HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM BÙI THỊ VIỆT HẰNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH GAN THẬN MỦ VÀ BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ TRA NUÔI TẠI TỈNH BẾN TRE VÀ AN GIANG NĂM 2016 Chuyên ngành: Nuôi trồng thủy sản Mã số: 60 62 03 02 Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Văn Long TS Kim Văn Vạn NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ học vị khác Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Bùi Thị Việt Hằng i LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cám ơn TS Nguyễn Văn Long TS Kim Văn Vạn tận tình hướng dẫn, giúp đỡ động viên suốt thời gian học tập thực luận văn Tôi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến q thầy khoa Thủy sản, Học viện Nông nghiệp Việt Nam quý thầy cô từ Viện nghiên cứu, Trường đại học dày công bảo, truyền đạt kiến thức cho thời gian qua Tôi chân thành cám ơn Lãnh đạo bạn đồng nghiệp Cục Thú y, Cơ quan Thú y vùng VI, VII, Chi cục Chăn nuôi Thú y, doanh nghiệp người nuôi cá tra tỉnh An Giang, Bến Tre tạo điều kiện tốt, tận tình giúp đỡ hỗ trợ tơi q trình triển khai thực đề tài Cám ơn bạn bè Lớp cao học Ni trồng thủy sản khóa 24 động viên, giúp đỡ tơi hồn thành khóa học Tơi xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến bố mẹ, chồng anh chị em gia đình dành nhiều thời gian giúp đỡ, động viên, khuyến khích chia sẻ với tơi năm tháng qua, giúp tơi có thêm nghị lực suốt khóa học Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Bùi Thị Việt Hằng ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN ix THESIS ABSTRACT x PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU 1.4 Ý NGHĨA KHOA HỌC CỦA ĐỀ TÀI 1.5 Ý NGHĨA THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 TÌNH HÌNH NI VÀ XUẤT KHẨU CÁ TRA 2.1.1 Tình hình sản xuất giống ni cá tra 2.1.2 Tình hình xuất cá tra 2.2 TỔNG QUAN VỀ BỆNH GAN THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA 2.2.1 Lịch sử bệnh 2.2.2 Tên bệnh 2.2.3 Tác nhân gây bệnh 2.2.4 Một số đặc điểm dịch tễ 2.2.5 Dấu hiệu bệnh lý 2.2.6 Tình hình bệnh gan thận mủ Việt Nam 2.3 TỔNG QUAN VỀ BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ TRA 10 2.3.1 Lịch sử bệnh 10 2.3.2 Tên bệnh 10 2.3.3 Tác nhân gây bệnh 10 2.3.4 Một số đặc điểm dịch tễ 10 2.3.5 Triệu chứng, bệnh tích 11 iii 2.3.6 Tình hình bệnh xuất huyết Việt Nam 11 2.4 TÌNH HÌNH NI VÀ DỊCH BỆNH TRÊN CÁ TRA TẠI BẾN TRE VÀ AN GIANG 12 2.4.1 Tình hình ni cá tra giai đoạn 2014 - 2016 12 2.4.2 Tình hình dịch bệnh cá tra giai đoạn 2014 – 2016 14 2.5 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH GAN THẬN MỦ VÀ BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ TRA 16 2.5.1 Tình hình nghiên cứu nước 16 2.5.2 Tình hình nghiên cứu giới 21 PHẦN NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 3.1 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU 23 3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 23 3.2.1 Nội dung nghiên cứu 23 3.2.2 Thời gian thực 23 3.2.3 Vật liệu nghiên cứu 23 3.2.4 Phương pháp nghiên cứu 24 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH GAN THẬN MỦ VÀ BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ TRA TẠI BẾN TRE VÀ AN GIANG 29 4.1.1 Phân tích đặc điểm dịch tễ theo khơng gian 29 4.1.2 Phân tích đặc điểm dịch tễ theo thời gian 32 4.1.3 Phân tích đặc điểm dịch tễ đối tượng 38 4.2 CÁC YẾU TỐ NGUY CƠ LIÊN QUAN ĐẾN SỰ LƯU HÀNH CÁC BỆNH TRÊN CÁ TRA TẠI BẾN TRE VÀ AN GIANG 40 4.2.1 Phân tích nhị biến 40 4.2.2 Phân tích đa tầng – nhiều biến 45 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 5.1 Kết luận 48 5.2 Kiến nghị 48 5.2.1 Đối với người sản xuất giống, nuôi cá tra: 49 5.2.2 Đối với quan quản lý nhà nước: 49 5.2.3 Các đề xuất nghiên cứu tiếp theo: 49 iv TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC 57 Phụ lục 1: PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN VỀ CÁC YẾU TỐ NGUY CƠ TẠI CƠ SỞ NUÔI CÁ TRA 57 Phụ lục 2: PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN VỀ CÁC YẾU TỐ NGUY CƠ TẠI CƠ SỞ SẢN XUẤT GIỐNG CÁ TRA 61 Phụ lục 3: MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THỰC HIỆN 65 Phụ lục 4: SƠ ĐỒ XÉT NGHIỆM ĐỐI VỚI MẪU GIÁM SÁT 69 v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt ASC The Aquaculture Stewardship Council ASEAN The Association of Southeast Asian Nations AUC Area Under the Curve BAP Best Aquaculture Practices CFU Colony forming unit CI Confidence interval DNA Deoxyribonucleic acid ĐBSCL Đồng sông Cửu Long EU European Union FSIS The Food Safety and Inspection Service GlobalGAP Global Good Agricultural Practices GTM Gan thận mủ NACA Network of Aquaculture Centers in Asia-Pacific NN&PTNN Nông nghiệp Phát triển nông thôn NTTS Nuôi trồng thủy sản OIE World Organisation for Animal Health OR Odds ratio PCR Polymerase chain reaction RNA Ribonucleic acid ROC Receiver-Operating Characteristic XH Xuất huyết VietGAP Vietnamese Good Agricultural Practices vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thị trường xuất cá tra Việt Nam từ năm 2011 - 2016 Bảng 2.2 Phạm vi xuất bệnh gan thận mủ cá tra Bảng 2.3 Phạm vi xuất bệnh xuất huyết cá tra 12 Bảng 2.4 Tình hình dịch bệnh cá tra địa phương giai đoạn 2014 - 2016 14 Bảng 2.5 Tần suất báo cáo bệnh gan thận mủ xuất huyết An Giang từ năm 2014 - 2016 16 Bảng 3.1 Số lượng cá thu/mẫu để xét nghiệm bệnh 26 Bảng 4.1 Kết phân tích mơ tả lưu hành bệnh gan thận mủ xuất huyết cá tra Bến Tre An Giang năm 2016 35 Bảng 4.2 Kết phân tích nhị biến yếu tố nguy liên quan đến lưu hành bệnh gan thận mủ xuất huyết Bến Tre An Giang năm 2016 40 Bảng 4.3 Kết phân tích đa tầng, nhiều biến định lượng yếu tố nguy có liên quan đến lưu hành bệnh gan thận mủ bệnh xuất huyết 45 vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Tình hình ni xuất cá tra từ năm 2001 - 2015 Hình 2.2 Phạm vi mức độ mắc bệnh cá tra từ năm 2012 - 2014 Hình 2.3 Phạm vi mức độ bệnh GTM cá tra từ năm 2012 - 2014 ĐBSCL Hình 4.1 Bản đồ phân bố sở nuôi cá tra phát bệnh gan thận mủ bệnh xuất huyết tỉnh Bến Tre 30 Hình 4.2 Ni cấy vi khuẩn A hydrophila thạch máu (khuẩn lạc gây dung huyết) 31 Hình 4.3 Ni cấy vi khuẩn A hydrophila môi trường thạch chuyên biệt (Aeromonas agar) 31 Hình 4.4 So sánh tỷ lệ lưu hành bệnh gan thận mủ bệnh xuất huyết huyện giám sát 32 Hình 4.5 So sánh tỷ lệ lưu hành bệnh gan thận mủ bệnh xuất huyết đợt giám sát 33 Hình 4.6 Bản đồ phân bố mầm bệnh gan thận mủ xuất huyết theo không gian (a, b: Bến Tre; c, d: An Giang) 34 Hình 4.7 Đường cong ROC với giá trị AUC 0,75 cho thấy mơ hình phân tích đa biến đủ mạnh kết đáng tin cậy 47 viii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Luận văn cung cấp thông tin khoa học số đặc điểm dịch tễ bệnh gan thận mủ vi khuẩn Edwardsiella ictaluri bệnh xuất huyết vi khuẩn Aeromonas hydrophila cá tra nuôi Kết giúp người ni cá tra quan chuyên ngành thú y xây dựng triển khai giả phòng, chống dịch bệnh cá tra nuôi phù hợp hiệu Kết nghiên cứu cho thấy, giai đoạn từ tháng 1-12/2016, tổng số 89,74% sở sản xuất cá tra giống ni cá tra thương phẩm nhiễm hai hai tác nhân gây bệnh gan thận mủ (E ictaluri) bệnh xuất huyết (A hydrophila) Trong đó, 100% sở sản xuất cá tra giống 87,88% sở ni cá tra thương phẩm có hai tác nhân gây bệnh Tỷ lệ lưu hành bệnh xuất huyết 8,83%, cá tra giống sản xuất ương nuôi 8,60% cá tra nuôi thương phẩm 7,61% Các huyện tỉnh An Giang có tỷ lệ lưu hành trung bình 10,58%, cao nhiều so với huyện tỉnh Bến Tre 4,42%; Tỷ lệ lưu hành gan thận mủ 3,36%, cá tra giống sản xuất ương nuôi 2,56% cá tra nuôi thương phẩm 3,01% Các huyện tỉnh An Giang có tỷ lệ lưu hành trung bình 2,07%, thấp nhiều so với huyện tỉnh Bến Tre 3,98% Kết phân tích đa biến cho thấy có yếu tố có liên quan đến nguy phát sinh dịch bệnh, điển nguy bị bệnh sở không chứng nhận vệ sinh thú y 2,10 (95% CI 1,45 - 3,04) lần so với sở chứng nhận vệ sinh thú y Các yếu tố cấp sở chiếm 91% tổng số nguy bị bệnh; yếu tố cấp độ tỉnh đóng vai trị 9% Trong số 22 kháng sinh thử, có 20 (chiếm 91%) loại kháng sinh kháng với vi khuẩn A hydrophila 15 (chiếm 68%) loại kháng sinh kháng với vi khuẩn E ictaluri Các kết nêu cho thấy, giải pháp phòng, chống cần tập trung sở sản xuất, nuôi cá tra việc thực chủ sở đóng vai trị quan trọng, định vào kết phòng, chống dịch bệnh ix PHỤ LỤC Phụ lục 1: PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN VỀ CÁC YẾU TỐ NGUY CƠ TẠI CƠ SỞ NUÔI CÁ TRA PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN VỀ CÁC YẾU TỐ NGUY CƠ TẠI CƠ SỞ NUÔI CÁ TRA Số phiếu:…… ……………………… Ngày thu thập:……………… Địa chỉ: huyện……… tỉnh…………… (Áp dụng cho sở ni cá tra) I THƠNG TIN CỦA NGƯỜI TRẢ LỜI PHỎNG VẤN Họ tên: ……………………………………Điện thoại ………………………… Vai trò: Chủ sở Cán kỹ thuật Khác II THÔNG TIN CHUNG VỀ CƠ SỞ Tên sở/công ty điều tra: ………………………….………………………… a Địa (khóm/cụm/cồn - ấp - xã: ………………………………………… b Có sổ nhật ký ao ni cá tra hay khơng? Có sổ lưu máy tính sổ ghi chép (sổ giấy) Khơng c Tọa độ (GPS): Kính độ …………………………… Vĩ độ: ……………… d Chứng nhận quốc tế: ………………………………………………………… e Chứng nhận vệ sinh thú y? Có Khơng Tình hình ni sở nay: 2.1 Tổng số ao nuôi sở ………(ao) với tổng diện tích: ….………… 2.2 Tổng số ao lắng: ……………… (ao) với diện tích: ………………… Chi tiết ao nuôi (tại thời điểm thu thập thông tin): TT Phân loại ao theo kích cỡ cá (g/con) Dưới 300 Từ 300 – 600 Trên 600 Ao trống không nuôi Tổng số Ao (ao) Diện tích (ha) Tổng số giống thả (nghìn) 58 Nguồn gốc giống (mua, tự sản xuất) Số ao đạng bị bênh (ao) Tổng diện tích bệnh (ha) Con giống có kiểm dịch khơng? Con giống có nguồn gốc từ tỉnh nào? Có Khơng Trong tỉnh Khơng rõ Tỉnh khác: …………… Con giống xét nghiệm bệnh trước thả ni? ……………………… Xử lý cá trước thả giống xuống ao: Không kiểm tra, thả trực tiếp vào ao nuôi Tắm muối, nồng độ nuối: …………………….g/m3 nước Thả vào ao cách ly để theo dõi Biện pháp khác: …………………………………………………………………… Khử trùng dụng cụ sau lần dùng?: Khơng Có, cách đây: Rửa sạch, phơi nắng Khử trùng hóa chất: ………………… khác: ………………………………………………………………………… Khử trùng sau nhiều lần dùng? cách đây: khác: …………… Khơng Có, khoảng ………… ngày/lần Rửa sạch, phơi nắng Khử trùng hóa chất 10 Nguồn nước cấp thay nước: - Lấy trực tiếp từ sông vào ao nuôi Qua hệ thống ao lắng - Khử trùng nước trước đưa vào nao ni? khơng có, hóa chất: …………………………………………………… với nồng độ …………… /m3 11 Xử lý nước ao nuôi - Khử trùng nước ao nuôi q trình ni? chất: ……………… với nồng độ ……………/m3 khơng có, hóa tân suất khử trùng: ……ngày/lần - Khử trùng nước trước xả sông? không ……… …… ………… với nồng độ …………… …/m3 có, hóa chất: … … 12 Chế độ thay nước hút bùn đáy ao ni: TT Kích cỡ cá Tần suất thay nước (bao nhiêu ngày thay 01 lần) Tỷ lệ nước thay (%) Sau thả cá giống Thả - 300 g/con Dưới tháng 300 - 600gr/com - tháng Trên 600g/con - tháng 13 Tại ao ni, có đo tiêu môi trường không? nghị cung cấp thông tin chi tiết sau: 59 Tần suất hút bùn đáy ao (lần) Khơng, Có, có đề TT Chỉ tiêu Giai đoạn đo (trước, q trình ni?) pH Trước, Trong Độ kiềm Trước, Trong Nhiệt độ Trước, Trong DO (oxy hòa tan) Trước, Trong H2S Trước, Trong NH3 Trước, Trong NO3 Trước, Trong Trước, Trong Trước, Trong Thời gian đo (lúc giờ?) Tần suất đo (ngày /lần) Giá trị trung bình Sáng: h Chiều: .h 14 Thức ăn cho cá: Công nghiệp Tự chế biến - Trung bình thức ăn đợt (lần) mua cấp sở dùng ngày cá ăn hết? ……………………(ngày) 15 Bảo quản thức ăn: - Kho chứa thức ăn: Khơng có - Kê giá/kệ (ballet): Khơng Có Có V Dịch bệnh xử lý dịch bệnh thời điểm thu thập thông tin (theo bệnh) TT Tên bệnh Xuất Gan Vàng Trắng Bệnh huyết thận mủ da gan trắng khác (Tích tương ướng với bệnh mang cột tên bệnh) Tổng số ao bị bệnh Danh sách (mã) ao bị bệnh: Diện tích bệnh Kích cỡ cá bệnh: Dưới 300 g/con 300-600 g/con Trên 600 g/con Ngày phát bệnh (tại 60 TT Tên bệnh (Tích tương ướng với bệnh cột tên bệnh) Xuất huyết Gan thận mủ Vàng da Trắng gan trắng mang ao bị bệnh ao bị bệnh) Dưới 300 g/con 300-600 g/con Trên 600 g/con Tổng số cá bị thiệt hại Dưới 300 g/con 300-600 g/con Trên 600 g/con Chỉ tiêu môi trường đo ao bệnh pH Độ kiềm Nhiệt độ DO NH3 NO3 H2S Tên kháng sinh sử dụng Liêu điều trị 10 Đánh giá hiệu sử dụng Lấy mẫu xét nghiệm bệnh ao số: Xin trân trọng cảm ơn anh chị sở cung cấp thông tin! Đại diện sở nuôi Cán vấn 61 Bệnh khác Phụ lục 2: PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN VỀ CÁC YẾU TỐ NGUY CƠ TẠI CƠ SỞ SẢN XUẤT GIỐNG CÁ TRA PHIẾU THU THẬP THÔNG TIN VỀ CÁC YẾU TỐ Số phiếu:…… ………………… NGUY CƠ TẠI CƠ SỞ SẢN XUẤT GIỐNG CÁ TRA Ngày thu thập:…………………… (Áp dụng cho sở sản xuất giống cá tra) Địa chỉ: huyện…… tỉnh………… I THÔNG TIN CỦA NGƯỜI TRẢ LỜI PHỎNG VẤN Họ tên: ……………………………………Điện thoại ………………………… Vai trò: Chủ sở Cán kỹ thuật Khác II THÔNG TIN CHUNG VỀ CƠ SỞ Tên sở/công ty điều tra: ………………………….…………………………… a Địa (khóm/cụm/cồn - ấp - xã: ………………………………………… …… b Có sổ nhật ký ao ni cá tra hay khơng? Có sổ lưu máy tính sổ ghi chép (sổ giấy) Khơng c Tọa độ (GPS): Kính độ …………………………… Vĩ độ: …………………… e Chứng nhận vệ sinh thú y? Có Khơng Tình hình ni sở nay: 2.1 Tổng số tổng diện tích sản xuất: ….………… 2.2 Tổng số ao lắng: ……………… (ao) với diện tích: ………………… Chi tiết ao ni (tại thời điểm thu thập thông tin): TT Phân loại ao theo kích cỡ cá (g/con) Cá bố mẹ Cá bột Cá hương Cá giống Số Số bể/ao Diện tích ni Nguồn gốc (tên tinh mua, tự sản xuất) Tình trạng sức khỏe Dùng Số bể/ thức ao ăn tươi bệnh sơng? (có, khơng) Cá bố mẹ: Có tiêm vacxin khơng? Khơng Có, tên vacxin: ……………………… Tuổi cá bố mẹ: Dưới năm: ……………… con, xét nghiệm bệnh: ……….… Từ 3-5 năm: ………………… Con, xét nghiệm bệnh: ……….……… 62 Diện tích bệnh (ha) Từ 5-10 năm: ………………… con, xét nghiệm bệnh: ……….…… Thức ăn: 4.1 Thức ăn tươi sống cho cá mẹ? :……………………………………………… 4.2 Thức ăn tươi sống cho cá con? gồm ……………………………………… Dụng cụ: Dùng chung cho nhiều ao/bể Dùng riêng cho ao Khử trùng dụng cụ sau lần dùng?: Không Có, cách đây: Rửa sạch, phơi nắng Khử trùng hóa chất: …………………… khác: ………………………………………………………………………… Khử trùng sau nhiều lần dùng? ngày/lần cách đây: khác: …………… Khơng Có, khoảng ………… Rửa sạch, phơi nắng Khử trùng hóa chất Nước dùng sản xuất (sinh sản) giống - Có hệ thống lọc nước cho trại giống: Khơng Có - Trong trình đó, nước có khử trùng khơng? Khơng Có, tên hóa chất:…………… …………… nồng độ dùng: …… - Có quy trình xử lý nước thải? Khơng Có Chế độ thay nước hút bùn đáy ao nuôi: TT Loại cá Tần suất thay nước (bao nhiêu ngày thay 01 lần) Tỷ lệ nước thay (%) Bố mẹ Cá bột Cá hương Cá giống 10 Tại ao ni, có đo tiêu mơi trường không? nghị cung cấp thông tin chi tiết sau: TT Tần suất hút bùn đáy ao (lần) Chỉ tiêu Giai đoạn đo (trước, q trình ni?) pH Trước, Trong Độ kiềm Nhiệt độ DO Trước, Trước, Trước, Trong Trong Trong Thời gian đo (lúc giờ?) 63 khơng, Tần suất đo (ngày /lần) Giá trị trung bình Có, có đề Đối tượng áp dụng (cá bố mẹ, cá bột, cá hương, cá giông?) TT Chỉ tiêu Giai đoạn đo (trước, q trình ni?) H2S NH3 NO3 Trước, Trước, Trước, Trước, Trước, Thời gian đo (lúc giờ?) Tần suất đo (ngày /lần) Giá trị trung bình Đối tượng áp dụng (cá bố mẹ, cá bột, cá hương, cá giông?) Trong Trong Trong Trong Trong V Dịch bệnh xử lý dịch bệnh thời điểm thu thập thông tin TT Tên bệnh Xuất Gan Ký sinh (Tích tương ứng với bệnh huyết thận trùng cột tên bệnh) mủ Tổng số ao/bể bị bệnh Danh sách (mã) ao bị bệnh: Diện tích bệnh Loại cá bị bệnh Cá bố mẹ Cá bột Cá hương Cá giống Ngày phát bệnh (tại ao bị bệnh ao bị bệnh) Cá bố mẹ Cá bột Cá hương Cá giống Tổng số cá bị thiệt hại Cá bố mẹ Cá bột Cá hương 64 Trắng Bệnh gan, trắng khác mang TT Tên bệnh Xuất Gan Ký sinh (Tích tương ứng với bệnh huyết thận trùng cột tên bệnh) Trắng Bệnh gan, trắng khác mang mủ Cá giống Chỉ tiêu môi trường đo ao bệnh pH Độ kiềm Nhiệt độ DO NH3 NO3 H2S Tên kháng sinh sử dụng Liêu điều trị 10 Đánh giá hiệu sử dụng Lấy mẫu xét nghiệm bệnh ao số: Xin trân trọng cảm ơn anh chị sở cung cấp thông tin! Đại diện sở nuôi Cán vấn 65 Phụ lục 3: MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THỰC HIỆN Ao ni cá tra thương phẩm (trái) cá tra giống (phải) tỉnh An Giang Thu mẫu cá tra nuôi thương phẩm An Giang 66 Phỏng chủ sở nuôi để thu thập thông tin An Giang Thu mẫu nước ao nuôi cá tra tỉnh An Giang 67 Lấy mẫu nội tạng cá phòng xét nghiệm Cơ quan Thú y vùng VI 68 Xử lý mẫu bùn nước Cơ quan Thú y vùng VII Kỹ thuật viên thao tác máy định danh tự động Vitek Thử sinh hóa vi khuẩn A hydrophila Đọc kết xét nghiệm bệnh GTM realtime PCR Định danh vi khuẩn Kit API 20E 69 Phụ lục 4: SƠ ĐỒ XÉT NGHIỆM ĐỐI VỚI MẪU GIÁM SÁT Mẫu giám sát Mẫu nước + mẫu bùn (mẫu gộp) Mẫu cá nguyên (3-5 con/mẫu) Mô cá (gan, thận, tỳ tạng) TSA 18-24 giờ/ 28 C ml (nước bùn) + ml BHI BHI 18-24 giờ/ 28 0C 18-24 giờ/ 28 C Realtime PCR (+) TSA GSP 18-36 giờ/ 28 C Kết định danh (+) Định danh (API 20E kit) TSA 18-24 giờ/ 28 0C (+) 18-24 giờ/ 28 0C TSA 18-24 giờ/ 28 C NB + Glycerol MHA + đĩa kháng sinh 18-24 giờ/ 28 0C Kết KSĐ 18-24 giờ/ 28 0C Lưu giữ giống -20 0C TSA: Trytone Soya Agar; BHI: Brain Heart Infusion; MHA: Mueller-Hinton Agar; NB: Nutrient Broth 70 TĨM TẮT QUY TRÌNH V613-74 Mẫu cá tươi ngun Mang, gan, thận, lách cắt nhuyễn đồng (>=1g) Thạch Aeromonas medium base (370C/ 24h) TSA (370C/ 24h), nhuộm Gram Đánh tan khuẩn lạc 3ml nước muối sinh lý Cho ống canh khuẩn vào máy đo độ đục Đảm bảo độ đục theo yêu cầu (0,58-0,63 McF) Định danh Kháng sinh đồ Hút 145µl huyền phù mẫu sang ống 3ml nước muối Lắp card GN vào cassette Lắp card kháng sinh vào cassette Đưa cassette vào máy Khai báo thông tin mẫu Đọc kết định danh kháng sinh đồ 71 TÓM TẮT QUY TRÌNH V613-67 Cá nghi bệnh Thu nguyên con, đem phịng thí nghiệm, lấy thận, não Lấy thận, não Cắt nhuyễn, đồng (>= 1g) Tăng sinh canh BHI (300C/ 36-48 giờ) Ly trích DNA (200µL canh tăng sinh) Realtime PCR Đọc kết Âm tính Dương tính Phân lập, định danh Âm tính Dương tính Kháng sinh đồ Đọc kết 72 ... sở nuôi cá tra phát bệnh gan thận mủ bệnh xuất huyết tỉnh Bến Tre thể Hình 4.1 30 Hình 4.1 Bản đồ phân bố sở nuôi cá tra phát bệnh gan thận mủ bệnh xuất huyết tỉnh Bến Tre Đối với bệnh xuất huyết. .. phối hợp Chi cục Chăn nuôi Thú y tỉnh Bến Tre An Giang, tiến hành đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh gan thận mủ bệnh xuất huyết cá tra nuôi tỉnh Bến Tre An Giang năm 2016? ?? 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN... PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH GAN THẬN MỦ VÀ BỆNH XUẤT HUYẾT TRÊN CÁ TRA TẠI BẾN TRE VÀ AN GIANG 29 4.1.1 Phân tích đặc điểm dịch tễ theo khơng gian