PHẦN III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3. KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH SINH HỌC
3.1 Phương pháp xác định hoạt tính kháng oxi hoá
Để kiểm tra khả năng kháng oxy hóa của cao chiết Đông trùng hạ thảo, thử nghiệm DPPH và ABTS được thực hiện. Sau khi thu nhận được cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo (Cordyceps militaris) tiến hành pha loãng với dung môi nước ở các nồng độ khỏc nhau 500, 1000, 2000, 3000, 4000 àg/mL. Thờm 100 àL DPPH vào cỏc giếng và tiến hành đo OD. Thí nghiệm được lặp lại 3 lần. Kết quả được thể hiện trong bảng sau:
Hình 3.4: Đồ thị DPPH của cao chiết Đông Trùng Trùng Thảo
Theo kết quả quan sát ở đồ thị hình 3.4, cho thấy cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo (Cordyceps militaris) có hoạt tính kháng oxi hóa. Khi nồng độ của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo tăng thì hoạt tính chống oxi hóa tăng, sự gia tăng hoạt tính chống oxi hóa tỷ lệ thuận với nồng độ cao chiết. Cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo (Cordyceps militaris) cho thấy được khả năng loại bỏ gốc tự do tốt.
Từ đồ thị ở hình 3.5, có thể nhận xét rằng cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo thể hiện hoạt tớnh trung hoà gốc tự do DPPH với giỏ trị IC50 là 2438,68 àg/ml. Tiến hành so sỏnh giỏ trị này với giỏ trị IC50 của vitamin C ( đối chứng ) là 24,23 àg/ml thỡ cú thể nhận thấy hiệu quả chống oxi hoá của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo thấp hơn 100 lần. Kết luận này dựa trên việc xác định giá trị IC50 là nồng độ cần thiết để ức chế được 50% khả năng bắt gốc tự do. Cú nghĩa là tại giỏ trị IC50 là 2438,68 àg/ml của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo mới ức chế được 50% khả năng bắt gốc tự do trong khi đó giá trị IC50 của vitamin C ức chế được 50% khả năng bắt gốc tự do là 24,23 àg/ml.
Vào năm 2023, Girish Gawas và cộng sự đã nghiên cứu về nấm Cordyceps militaris. Các nhà nghiên cứu đã thực hiện đánh giá hoạt tính kháng oxi hoá bằng hoạt tớnh bắt gốc tự do DPPH là 140,15 àg/ml (theo Milanezi và cộng sự). So với kết
y = 0,0182x + 5,6161 R² = 0,9559
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500
% khả năng bắt gốc tự do
Nồng độ (àg/ml) Thử nghiệm DPPH
quả nghiên cứu của đề tài này thì có sự chênh lệch gấp 17,39 lần và có khả năng kháng oxi hoá cao hơn mẫu cao chiết của đề tài nghiên cứu này.
Hình 3.5: Đồ thị đường chuẩn vitamin C
Tuy nhiên qua kết quả nghiên cứu, nhận thấy rằng sản phẩm có chứa Đông Trùng Hạ Thảo rất có tiềm năng phát triển mạnh mẽ ra thị trường và sẽ được kỳ vọng đến tay người dùng bởi những hoạt tính sinh học quý đã được chứng minh. Đảm bảo được việc sử dụng sản phẩm có chứa Đông Trùng Hạ Thảo đem lại giá trị về sức khoẻ cho con người và nghiên cứu này cũng mở ra thêm những khám phá mới về công dụng có trong Đông Trùng Hạ Thảo.
Nhận xét kết quả ABTS:
y = 1,89x + 4,1967 R² = 0,941
0 20 40 60 80 100 120
0 10 20 30 40 50 60
% khả năng bắt gốc tự do
Nồng độ (àg/mL)
Đồ thị đường chuẩn vitamin C
Hình 3.6: Đồ thị ABTS của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo
Theo kết quả quan sát từ đồ thị hình 3.6 , cho thấy được nồng độ của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo tăng dần theo các nồng độ từ thấp đến cao. Khi nồng độ cao chiết tăng thì hoạt tính chống oxi tăng, hoạt tính chống oxi hoá tỷ lệ thuận với nồng độ của cao chiết. Kết quả nghiờn cứu của tụi là 176,44 àg/ml cho thấy sự khỏc biệt về giá trị trên mẫu cao chiết nghiên cứu. Có thể nguyên nhân ảnh hưởng dẫn tới sự chênh lệch kết quả là do yếu tố môi trường nuôi , mẫu không đảm bảo chất lượng trong quá trình xử lý, thao tác trong lúc thực hiện thí nghiệm.
Hình 3.7 : Đồ thị đường chuẩn của vitamin C
y = 0,2698x + 2,3973 R² = 0,988
0 10 20 30 40 50 60 70 80
0 50 100 150 200 250 300
% khả năng bắt gốc tự do
Nồng độ ( àg/ml)
Thử nghiệm ABTS
y = 29,878x + 3,6774 R² = 0,9896
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3
% khả năng bắt góc tự do
Nồng độ (àg/ml)
Đồ thị đường chuẩn vitamin C
Theo kết quả nghiên cứu thể hiện ở đồ thị hình 3.7 , có thể thấy cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo (Cordyceps militaris) có hoạt tính trung hoà gốc tự do ABTS . Khi nồng độ của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo (Cordyceps militaris) tăng thì hoạt tính chống oxi hoá tăng, sự gia tăng hoạt tính chống oxy hoá tỷ lệ thuận với nồng độ cao chiết. Dựa vào hình 3.6, đồ thị đường chuẩn vitamin C của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo, cho thấy các nồng độ cao chiết có khả năng kháng oxi hoá kém với giá trị IC50
là 176,44 àg/ml cú sự khỏc biệt rất lớn về giỏ trị. Do giỏ trị IC50 tỷ lệ nghịch với hoạt tính oxi hoá, khi giá trị IC50 thấp, khả năng kháng oxi hoá càng cao. Giá trị IC50 là nồng độ ức chế 50% khả năng bắt gốc tự do, tại giỏ trị IC50 là 176,44 àg/ml của cao chiết Đông Trùng Hạ Thảo mới ức chiết được 50% khả năng bất gốc tự do trong khi giỏ trị IC50 của vitamin C là 1,55 àg/ml.