 3.2.8 Đúc khuôn . 13 3.2.9 Cắt mẫu . 13 3.2.10 Tải, dán, hấp mẫu 14 v 3.2.11 Nhuộm mẫu . 14 3.2.12 Dán lamelle – dán nhãn . 16 Chương 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN . 17 4.1 Lưỡi . 17 4.1.1 Gai . 18 4.1.2 Gai nấm . 18 4.1.3 Gai đài . 19 4.1.4 Gai . 19 4.2 Khí quản 20 4.3 Phổi 21 4.4 Thận . 24 4.5 Bàng quang 25 4.6 Tinh hoàn . 26 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 29 5.1 Kết luận . 29 5.2 Đề nghị 29 PHỤ CHƯƠNG 31 vi DANH MỤC HÌNH Hình Tựa hình Trang 3.1 Khuôn đúc Leuckart 13 3.2 Sơ đồ qui trình nhuộm mẫu 15 4.1 Cấu trúc gai thỏ (vật kính 10X) 18 4.2 Gai nấm (vật kính 10X) 18 4.3 Gai đài (vật kính 10X) 19 4.4 Gai heo (vật kính 10X) 19 4.5 Gai heo (vật kính 40X) 20 4.6 Khí quản chuột (Vật kính 40X) 21 4.7 Phế quản lớn thỏ (vật kính 10X) 22 4.8 Phế quản lớn thỏ (vật kính 40X) 22 4.9 Phổi (vật kính 10X) 23 4.10 Phổi (vật kính 40X) 23 4.11 Miền vỏ thận (vật kính 10X) 24 4.12 Miền vỏ thận (vật kính 40X) 24 4.13 Miền tủy thận thỏ (vật kính 40X) 25 4.14 Bàng quang thỏ (vật kính 10X) 26 4.15 Dịch hoàn chuột (vật kính 10X) 27 4.16 Dịch hoàn chuột (vật kính 40X) 27 4.17 Phụ dịch hoàn chuột (vật kính 10X) 28 4.18 Phụ dịch hoàn chuột (vật kính 40X) 28 vii TÓM LƯỢC Đề tài “Thực số tiêu vi thể: gai lưỡi, khí quản, phổi, thận bàng quang, dịch hoàn” nhằm khảo sát quy trình thực tiêu vi thể loại tổ chức trên. Trong thời gian từ tháng 09 đến tháng 11 năm 2013, phòng thí nghiệm mô học – Khoa Nông nghiệp & SHƯD – Đại học Cần Thơ với trang thiết bị hóa chất sẵn có. Qua trình thực tiêu mô thỏ, chuột, heo, đúc 180 mẫu có 48 khối hoàn chỉnh. Cắt nhuộm 354 tiêu chọn 303 tiêu đạt yêu cầu tiêu đạt yêu cầu gồm có: lưỡi thỏ (36 tiêu bản), gai heo (22 tiêu bản), khí quản chuột (31 tiêu bản), phổi chuột (34 tiêu bản), phổi thỏ (25 tiêu bản), phế quản lớn thỏ (25 tiêu bản), thận thỏ (36 tiêu bản), bàng quang thỏ (54 tiêu bản), dịch hoàn chuột (40 tiêu bản). Qua rút số đặc điểm riêng mẫu so với quy trình chung. Chúng khảo sát phương pháp thực tiêu hiển vi cố định mô động vật tìm thứ tự thời gian cố định mẫu thích hợp cho loại tổ chức sau: cố định 24 lưỡi, khí quản, phổi, thận, dịch hoàn, cố định 36 bàng quang. Ngoài ra, paraffin tẫm mẫu phải paraffin để ngấm sâu vào tổ chức bên trong. Còn paraffin đúc khuôn phải pha paraffin paraffin làm “già” qua lửa (đun nóng nồi vài giờ) với tỷ lệ tùy thuộc vào độ “già” paraffin, cho cắt khối paraffin không dẽo không cứng. viii 4.1.1 Gai Gai Tổ chức liên kết Cơ vân Hình 4.1 Gai thỏ (vật kính 10X) 4.1.2 Gai nấm Gai nấm Tổ chức liên kết Hình 4.2 Gai nấm thỏ (vật kính 10X) 18 4.1.3 Gai đài Gai đài Tổ chức liên kết Cơ vân Hình 4.3 Gai đài thỏ (vật kính 10X) 4.1.4 Gai Gai Hình 4.4 Gai heo (vật kính 10X) 19 Nụ vị giác Tổ chức liên kết Hình 4.5 Gai heo (vật kính 40X) 4.2 Khí quản Thực 31 tiêu khí quản chuột hoàn chỉnh. Quan sát kính hiển vi quang học ta thấy được: Lớp niêm mạc: Lớp biểu mô: biểu mô phủ kép trụ giả. Lớp đệm: mô liên kết thưa. Lớp niêm mạc: có vòng sụn chữ C. Lớp mạc: màng liên kết thưa. 20 Lớp biểu mô phủ kép trụ giả . Cơ trơn Sụn Tổ chức liên kết Hình 4.6 Khí quản chuột (Vật kính 40X) 4.3 Phổi Thực 84 tiêu hoàn chỉnh, 50 tiêu thỏ, có 25 tiêu thấy phế quản lớn, 34 tiêu chuột, có 34 tiêu thấy phế quản lớn. Quan sát phế quản lớn kính hiển vi quang học ta thấy được: Lớp niêm mạc: lớp biểu mô phủ kép trụ giả có lông rung. Lớp đệm: mô liên kết thưa. Dưới lớp đệm có Reissessen. Lớp niêm mạc : Có mảnh sụn không đồng đều, phân bố xung quanh đường kính phế quản. Quan sát phổi kính hiển vi ta thấy được: Tiểu phế quản hô hấp Ống phế nang Túi phế nang phế nang 21 4.3.1 Phế quản Sụn Lớp biểu mô phủ kép trụ giả Cơ trơn Hình 4.7 Phế quản lớn thỏ (vật kính 10X) Sụn Tổ chức liên kết Cơ trơn Lớp biểu mô phủ kép trụ giả Hình 4.8 Phế quản lớn thỏ (vật kính 40X) 22 Tĩnh mạch Phế quản nhỏ Động mạch Hình 4.9 Phổi thỏ (vật kính 10X) Phế nang Phế quản nhỏ Động mạch Lớp biểu mô phủ kép trụ giả Hình 4.10 Phổi thỏ (vật kính 40X) 23 4.4 Thận Thực 36 tiêu thận thỏ hoàn chỉnh, quan sát kính hiển vi quang học ta thấy được: Miền vỏ: tháp Ferrein, tiểu cầu thận, ống sinh niệu. Miền tủy: ống sinh niệu. Tĩnh mạch Tiểu cầu thận Hình 4.11 Miền vỏ thận thỏ (vật kính 10X) Ống lượn xa Tĩnh mạch Tiểu cầu thận Ống lượn gần Hình 4.12 Miền vỏ thận thỏ (vật kính 40X) 24 Ống góp Hình 4.13 Miền tủy thận thỏ (vật kính 40X) 4.5 Bàng quang Thực 34 tiêu bàng quang thỏ hoàn chỉnh, quan sát kính hiển vi quang học ta thấy được: Lớp niêm mạc: có nhiều nếp gấp, cấu tạo biểu mô phủ kép biến dị. Lớp đệm: có nhiều sợi keo, sợi chun. Hạ niêm mạc: tổ chức liên kết thưa. Lớp cơ: gồm lớp trơn, dọc trong, vòng dọc ngoài. 25 Biểu mô phủ kép biến dị Cơ dọc Cơ vòng Cơ dọc Tổ chức liên kết Hình 4.14 Bàng quang thỏ (vật kính 10X) 4.6 Tinh hoàn Thực 40 tiêu dịch hoàn chuột hoàn chỉnh, quan sát kính hiển vi quang học thấy đươc: Ống sinh tinh: thành ống dẫn tinh, tinh nguyên bào, tiền tinh trùng, tinh trùng, tổ chức kẽ, màng trắng. Ống dẫn tinh: thành ống dẫn tinh, tinh trùng. 26 Tĩnh mạch Màng trắng Tổ chức kẽ Ống sinh tinh Hình 4.15 Dịch hoàn chuột (vật kính 10X) Tổ chức liên kết Tinh nguyên bào Tiền tinh trùng Tinh trùng Hình 4.16 Dịch hoàn chuột (vật kính 40X) 27 Ống dẫn tinh có nhiều tinh trùng Tổ chức liên kết Hình 4.17 Phụ dịch hoàn chuột (vật kính 10X) Tổ chức liên kết Tinh trùng Hình 4.18 Phụ dịch hoàn chuột (vật kính 40X) 28 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Bằng phương pháp tiêu cắt lát nhuộm kép Hematoxylin Eosin Y, mục tiêu đề tài “thực tiêu vi thể gai lưỡi, khí quản, phổi, thận, bàng quang, dịch hoàn” thực hoàn chỉnh. Tiêu làm đáp ứng yêu cầu quan sát cấu trúc mô học, phục vụ tốt cho nhu cầu nghiên cứu, học tập giảng dạy. 5.2 Đề nghị Cần trang bị lại thiết bị hỏng như: tủ ấm, tủ lạnh, máy điều hòa nhiệt độ… để công việc nghiên cứu, học tập thuận lợi hơn. Thực thêm tiêu vi thể loài khác để so sánh khác biệt. 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Hồ Thị Hà, 2008. Mô học. Trường Đại học Y – Đại học Huế. 2. Nguyễn Hoàng Phương, 1994. Phương pháp thực tiêu mô động vật. Luận văn tốt nghiệp Đại học Cần Thơ. 3. Nguyễn Xuân Hoạt, Phạm Đức Lộ, 1978. Tổ chức học – Phôi thai học. Nhà xuất Đại học trung học chuyên nghiệp. 4. Phạm Phan Địch, 1998. Mô học. Nhà xuất Y học Hà Nội. 5. Trương Cam Cống, 1973. Tổ chức học. Nhà xuất y học. 6. Mariano S.H.Di Fiore, 1974. Atlas of human histology. Lea & Febgen Philadelphia. 30 PHỤ CHƯƠNG Bảng 1: Trở ngại, nguyên nhân cách khắc phục Trở ngại Nguyên nhân Khối mẫu vỡ có nhiều Paraffin xấu, không tinh hạt khiết Mẫu bật khỏi block Thao tác đúc khuôn cắt, mẫu có chậm khí Mẫu khó cắt hay vỡ Paraffin cứng mảnh Tổ chức bị co rúm lại Nhiệt độ tẩm paraffin cao 65oC Khó cắt, tổ chức bị tước Paraffin chưa thấm hoàn xơ toàn vào tổ chức, chưa loại hết cồn xylen Khắc phục Thay lọc kỹ praffin Đúc lại mẫu thao tác nhanh Thay paraffin khác mềm Loại bỏ mẫu Tẩm lại paraffin lâu hơn, loại bỏ mẫu Bảng 2: Trở ngại, nguyên nhân cách khắc phục cắt mẫu Trở ngại Nguyên nhân Khắc phục Các mảnh cắt có độ dài Điều chỉnh máy cắt với Tăng giảm tốc độ không tốc dộ không thích hợp máy cắt, điều chỉnh dày mỏng lại cho thích hợp Mảnh cắt bị cuộn không Mặt trên, Điều chỉnh khuôn mẫu xếp băng khuôn mẫu lưỡi dao cho mặt cắt song song không song song Mảnh cắt bị rách, thủng Dao cắt bị lục, mẻ, dơ Lau lưỡi dao thay lưỡi dao Mẫu bị nứt, vụn nát Mẫu nước, nhiệt độ Chú ý nồng độ thời tẩm paraffin cao, tốc gian ngâm cồn nhiệt độ quay không phù hợp độ tẩm paraffin Mảnh cắt bị cưa Paraffin mềm, nhiệt độ Cắt dày hơn, điều chỉnh dính vào dao phòng nóng nhiệt độ máy lạnh Mảnh cắt dính lại vào Dao dơ, độ nghiêng Thay dao mới, kiểm tra khuôn mẫu dao chưa đủ độ nghiêng dao 31 Bảng 3: Trở ngại, nguyên nhân cách khắc phục tải, hấp nhuộm Trở ngại Nguyên nhân Khắc phục Mẫu bị gấp nếp Nước chậu tải Tăng nhiệt độ không đủ nóng chậu tải Mẫu bị rách Nhiệt độ nước cao Giảm nhiệt độ chậu tải Bị tuột mẫu lúc Mạnh tay lúc Thao tác nhuộm phải nhuộm nhuộm chậm, nhẹ nhàng  Công thức pha Formol trung tính 10% Formalin (37 – 40%) 100 ml Nước cất 900ml Sodium phosphate monobasie 4g Sodium phosphate dibasie 6,5g  Phẩm nhuộm Hematoxylin Hematoxylin phẩm nhuộm tự nhiên chiết xuất bàng ether từ lõi Hematoxylen campechianum mọc rừng nhiệt mới, Mehico. Bản thân Hematoxylin đặc tính nhuộm mà phải trải qua trình oxy hóa để biến thành Hematein nhuộm . Sự oxy hóa Hematoxylin gây nên để dung dịch nhuộm từ đến tuần ánh sáng mặt trời oxy hóa tác nhân hóa học Iodate, Formanganat… khâu nhuộm, sử dụng chất oxy hóa mereuride oxide để oxy hóa Hematoxylin thành Hematein xảy tức khắc. Sự oxy hóa liên tục Hematein hình thành hợp chất không màu làm cho phẩm nhuộm không dùng lâu. Chính mà số người cho oxy hóa chậm cách tự nhiên tốt oxy hóa hóa học. Hematoxylin phẩm nhuộm gián tiếp nên cần dùng thêm chất gắn màu Alumum dạng Alum (phèn chua) ăn màu vào tổ chức. Hematoxylin phẩm nhuộm baze mạnh. Do đó, cố định acid nucleic acid nhân tế bào nên Hematoxylin dùng để nhuộm nhân sau nhuộm nhân có màu tím xanh (Nguyễn Hoàng Phương, 1994). 32 Có nhiều cách pha Hematoxylin, tùy cách nhuộm mà chọn cách pha thuốc. Ở xin trình bày cách pha chế thuốc nhuộm theo Harris: Tinh thể Hematoxylin 5g Cồn tuyệt đối 50ml Phèn chua 100g Nước cất 1000ml Moreuride oxide 2.5g Cách pha chế Hematoxylin theo Harris với bước tiến hành sau: Hòa tan Hematoxylin cồn phèn chua nước cất đun sôi, mang khỏi bếp trộn hai dung dịch lại. Đun sôi nhanh không phút khuấy đều, tắt lửa cho Moreuride oxide vào từ từ, khuấy đều, đun nhỏ lửa dung dịch có màu tím đậm. Mang khỏi bếp cho vào nước lạnh để làm lạnh nhanh, dung dịch nguội lại lọc trước dùng. Lưu ý: Hematoxylin biến chất (có cặn, nâu đỏ) kết tủa màu nâu đen bên tế bào nhuộm. Để kiểm tra dung dịch Hematoxylin có bị loãng biến chất hay không cách nhỏ vài giọt Hematoxylin vào nước ấm, thấy giọt phẩm nhuộm có màu đỏ lúc sau thấy chuyển sang màu tím xanh phẩm nhuộm loãng biến chất phải loại bỏ. Nếu phẩm nhuộm có màu tím xanh sử dụng (Nguyễn Hoàng Phương, 1994).  Phẩm nhuộm Eosin: sử dụng nhuộm tế bào chất. Cách pha sau: Eosin dự trữ: Eosin 1g Nước cất 20ml Hòa tan thêm cồn 95% 80ml Eosin nhuộm: Eosin dự trữ phần Cồn 800 phần Hòa tan vào cho thêm 0.5ml acid acetic đậm đặc cho 100ml dung dịch trước dùng. Chú ý: Lắc Eosin nước cho tan hoàn toàn pha vào cồn. 33 [...]... khối hoàn chỉnh Cắt nhuộm được 354 tiêu bản và chọn ra 303 tiêu bản đạt yêu cầu những tiêu bản đạt yêu cầu gồm có: lưỡi thỏ (36 tiêu bản) , gai lá heo (22 tiêu bản) , khí quản chuột (31 tiêu bản) , phổi chuột (34 tiêu bản) , phổi thỏ (25 tiêu bản) , phế quản lớn thỏ (25 tiêu bản) , thận thỏ (36 tiêu bản) , bàng quang thỏ (54 tiêu bản) , dịch hoàn chuột (40 tiêu bản) Tôi đã khảo sát phương pháp thực hiện tiêu bản. .. đã thực hiện bao gồm: lưỡi, khí quản, phổi, thận, bàng quang, dịch hoàn Thực hiện tiêu bản có chất lượng phục vụ cho học tập, giảng dạy và nghiên cứu 1 Chương 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan về phương pháp thực hiện tiêu bản hiển vi Muốn thực hiện nghiên cứu tế bào và mô, phải dùng các loại kính hiển vi Vì vậy phải thực hiện những tiêu bản có độ dày thích hợp cho phép quan sát dưới kính hiển vi. .. bản trên thỏ có 36 tiêu bản hoàn chỉnh, quan sát được 25 tiêu bản gai chỉ, 6 tiêu bản gai nấm, 5 tiêu bản gai đài, 22 tiêu bản trên heo có 22 tiêu bản hoàn chỉnh, có 22 tiêu bản quan sát được gai lá Khi thực hiện tiêu bản lưỡi cần xác định vị trí gai lưỡi theo từng loại khi lấy mẫu lớn và khi đúc cần đặt lưỡi sao cho mặt cắt vuông gốc với góc lưỡi Quan sát tiêu bản trên kính hiển vi quang học ta thấy... sinh vi n ngành Thú y cần hiểu biết rõ về cấu tạo, tổ chức cơ thể động vật ở mức vi thể Nhờ vào cấu tạo vi thể mà chúng ta có thể giải thích được các quá trình sinh lý bình thường của vật nuôi Với các lợi ích thiết thực như vừa nêu trên tôi thực hiện đề tài Thực hiện một số tiêu bản: lưỡi, khí quản, phổi, thận, bàng quang, dịch hoàn Mục tiêu đề tài: Đọc và mô tả về mặt tổ chức học của các tiêu bản. .. là lớp gai có 4 loại: gai chỉ, gai nấm, gai đài, gai lá Bên dưới gai lưỡi là một khối cơ vân có lẫn thần kinh và mạch máu 17 4.1.1 Gai chỉ Gai chỉ Tổ chức liên kết Cơ vân Hình 4.1 Gai chỉ thỏ (vật kính 10X) 4.1.2 Gai nấm Gai nấm Tổ chức liên kết Hình 4.2 Gai nấm thỏ (vật kính 10X) 18 4.1.3 Gai đài Gai đài Tổ chức liên kết Cơ vân Hình 4.3 Gai đài thỏ (vật kính 10X) 4.1.4 Gai lá Gai lá Hình 4.4 Gai lá... bản) Tôi đã khảo sát phương pháp thực hiện tiêu bản hiển vi cố định mô động vật và tìm ra thứ tự thời gian cố định mẫu thích hợp cho từng loại tổ chức như sau: cố định 24 giờ là lưỡi, khí quản, phổi, thận, dịch hoàn, cố định 36 giờ là bàng quang Các tiêu bản hoàn chỉnh phải đạt yêu cầu sau: Tiêu bản trong, sạch, lát cắt có độ dày thích hợp Tiêu bản có màu tương phản, phân biệt rõ cấu trúc tế bào: nhân... pháp làm tiêu bản để nghiên cứu bao gồm: phương pháp xét nghiệm tươi; phương pháp tế bào, hóa mô; phương pháp phóng xạ tự chụp; phương pháp làm tiêu bản cố định và nhuộm màu Trong các phương pháp trên phương pháp làm tiêu bản hiển vi cố định và nhuộm màu là phương pháp phổ biến dùng trong xét nghiệm mẫu bệnh so với đối chứng Phương pháp làm tiêu bản cố định và nhuộm màu: Thực hiện tiêu bản hiển vi cố... trình thực hiện tiêu bản với: Qui trình thực hiện tiêu bản đơn giản dễ tiến hành Mẫu bắt màu tốt, có sự tương phản rõ rệt: Nhân màu tím Tế bào chất màu hồng Các lớp tổ chức có thể phân biệt được dưới kính hiển vi quang học Tuy nhiên do thiếu kinh nghiệm, kỹ năng và trang thiết bị đa phần bị hỏng nên gặp nhiều khó khăn và trở ngại KẾU QUẢ MÔ HỌC 4.1 Lưỡi Thưc hiện 97 tiêu bản, trong đó có 75 tiêu bản. .. Lớp biểu mô phủ kép trụ giả Cơ trơn Sụn Tổ chức liên kết Hình 4.6 Khí quản chuột (Vật kính 40X) 4.3 Phổi Thực hiện 84 tiêu bản hoàn chỉnh, 50 tiêu bản trên thỏ, có 25 tiêu bản thấy được phế quản lớn, 34 tiêu bản trên chuột, có 34 tiêu bản thấy được phế quản lớn Quan sát phế quản lớn dưới kính hiển vi quang học ta thấy được: Lớp niêm mạc: lớp biểu mô phủ kép trụ giả có lông rung Lớp đệm: mô liên kết thưa... lamelle xuống lame để tránh bọt khí, giọt keo dán nằm ngay vị trí giữa lamelle - Ấn nhẹ cho keo lan ra đều Dùng vải sạch thấm xylen chùi hết keo lan ra ngoài lamelle (nếu có) 3.2.12.2 Dán nhãn - Tên tổ chức: lưỡi, khí quản, phổi, thận, bàng quang, tinh hoàn - Loài: thỏ, chuột, heo - Chiều hướng cắt: cắt ngang, cắt dọc 16 Chương 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN Qua quá trình thực hiện tiêu bản mô trên thỏ, chuột, heo, . 2.2 Lưỡi 2 2.2.1 Gai chỉ 3 2.2.2 Gai nấm 3 2.2 .3 Gai lá 3 2.2.4 Gai đài 3 2 .3 Khí quản và phế quản gốc 3 2 .3. 1 Lớp niêm mạc 3 2 .3. 2 Lớp dưới niêm mạc 4 2 .3. 3 Lớp thanh mạc (vỏ ngoài). 3. 2.5. Khử nước 12 3. 2.6. Tẩm dung môi trung gian 12 3. 2.7 Tẩm paraffin 13 3. 2.8 Đúc khuôn 13 3. 2 .9 Cắt mẫu 13 3. 2.10 Tải, dán, hấp mẫu 14 vi 3. 2.11 Nhuộm mẫu 14 3. 2.12 Dán lamelle –. 11 3. 1.1 Địa điểm thực hiện 11 3. 1.2 Dụng cụ, trang thiết bị và hóa chất 11 3. 2 Phương pháp tiến hành 11 3. 2.1 Lấy mẫu 11 3. 2.2 Cố định mẫu 11 3. 2 .3 Lấy mẫu nhỏ 12 3. 2.4 Rửa nước 12 3. 2.5.