ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ THỊ AN Tên đề tài: NGHIÊN CỨA KỸ THẬT TRỒNG NẤM LIM XANH GANODERMA LUCIDUM (LEYSS EX FR.) KARST TRÊN GIÁ THỂ NHÂN TẠO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo Chuyên ngành Lớp Khoa Khóa học Giảng viên hướng dẫn : : : : : : Chính quy Công nghệ sinh học K45-CNSH CNSH - CNTP 2014– 2018 ThS: Nguyễn Thị Tình ThS : Vi Đại Lâm Thái Nguyên 2018 i LỜI CẢM ƠN Được đồng ý nhà trường,Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm , em tiến hành thực đề tài “Nghiên cứa kỹ thật trồng nấm lim xanh Ganoderma lucidum (Leyss Ex Fr.) Karst giá thể nhân tạo” Trong suốt trình thực tập phịng thí nghiệm Cơng nghệ Lên men, Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, em nhận nhiều giúp đỡ từ thầy cô hướng dẫn, bạn bè gia đình Trước hết, em xin chân thành cảm ơn sâu sắc tới ThS Vi Đại Lâm, ThS Nguyễn Thị Tình giảng viên Khoa CNSH - CNTP, tạo điều kiện tận tình giúp đỡ em hồn thành khố luận này, hướng dẫn em thao tác thực hành cho em sai lầm giúp em hồn thành tốt khố luận Em xin chân thành cảm ơn đến thầy cô Khoa CNSH - CNTP, trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tận tình bảo, giúp đỡ em q trình học tập hồn thành khố luận Cuối em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, người ln bên cạnh động viên giúp đỡ em suốt thời gian thực khoá luận Em xin chân thành cảm ơn! Thái nguyên, tháng 3, năm 2018 ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1 Sự tăng trưởng hệ sợi nấm Lim xanh môi trường nhân tạo 26 Bảng 4.2: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tốt TN1 bổ sung với hàm lượng phụ gia CaCO3 28 Bảng 4.3 Sự tăng trưởng hệ sợi nấm Lim xanh bổ sung phụ gia đường saccarose 29 Bảng 4.4 khả hình thành thể nấm Lim xanh chất thóc, vải, mùn cưa 31 Bảng 4.5 ảnh hưởng hàm lượng cám gạo đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 33 Bảng 4.6 ảnh hưởng hàm lượng CaCO3 đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 34 Bảng 4.7 ảnh hưởng hàm lượng đạm đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 36 Bảng 4.8 ảnh hưởng hàm lượng pepton đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 38 iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1: Các loại giá thể nhân tạo 26 Hình 4.2 hệ sợi nấm Lim xanh phát triển chất thóc 27 Hình 4.3 Sự tăng trưởng hệ sợi nấm Lim xanh bổ sung phụ gia đường saccarose 29 Hình 4.4 khả hình thành thể nấm Lim xanh chất thóc, vải, mùn cưa 30 Hình 4.5 ảnh hưởng hàm lượng cám gạo đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 32 Hình 4.6 ảnh hưởng hàm lượng CaCO3 đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 34 Hình 4.7 ảnh hưởng hàm lượng đạm đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 35 Hình 4.8 ảnh hưởng hàm lượng pepton đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 37 iv MỤC LỤC Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 mục tiêu nghiên cứu 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 ý nghĩa thực tiễn Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học 2.1.1 Giới thiệu chung nấm Lim xanh 2.1.2 Giá trị nấm Lim xanh 2.2 Tình hình nghiên cứu nước 12 2.2.1 Tình hình nghiên cứu giới 12 2.2.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 15 Phần ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Đối tượng (vật liệu) phạm vi nghiên cứu 18 3.2 thiết bị dụng cụ thí nghiệm 18 3.3 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 18 3.4 Nội dung nghiên cứu 18 3.5 Phương pháp nghiên cứu bố trí thí nghiệm 20 3.5.1.Thí nghiệm 1:Nghiên cứu ảnh hưởng số loại giá nhân tạo (Thóc, khô, mùn cưa) đến khả nhân giống nấm Lim xanh 20 3.5.2 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tốt TN1 bổ sung với hàm lượng phụ gia CaCO3 21 3.5.3.Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tốt TN2 kết hợp với phụ gia đường saccarose đến khả nhân giống nấm Lim Xanh 21 v 3.5.4.Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể nhân tạo đến ăn lan hệ sợi hình thành thể nấm Lim Xanh 22 3.5.5.Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt TN4 bổ sung với hàm lượng phụ gia cám gạo đến ăn lan hệ sợi hình thành thể 22 3.5.6.Thí nghiệm 6: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt TN5 kết hợp với hàm lượng CaCO3 đến ăn lan hệ sợi hình thành thể 23 3.5.7.Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt TN6 kết hợp với hàm lượng đạm đến ăn lan hệ sợi hình thành thể 23 3.5.8.Thí nghiệm 8: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt TN7 kết hợp với hàm lượng pepton đến ăn lan hệ sợi hình thành thể 24 3.6 Phương pháp đánh giá xử lý số liệu 24 3.7 Phương pháp bảo quản giống nấm 24 Phần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể nhân tạo (Thóc, khơ, mùn cưa) đến khả nhân giống nấm Lim xanh 26 4.2 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tốt TN1 bổ sung với hàm lượng phụ gia CaCO3 27 4.3 Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tốt TN2 kết hợp với phụ gia đường saccarose đến khả nhân giống nấm Lim Xanh 29 4.4 Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể nhân tạo (Thóc, khơ, mùn cưa) đến khả hình thành thể nấm Lim xanh 30 4.5 Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt TN4 bổ sung với hàm lượng phụ gia cám gạo đến hình thành thể nấm Lim xanh 32 vi 4.6 Thí nghiệm 6: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt TN5 kết hợp với hàm lượng CaCO3 đến hình thành thể nấm Lim xanh 34 4.7 Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt TN6 kết hợp với hàm lượng đạm đến ăn lan hệ sợi hình thành thể nấm Lim xanh 35 4.8 Thí nghiệm 8: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo tốt thí nghiệm kết hợp với hàm lượng pepton đến ăn lan hệ sợi hình thành thể nấm Lim xanh 37 Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 5.1 kết luận 39 5.2 kiến nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Việt Nam nước có khí hậu nhiệt đới, nắng ẩm mưa nhiều, thuận lợi cho loài nấm phát triển Tùy vào loại nấm mà mục đích sử dụng khác nhau, sử dụng làm nấm ăn hay làm nấm dược liệu Các loại nấm có tác dụng làm thuốc như: phịng chống khối u, tăng cường khả miễn dịch thể, thuốc trợ tim, làm giảm lượng mỡ máu, giải độc bổ gan, bổ dày, hạ đường huyết, chống phóng xạ…(như nấm linh chi, mộc nhĩ trắng, nấm hương…) Ngồi loại nấm ăn điểm nấm sò, nấm rơm, xem loại “rau sạch”, “thịt sạch”, giàu thành phần dinh dưỡng cao như: Protein, glucide, acid amin, vitamin , chất khoáng, chất đa lượng.Mặt khác, việc sản xuất nấm tận dụng sản phẩm phụ phế liệu, rơm rạ, mùn cưa, cỏ, bã mía…làm nguyên liệu cho sản xuất nấm, góp phần bảo vệ mơi trường - hạn chế ô nhiễm môi trường Ở nước ta , từ kỷ XVI nấm Linh chi biết đến loại dược liệu quý bổ dưỡng với nhiều loại khác như: Thanh chi, Bạch chi, Tử chi, Hồng chi, Xích chi Nấm Linh chi mọc gỗ lim người ta thường gọi Nấm Lim.Trong tự nhiên, nấm Lim xanh mọc ỏ̉ nơi rừng rậm, ánh sáng, độ ẩm cao thường xuất vào mùa mưa Nấm Lim xanh loài thường niên, tai nấm phát triển mùa Vì số lượng quần thể nấm Lim xanh hạn chế, với việc khai thác mức thời gian qua dẫn đến tình trạng nguy cấp loài nấm Trước nấm Lim xanh phát Thanh Hóa, Hà Tĩnh, Bình Phước thu hái cách tàn phá trở nên dần Nấm Lim xanh đưa vào danh lục đỏ thuốc Việt Nam( sách đỏ Việt Nam 2007) Tuy nhiên việc nuôi trồng sản xuất nấm Lim xanh gặp nhiều trở ngại cơng tác giống ni trồng, chất lượng giống không ổn định Để giải vấn đề nhằm đạt hiệu kinh tế sản xuất, việc nghiên cứu xây dựng quy trình phân lập nấm Lim xanh để nâng cao chất lượng giống, bảo tồn giống nấm Linh chi( Lim xanh) tiến hành thực đề tài “ Nghiên cứa kỹ thật trồng nấm lim xanh Ganoderma lucidum (Leyss Ex Fr.) Karst giá thể nhân tạo” 1.2 Mục đích nghiên cứu - Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống nấm Lim xanh giá thể nhân tạo - Tìm cơng thức phối trộn tối ưu với loại chất 1.3 mục tiêu nghiên cứu - Đánh giá ảnh hưởng số loại giá nhân tạo (Thóc, khô, mùn cưa) đến khả nhân giống nấm Lim xanh - Đánh giá ảnh hưởng số thành phần nguyên liệu hàm lượng phụ gia( cám gạo, đường glucose, bột nhẹ) đến khả ăn lan hệ sợi nấm tạo thể bịch nguyên liệu 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn 1.4.1 Ý nghĩa khoa học - Đánh giá thuận lợi khó khăn nguồn ngun liệu ni trồng nấm Linh chi trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên - Đánh giá ảnh hưởng yếu tố giá thể hợp chất tự nhiên quy trình phát triển meo giống thể nấm Linh xanh - Đánh giá ảnh hưởng hàm lượng bột nhẹ đến khả phát triển meo giống hình thành thể nấm Lim xanh 1.4.2 ý nghĩa thực tiễn - Khai thác nguồn nguyên liệu nuôi trồng nấm địa phương, bao gồm tất loại phế thải nông nghiệp giàu chất cellulose Figure 1.2 Plant-growth promoting microbes are capable of conferring benefits to multiple species of plant hosts, and of offering improved tolerance to multiple stresses simultaneously (Image from Coleman-Derr at al Front Microbiol., 06 June 2014) 1.3 Types of soil sample 1.3.1 Chemical soil Chemical soil is affected by mineral composition, organic matter, and environmental factors Soils can be contaminated with chemical either naturally or by human activity This soil used Chemical fertilizer so-called like that With Chemical used green manure (1 time) and chemical fertilizer N-P-K (16-8-8): 25kg/1.6m2 With Chemical used green manure and chemical fertilizer N-P-K (1515-15): 35kg/1.6m2 About Chemical used green manure and chemical fertilizer NP-K (16-8-8): 25kg/1.6m 1.3.2 Intensive Chemical soil Intensive Chemical soil is soil sample used a lot of chemical inside soil like their name with Intensive Chemical used chemical fertilizer N-P-K (15-15-15): 50kg/1.6m2, insecticide (2 times), liquid bio-fertilizer (3 times), after rice harvesting start to corn planting and use a lot of insecticides and chemical fertilizer With Intensive Chemical used weed killer and herbicide and insecticide (1 time), fertilizer: urea: 12.5kg/1.6m2(1 time), fertilizer formulate N-P-K (15-15-15): 50kg/1.6m2 About Intensive Chemical used herbicide and insecticide (1 time), fertilizer: urea: 20kg/1.6m2(1 time), fertilizer formulate N-P-K (15-15-15): 20kg/1.6m2 (1time) 1.3.3 Transition soil The name transition type refers to soils that possess more or less both chemical fertilizer and then did not use anymore only use organic fertilizer With Transition used insect dung: 30kg/1.6m2 and with Transition used photosynthetic bacteria: time About Transition used chicken dung: 150kg/1.6m2 and fermented banana shoot and photosynthetic bacteria every month 1.4 Objectives The purposes to study are: 1.4.1 To study and point out the effect of soil sample groups to growth and health, phenotype and microbiome system of rice plant 1.4.2 To study and evaluate soil types and environment for the development of the best rice plants 10 PART METHODOLOGY 2.1 Equipment and materials 2.1.1 Equipment Table 2.1 Equipment used for studies No Name of device Type Country Vortex shaker G-560E USA Centrifuge system ALLEGRA X-30 India Electrophoresis equipment HU13 UK Nano drop machine F869 Thailand Refrigerator ALLEGRA X-30R Germany pH meter AE150 Singapore Precision balance L610 Thailand Autoclave machine L1820 Germany Fume hood 2-410HC Thailand 10 Incubator chamber VWR / Shel Lab 5216 US 11 Drying oven WTBKB115/E2 Thailand 12 Gel documentation T-∅5×20-2A EU 13 Deep freezer VXE 380 Czech Republic 2.1.2 Materials Tubtim Chum Phae rice from 25 Moo 11 Ban Pongchueag, Namakhuea, Sahadsakhan, Kalasin 46140, Thailand Soil samples, soil standard, cow dung, rice bran, seed, pot 11 Small glass bead used for cell lysis and big glass bead used for release cell from soil Laboratory instruments such as a micropipette,15ml and 50ml falcon tube, Eppendorf tube, test tube rack, beaker, measuring cylinder, stirring bar, pipette tip, weighing paper, forceps, facemask, glove The chemical used in the experiment: 0.85% NaCl, 1M Tris-HCl, 1M EDTA, 1.5M NaCl, DI water, 10% SDS, capsule of activate charcoal were used for release DNA, 3M sodium acetate (pH:5.2), absolute ethanol, 30% PEG ( MW=8000) were used DNA clean soil chemical, phenol mixed with chloroform, isoamyl alcohol rate 25:24:1 were used for protein clean, chloroform, isoamyl rate 24:1 were used for phenol clean, isopropanol was used for DNA precipitate, ethanol 70% was used for wash DNA, magnetic, nuclease- free water for dissolve DNA Table 2.2 DNA extraction buffer No Constituents Amount 0.1 M Tris – HCl 2,6 ml 0.1 M EDTA 8.67 ml 1.5 M NaCl ( pH : ) 13 ml DI water 1.73 ml SDS 10% 2.6 ml Activate Charcoal capsule Autoclave: 121°C, time = 20 minutes 12 2.2 Methods 2.2.1 Soil sample preparation Table 2.3 Data of soil sample collected from somewhere in Thailand Name Address T1 Jorakhe, Name of owner Nongruaea, Jongrak Khon Kean T2 T3 C1 jarupunngam Mahasarakam year Srisopon Tapra, Mueang, Khon Kidsanatchai Start organic rice farm for Kean years Bankok, Sawadsitung Kokpochai, Malai Tongjarern Bankok, Bankok, Bankok, Kokpochai, Chuen Laokonka Moolnak, Grow rice more than 20 years Kokpochai, Mali Nadee Grow rice more than 20 years Kokpochai, Soodjai Khon Kean I2 Grow rice more than 20 years Khon Kean I1 years Start organic rice farm for Khon Kean C3 Start organic rice farm for Lerngphak, Koodrung, Pattareeya Khon Kean C2 Time for grow rice Start rice farm for years Prajummueang Pochai Sombul Start rice farm for years Kokpochai, Khon Kean Wongchaileng I3 Moolnak, Pochai Jiirapon Jaikachem Start rice farm for years Kokpochai, Khon Kean 13 Table 2.4 Weight amount of the soil sample in growth rice plant Soil Real weight Soil Real weight Soil Real weight sample soil for using sample soil for using sample soil for using C1/1 319 I1/1 325 T1/1 331 C1/2 321 I1/2 328 T1/2 331 C1/3 322 I1/3 327 T1/3 326 C2/1 314 I2/1 335 T2/1 300 C2/2 317 I2/2 309 T2/2 300 C2/3 308 I2/3 324 T2/3 300 C3/1 315 I3/1 337 T3/1 341 C3/2 308 I3/2 324 T3/2 328 C3/3 317 I3/3 315 T3/3 332 Weight soil samples and 500g of soil standard and 48g rice bran was mixed with cow dung in the bag and mix well together Then, pour into pot and added more kg of soil standard and mixed continue when finished add water more into pot did it flood and put pots outside of balcony overnight 2.2.2 Rice germination The seeds were soaked in water about minutes After soaked, the hollow seeds, the disease seeds or the underdevelopment seed were floated up surface water and removed Only collected the seeds precipitate on the bottom of the flask and then throw water out Bring to sowing into each pot put outside by way seedlings are pushed into the ground During germination, in the evening covered lid on the pot and in the morning take it out and add a little bit watery but not much to avoiding flooding and leading to rot seed Water need to get available in the bucket and put overnight for the components in water precipitate on the bottom of the bucket 2.2.3 Rice growing When grow rice added water every day and wait for about and days can saw rice germination with only the first small root and tiller, with two tiny leaves, have emerged from the rice seed and after week take germination out and only keep 14 the best seed with one seed in one pot and observe the different of rice plant about shape and tiller and color of leaves after every week and take a photo 2.2.4 Rice phenotype observation Observation of rice plant by counted tiller number of rice once time a week and take a photo of rice with a ruler beside for known the height of rice and observation the color of leaves of rice plant after every week and then compared the best rice and the worst rice in each group From each group chose the best rice and the worst rice in one group and comparison with the others group 2.2.5 Measure pH of soil sample Measure pH of the soil is important since it affects the growth of plants and the severity of some diseases pH affects the ability of plant roots to absorb nutrients For example: Calcium, phosphorus, potassium, and magnesium are likely to be unavailable to plants in acidic soils, while plants have difficulty absorbing copper, zinc, boron, manganese, and iron in basic soils The wrong pH can lock nutrients in the soil, making them unavailable to plant roots A pH that was too high or low can make disease, insect and weed problems worse Soil pH generally refers to the degree of soil acidity or alkalinity Chemically, it is defined as the log10 hydrogen ions (H+) in the soil solution The pH scale ranges from to 14; a pH of is considered neutral If pH values are greater than 7, the solution is considered basic or alkaline; if they are below 7, the solution is acidic The optimum pH range for most plants is between 5.5 and 7.5 * Method Sample collected include 27 soil sample with Chemical soil, Intensive Chemical soil Transition soil per pot into sterilized 50 ml tube Added DI water with 10 mL per tube Bring to vortexed shake mixture vigorously on 30 Centrifuge for at 8000 rpm Tested - the first turned on your pH meter and remove the cap to expose the sensor completely in the solution Record the reading on the meter 15 2.3 Inspection of quantity microbiome in Chemical, Intensive Chemical, Transition soil by DNA extraction * Prepared material Weigh approximately g of sample using a weighing paper Transfer the sample into 50 ml tube * Method Added g small glass beads and ml DNA extraction buffer Vortexed for minutes with per tube and hold it upright Added ml DNA extraction buffer no add SDS and vortex for minutes with per tube, hold it upright Added ml DNA extraction buffer no add SDS, no add activate charcoal and vortex for minutes with per tube, hold it upright Centrifuge for 15 minutes at 8000 rpm and collect supernatant transfer into 15 mL tube Centrifuge again minutes at 8000 rpm and collected supernatant Added 800 µl 3M sodium acetate and ml absolute ethanol Precipitated at -20⁰C for 30 minutes Centrifuge for 20 minutes at 8000rpm and collected pellet Re-suspend the pellet with 500 µl DI water 10 Added 500 µl Phenol: Chloroform: Isoamyl alcohol (25:24:1), centrifuge for at 13500 rpm and collected equeous phase Collected the first time about 400 µl and the second time about 350 µl In this step, done for time 11 Added ml Chloroform: Isoamyl alcohol (24:1), centrifuge for minutes at 13500 rpm and collected equeous phase In this step, done for time 12 Added 800 µl 3M sodium acetate and ml absolute ethanol 13 Precipitated at -20 ⁰C for 30 minutes 14 Centrifuge for 10 minutes at 13500 rpm and collected pellet 15 Washed with 1ml 70% ethanol, centrifuge for minutes at 13500 rpm and collected pellet In this step, done for time 16 Waited ethanol in sample dry at room temperature 16 17 Dissolved in 20 µl Nuclease – free water 2.4 Measure Nanodrop The NanoDrop microvolume sample retention system (Thermo Scientific NanoDrop Products) functions by combining fiber optic technology and natural surface tension properties to capture and retain minute amounts of sample independent of traditional containment apparatus such as cuvettes or capillaries Furthermore, the system employs shorter path lengths, which result in a broad range of nucleic acid concentration measurements, essentially eliminating the need to perform dilutions Reducing the volume of sample required for spectroscopic analysis also facilitates the inclusion of additional quality control steps throughout many molecular workflows, increasing efficiency and ultimately leading to greater confidence in downstream results * Method The first, clean the upper and lower optical surfaces of the microvolume spectrophotometer sample retention system by pipetting µL of clean deionized water onto the lower optical surface Closed the lever arm, ensuring that the upper pedestal comes in contact with the deionized water Lift the lever arm and wipe off both optical surfaces with a clean, dry, lint-free lab wipe Open the NanoDrop software and select the Nucleic Acid application Use a small-volume, calibrated pipettor to perform a blank measurement by dispensing µL of buffer onto the lower optical surface Lower the lever arm and select "Blank" in the Nucleic Acid application Once the blank measurement is complete, clean both optical surfaces with a clean, dry, lint-free lab wipe Choose the appropriate constant for the sample that is to be measured Dispense µL of nucleic acid sample onto the lower optical pedestal and close the lever arm Because the measurement is volume independent, the sample 17 only needs to bridge the gap between the two optical surfaces for a measurement to be made Select "Measure" in the application software The software will automatically calculate the nucleic acid concentration and purity ratios Following sample measurement, review the spectral output The software will automatically calculate the nucleic acid concentration and purity ratios Following sample measurement, review the spectral image to assess sample quality A typical nucleic acid sample will have a very characteristic profile 18 PART RESULTS AND DISCUSSIONS 3.1 The effect of the soil on the revolution of a rice plant with each Chemical, Intensive Chemical and Transition soil group Begun to counted tiller number of rice plant on week but compared the different of rice plant in each soil group from week but when compared the different of rice plant on week also did not the change much because in weeks is the rainy season and grow outside so soil grow rice always flood, this is not an ideal condition for plant growth It interferes with the transfer of nutrients from the soil to the plant's tillers and leaves The soil only needs to be kept moist about a thin layer of water (12 cm) on the surface of the soil during the period of growth when the plant is putting out tillers and leaves When the soil around rice plants' roots has abundant water, they can be "lazy" and need not grow very much This limits their ability to acquire nutrients from the soil so when the first time growth until week rice in each group did change non-significant about the height of rice and tiller change a little bit nonsignificant Rice plant started changing a lot on final week and so fast develop When it has begun to change about tiller and height choose the best rice plant and worst rice plant in Chemical soil group, Intensive Chemical soil group and Transition soil group for compare and the best rice plant and worst rice plant in three group for comparison 19 3.1.1 Comparison the different of rice plant about the color of rice leaves and the tiller number of rice plant in Chemical soil group Table 3.1 Variation in the phenotype of rice plant in Chemical soil group after every week from week until week Time The best rice plant The worst rice plant 35 days C1/3 C2/3 C3/3 C1/1 C2/1 C3/2 42 days C1/3 C2/3 C3/3 C1/2 C2/1 C3/2 49 days C1/3 C2/2 C3/3 C1/1 C2/1 C3/1 56 days C1/3 C2/2 C3/3 C1/1 C2/1 C3/1 20 Comparison the tiller number of rice plant in Chemical group Chemical Chemical Chemical AVERAGE OF TILERR NUMBER 60.00 50.00 40.00 30.00 20.00 10.00 0.00 Week Week Week Week Week Week TIME Figure 3.1 Comparison the average of the tiller number of rice plant in Chemical soil group from week until week Figure 3.1 Show the tiller number of rice plant in Chemical soil group by calculated error bar and saw the tiller change a lot with Chemical and change unequal with Chemical and Chemical With Chemical 1, the tiller number of rice plant develops equally after every week quite stable With Chemical 2, the tiller number of rice plant develops equally and the better with others but in week the tiller did not develop more and saw that the number of the tiller same with week About Chemical 3, The tiller of rice plant always not much with others but in week the tiller started fast to develop and became the plant with the number tiller best and when calculated error bar observation fluctuations quite much 21 3.1.2 Comparison the different of rice plant about the color of rice leaves and the tiller number of rice plant in Intensive Chemical soil group Table 3.2 Variation in the phenotype of rice plant in Intensive Chemical soil after every week from week until week Time The best rice plant The worst rice plant 35 days I1/1 I2/2 I3/2 I1/3 I2/3 I3/3 42 days I1/2 I2/1 I3/1 I1/3 I2/3 I3/3 49 days I1/2 I2/1 I3/2 I1/3 I2/3 I3/3 56 days I1/1 I2/1 I3/1 I1/2 I2/3 I3/3 22 Comparison the tiller number of rice plant in Intensive Chemical group Intensive Intensive intensive AVERAGVE OF TILLER NUMBER 60.00 50.00 40.00 30.00 20.00 10.00 0.00 Week Week Week Week Week Week TIME Figure 3.2 Comparison the average of the tiller number of rice plant in Intensive Chemical soil group from week until week Figure 3.2 Shows the tiller number of rice plant in Intensive Chemical soil Calculation error bar observed change non-significant of the tiller number but with Intensive Chemical changed a lot and this is rice plant got pathogen observed during growth rice With Intensive Chemical 1, the first time growing rice was the worst rice plant with the others but in week until week rice plant was better and in week Chemical best but apparently on week the tiller number more than Intensive Chemical With Intensive Chemical rice plant always develop non-significant the other groups and on week it the best With Intensive Chemical rice plant develops after every week and especially most developed at week Although rice plant this group in week did not the best plant but saw that after every week it always change a little bit about tiller and did not signal stop in any week About Intensive Chemical 3, this is the worst plant after week because saw that in the pot have pathogen and a lot of yellow leaves When yellow leaves dead and new leaves developed got so much tiller but tiller compare between the others pretty small, thin, short 23 ... trình nghiên đề tài ? ?Nghiên cứa kỹ thật trồng nấm lim xanh Ganoderma lucidum (Leyss Ex Fr. ) Karst giá thể nhân tạo? ??, rút kết luận sau: Giá thể thóc phù hợp có ưu cho khả nhân giống Lim xanh so... thật trồng nấm lim xanh Ganoderma lucidum (Leyss Ex Fr. ) Karst giá thể nhân tạo? ?? 1.2 Mục đích nghiên cứu - Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống nấm Lim xanh giá thể nhân tạo - Tìm cơng thức phối trộn tối... đến khả nhân giống nấm Lim Xanh Nôi dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể nhân tạo đến khả ăn lan hệ sợi nấm hình thành thể nấm lim xanh - Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể nhân tạo đến