BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN TUẤN LINH t×m hiĨu chế đề kháng carbapenem carbapenemase 100 chủng enterobacteriaceae kháng carbapenem kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến, khoanh giấy phối hợp pcr LUN VN THC SỸ Y HỌC HÀ NỘI, 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NI NGUYN TUN LINH tìm hiểu chế đề kháng carbapenem carbapenemase ë 100 chđng enterobacteriaceae kh¸ng carbapenem b»ng kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến, khoanh giấy phối hợp pcr Chuyờn ngnh: Vi sinh y hc Mó số : 60720115 LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC Hướng dẫn khoa học: 1.TS Phạm Hồng Nhung 2.TS Trần Minh Châu HÀ NỘI, 2018 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CDC : Centers for Disease Control and Prevention : Trung tâm kiểm sốt phòng ngừa dịch bệnh Hoa Kỳ CLSI : The Clinical and Laboratory Standards Institute : Viện Tiêu chuẩn Lâm sàng Xét nghiệm Hoa Kỳ CPE : Carbapenemase producing Enterobacteriaceae : Enterobacteriaceae sinh carbapenemase CRE : Carbapenem resistant Enterobacteriaceae : Enterobacteriaceae kháng carbapenem DDST : Double Disc Synergy Test : Phương pháp đặt hai khoanh giấy DNA : Deoxyribonucleic acid DPH : Dehydropeptidase enzyme EDTA : Ethylenediaminetetraacetic acid ESBL : Extended-spectrum beta-lactamase : Beta-lactamase phổ rộng EUCAST : European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing : Ủy ban thử nghiệm độ nhạy cảm kháng sinh châu Âu FDA : Food and Drug Administration : Cục quản lý thục phẩm dược phẩm Hoa Kì GIM : German imipenemase IMI : Imipenem hydrolyzing lactamase IMP : Imipenemase CE-IVD : Conformité Européenne-In Vitro Diagnostics : Chứng cho xét nghiệm chẩn đoán y tế liên minh châu Âu KPC : Klebsiella pneumoniae carbapenemase MALDI-TOF MS : Matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry :Máy định danh dựa khối phổ MBLs : Metallo-β-lactamases mCIM : Modified carbapenem inactivation method MHA MHT MIC MRSA NDM-1 NMC OXA PBP PCR SIM SME SMP TSB VIM : Kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến : Müller-Hinton agar : Thạch Muller Hinton : Modified Hodge test : : Kỹ thuật Hodge cải tiến : Minimum inhibitory concentration : Nồng độ ức chế tối thiểu : Methicillin-resistant Staphylococcus aureus : Tụ cầu vàng kháng methicillin : New Delhi metallo-β-lactamase-1 : Not metalloenzyme carbapenemase : Oxacillin-hydrolyzing : Penicillin-binding protein : Polymerase Chain Reaction : Phản ứng trùng hợp chuỗi : Seoul imipenemase : Serratia marcescens enzyme : Sao Paulo metallo-β-lactamase : Trypton soya broth : Canh thang trypton soya : Verona integron–encoded metallo-β-lactamase MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, kháng kháng sinh vấn đề cộm nan giải y tế giới Theo đánh giá tổ chức y tế giới công bố năm 2017, loài vi khuẩn thuộc họ Enterobacteriaceae kháng carbapenem xếp vào nhóm đầu vi khuẩn kháng thuốc nguy hiểm [1] Kháng sinh nhóm carbapenem kháng sinh có phổ kháng khuẩn rộng họ beta-lactam Các kháng sinh thuộc nhóm lựa chọn cuối cho trường hợp nhiễm khuẩn nặng đa kháng, đặc biệt nhiễm trực khuẩn Gram âm kháng với hầu hết thuốc khác Nhiễm vi khuẩn kháng carbapenem thường nhiễm khuẩn bệnh viện Việc điều trị cho bệnh nhân khó khăn vi khuẩn thường nhạy với loại kháng sinh Ở nước phát triển, tỷ lệ tử vong bệnh nhân nhiễm vi khuẩn lên đến 50% [2], [3] Hơn nữa, nguy hiểm vi khuẩn Enterobacteriaceae kháng carbapenem chế đề kháng đa dạng khả lan truyền ngang gen kháng thuốc chúng Theo chế kháng carbapenem chia làm nhóm Enterobacteriaceae sinh carbapenemase Enterobacteriaceae kháng carbapenem khơng sinh carbapenemase Nhóm sinh carbapenemase chiếm số lượng lớn gây bệnh hậu nặng nề hơn, chúng tập trung nghiên cứu nhiều [4] Do tính chất đề kháng kháng sinh khác nhóm carbapenemase, việc phân loại Enterobacteriaceae theo nhóm carbapenemase có ý nghĩa quan trọng dịch tễ lựa chọn kháng sinh điều trị Ở nước ta nay, nghiên cứu Enterobacteriaceae kháng carbapenem chưa nhiều, đặc biệt nghiên cứu Enterobacteriaceae sinh carbapenemase, chưa có thống kê đầy đủ tỷ lệ phân bố gen sinh carbapenemase Ở bệnh viện Bạch Mai trước đây, Enterobacteriaceae kháng carbapenem xác định phương pháp kháng sinh đồ, sau khả sinh carbapenemase phát kỹ thuật Hodge cải tiến Hiện nay, theo khuyến cáo CLSI 2018, kỹ thuật Hodge cải tiến bắt đầu thay kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến [24] Đây phương pháp dễ thực hiện, chi phí thấp, CLSI khuyến cáo có độ nhạy độ đặc hiệu cao, nhiên phương pháp chưa áp dụng nhiều Việt Nam nên cần kiểm nghiệm thực tế Ở Việt Nam, việc xác định xác nhóm carbapenemase thực nghiên cứu, không thực thường quy bệnh viện Để xác định nhóm carbapenemase, chúng tơi lựa chọn tìm hiểu phương pháp sử dụng khoanh giấy phối hợp D73C Mast phương pháp sử dụng thẻ kháng sinh đồ NMIC-500 BD có kết hợp phát CPO (Carbapenemase-Producing Organisms) Đây phương pháp có chứng nhận IVD, dễ thực với điều kiện trang thiết bị Bạch Mai, nhiên chưa có nhiều nghiên cứu đánh giá giới Chúng lựa chọn phương pháp nhằm đánh giá hiệu tính khả thi phương pháp áp dụng thực tế Chúng sử dụng PCR làm tiêu chuẩn đối chứng cho phương pháp, đồng thời lấy kết PCR để đánh giá tương đối tỷ lệ nhóm gen carbapenemase Ngồi ra, dựa vào kết kháng sinh đồ thẻ NMIC-500, chúng tơi đánh giá sơ tình trạng đề kháng kháng sinh chủng Enterobacteriaceae kháng carbapenem Từ mục tiêu thực nghiên cứu “Tìm hiểu chế đề kháng carbapenem carbapenemase 100 chủng Enterobacteriaceae kháng carbapenem kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến, khoanh giấy phối hợp PCR” Với mục tiêu sau: 1: Phát carbapenemase kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến khoanh giấy phối hợp 100 chủng Enterobacteriaceae kháng carbapenem phân lập bệnh viện Bạch Mai năm 2017-2018 2: Xác định gen mã hoá carbapenemase kỹ thuật PCR 10 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Kháng sinh nhóm carbapenem: 1.1.1.Cấu trúc Carbapenem thuộc nhóm beta-lactam, có đặc điểm khác với betalactam khác vòng beta-lactam: vị trí C thay S, có nối đơi C2 C3 Ngồi cấu hình khơng gian, carbapenem có cấu hình trans, penicillin hay cephalosporin có cấu hình cis Chính khác biệt làm cho carbapenem có đặc tính ưu việt kháng hầu hết betalactamase [5], [6], [7] Với nhóm R1 khác nhau, cho carbapenem khác Hình 1.1: Cấu trúc hóa học kháng sinh nh`````````óm beta-lactam [6] 40 Bảng 3.6 Tỷ lệ phần trăm nhạy – kháng tigecycline Tigecycline S I R KPC 77.8% 19.4% 2.8% KPC+NDM 100.0% 0.0% 0.0% NDM 87.1% 12.9% 0.0% NDM+OXA 100.0% 0.0% 0.0% OXA-48 like 92.0% 8.0% 0.0% Tổng 86.9% 12.1% 0.9% 41 Bảng 3.7 Tỷ lệ phần trăm nhạy – kháng gentamicin Gentamicin S R KPC 69.4% 30.6% KPC+NDM 71.4% 28.6% NDM 19.4% 80.6% NDM+OXA 87.5% 12.5% OXA-48 like 52.0% 48.0% Tổng 52.3% 47.7% 42 Bảng 3.8 Tỷ lệ phần trăm nhạy – kháng trimethoprim / sulfamethoxazole Trimethoprim / S R KPC 19.4% 80.6% KPC+NDM 0.0% 100.0% NDM 12.9% 87.1% NDM+OXA 100.0% 0.0% OXA-48 like 52.0% 48.0% Tổng 29.0% 71.0% sulfamethoxazole Bảng 3.9 Tỷ lệ phần trăm nhạy – kháng minocycline Minocycline S I R KPC 41.7% 13.9% 44.4% KPC+NDM 14.3% 0.0% 85.7% NDM 22.6% 32.3% 45.2% NDM+OXA 25.0% 37.5% 37.5% OXA-48 like 56.0% 44.0% 0.0% Tổng 36.4% 27.1% 36.4% 43 Chương BÀN LUẬN 4.1 Bàn luận thử nghiệm xác định carbapenemase: 4.1.1 Thử nghiệm bất hoạt carbapenemase cải tiến: - Với thử nghiệm mCIM, 107/107 chủng xác định dương tính, đạt độ nhạy 100% Do khơng có chủng âm tính nên không xét độ đặc hiệu Tuy nhiên, lần thử nghiệm đầu tiên, sử dụng khuẩn lạc 24 lưu trữ trong tủ mát 4oC 3-7 ngày ( để thuận tiện cho việc gom chủng), kết 100 chủng dương tính với mCIM chủng âm tính giả, chủng âm thuộc nhóm D Các chủng âm tính sau ria lại làm lại mCIM sau ủ 18-24 cho kết dương tính Kết cuối mCIM 107 chủng dương tính thực quy trình hướng dẫn CLSI Ở rút kết luận: không tiện thực mCIM ngay, phòng xét nghiệm gom lưu trữ mẫu tủ mát 4oC Nếu sử dụng chủng để 24 giờ, trường hợp âm tính giả có tỷ lệ xảy cao hơn, đặc biệt chủng sinh carbapenemase yếu chủng nhóm D, bắt buộc phải làm lại mCIM với chủng tươi 18-24 để điểm định lại kết Nếu thực quy trình mCIM từ đầu với chủng tươi, không khuyến cáo làm lại thử nghiệm có kết âm tính 4.1.2 Thử nghiệm khoanh giấy phối hợp: - Sử dụng khoanh giấy D73C Mast, đọc kết phần mềm “D73C-Carba_Plus_Calculator_V2.4.xlsx” hãng cung cấp theo hướng dẫn nhà sản xuất Có 76 chủng xác định sinh carbapenemase, 27 chủng cho kết âm tính, chủng cho kết khơng xác định 31 chủng âm tính khơng xác định thể tính kháng với khoanh kháng sinh A, nên 44 phiên giải sinh carbapenemase, cần xác minh phương pháp khác Độ nhạy phương pháp D73C 71% - Phân nhóm carbapenemase 56 chủng xác định xác, chiếm 52.3% 12 chủng mang gen nhóm D phiên giải thành nhóm B chủng mang gen nhóm B nhóm D phiên giải thành chủng nhóm B chủng nhóm D 31 chủng lại xác định sinh carbapenemase, khơng có chủng carbapenemase âm tính Trong chủng không xác định rõ ràng chế: có chủng mang gen nhóm A nhóm B, 21 chủng KPC chủng NDM - Do chế test dựa vào khác biệt đường kính ức chế khoanh giấy phối hợp với chất ức chế carbapenemase theo nhóm với khoanh kháng sinh carbapenem; chủng mang gen nhóm A nhóm B kháng lại khoanh phối hợp penem với chất ức chế carbapenemase nhóm A khoanh phối hợp penem với chất ức chế carbapenemase nhóm B, dẫn đến kết khơng phiên giải rõ ràng Với chủng KPC NDM mang gen kháng D73C khơng xác định xác nhóm được, dựa kết đo đường kính ức chế khoanh giấy, nghi ngờ chủng có mang gen kháng lại chất ức chế KPC chất ức chế NDM dẫn đến khoanh giấy A, B, C bị kháng Điều cảnh báo báo cáo Đặc biệt có chủng NDM khơng phiên giải thể nhạy cảm với chất ức chế KPC, nghi ngờ chủng không biểu mạnh gen NDM đề kháng carbapenem nhờ phối hợp chế khác Do không đủ điều kiện nên làm thêm xét nghiệm để kiểm chứng nghi ngờ - Ở 12 chủng mang gen nhóm D phiên giải thành nhóm B chủng mang gen nhóm B nhóm D phiên giải thành chủng 45 nhóm B chủng nhóm D, kết đường kính vùng ức chế thể kiểu hình nhóm D ( đường kính vùng ức chế khoanh Temocillin < 10mm) nhóm B ( hiệu đường kính vùng ức chế khoanh penem phối hợp MβL với khoanh penem đơn > 5mm) Khi hiệu đường kính vùng ức chế khoanh penem phối hợp MβL với khoanh penem đơn độc > 5mm, phần mềm phiên giải sang nhóm B, bỏ qua tính chất đề kháng Temocillin Rõ ràng cách phiên giải hãng ưu tiên để định nhóm A B trước, sau xét đến nhóm D Việc chủng mang gen nhóm D thể kiểu hình nhóm B cho thấy hoạt chất ức chế MβL hãng có tác dụng ức chế OXA-48, khơng biết xác thành phần chất ức chế MβL khoanh nên không kiểm chứng nghi ngờ Điều gây phiên giải sai lệch chủng nhóm B nhóm D - Tổng kết lại Về phát carbapenemase, D73C đạt độ nhạy 71% theo phiên giải phần mềm hãng; đọc kĩ đường kính khoanh giấy tính kết “ có khả sinh carbapenemase” “sinh carbapenemase” độ nhạy đạt 100% Về phân nhóm carbapenemase, D73C cho kết xác với 52,3% chủng thử nghiệm, tỷ lệ kết xác theo nhóm : nhóm A: 41,7% , nhóm 90,3%, nhóm D: 52% Khoanh giấy D73C khơng phiên giải xác chủng có nhiều chế đề kháng carbapenem: chủng mang chế phân giải carbapenem, chủng KPC mang gen phân giải chất ức chế betalactamase Với chủng nhóm D, xảy trường hợp phiên giải lỗi sang nhóm B - Từ nghiên cứu chúng tơi nhận thấy khoanh giấy D73C có nhiều thiếu sót: cách phiên giải chưa rõ ràng, xác; khơng xác định chủng Enterobacteriaceae phối hợp chế kháng carbapenem 46 4.1.2 Sử dụng thẻ kháng sinh đồ NMIC-500 BD: Sử dụng thẻ kháng sinh đồ NMIC-500 BD Cả 107 chủng xác định sinh carbapenemase Phân nhóm carbapenemase 73 chủng xác định xác, chiếm 68.2% chủng mang gen nhóm B nhóm D phiên giải thành nhóm D 26 chủng lại xác định có sinh carbapenemase, khơng có chủng carbapenemase âm tính Trong chủng khơng xác định rõ ràng chế: có chủng mang gen nhóm A nhóm B, 16 chủng KPC chủng NDM Do chế xét nghiệm dựa vào khác biệt phát triển vi khuẩn giếng kháng sinh carbapenem phối hợp với chất ức chế carbapenemase theo nhóm với giếng kháng sinh carbapenem, chủng mang gen nhóm A nhóm B kháng lại chất ức chế nhóm A B, dẫn đến kết không phiên giải rõ ràng Chúng nghi ngờ chủng KPC NDM không phiên giải kết có mang gen kháng lại chất ức chế KPC chất ức chế NDM Tất chủng nhóm D phát xác, chủng mang gen nhóm B nhóm D phiên giải nhóm D Việc phát nhóm D dựa tính đề kháng Temocillin Tổng kết lại: thẻ kháng sinh đồ NMIC-500 cho kết xác với 68.2% chủng thử nghiệm, tỷ lệ kết xác theo nhóm : nhóm A: 55,6% , nhóm B: 90,3%, nhóm D: 100% Thẻ NMIC-500 khơng có hiệu chủng có nhiều chế đề kháng carbapenem: chủng mang gen carbapenemase, chủng KPC mang gen phân giải chất ức chế betalactamase Với chủng nhóm D, thử nghiệm đạt độ nhạy 100% 47 Đánh giá riêng việc phân loại carbapenemase, dù hiệu khoanh giấy D73C, NMIC-500 không phù hợp để sử dụng thực tế, xác định xác 68.2% trường hợp, khơng thể xác định có phối hợp chế đề kháng Tuy nhiên NMIC-500 có ưu điểm tích hợp kết kháng sinh đồ cho trực khuẩn Gram âm, đặc biệt có thêm kháng sinh ceftazidime/avibactam có hiệu điều trị cao cho chủng carbapenemase nhóm A nhóm D; dùng sàng lọc carbapenemase với độ nhạy phát carbapenemase nghiên cứu 100% Nhược điểm kháng sinh đồ NMIC-500 số loại kháng sinh chưa đầy đủ, khoảng giá trị MIC kháng sinh ngắn, vừa đủ để phân biệt S, I, R; nhiều trường hợp khơng xác định xác giá trị MIC để phục vụ cho điều chỉnh liều thuốc cho bệnh nhân 4.2 Bàn luận đặc điểm đề kháng kháng sinh chủng Enterobacteriaceae sinh carbapenemase Với kháng sinh ceftazidime/avibactam, avibactam khơng ức chế carbapenemase nhóm B, CZA không khuyến cáo sử dụng cho chủng mang gen NDM Với chủng KPC OXA-48-like, 95,1 % số chủng nhạy cảm với CZA Với kháng sinh Amikacin, 74,8% số chủng nhạy cảm có chủng trung gian chiếm 0,9% AK tác dụng tất nhóm carbapenemase mức độ nhạy cảm nhóm khác nhau, chủng NDM có tỷ lệ nhạy cảm thấp ( 48,4%), nhóm KPC có tỷ lệ nhạy cảm cao (88,9%) Các chủng mang gen carbapenemase có tỷ lệ nhạy cảm cao so với nhóm mang gen kháng: KPC+NDM: 100%, NDM+OXA-48-like: 87,5% nhiên số chủng thử nghiệm chưa đủ lớn chế đề kháng chưa tìm hiểu rõ nên nghiên cứu dừng mức thống kê số liệu không đưa giả thuyết giải thích 48 Cùng thuộc nhóm Aminoglycosid, kháng sinh Gentamicin có tỷ lệ nhạy cảm thấp nhiều so với Amikacin 52,3% số chủng nhạy cảm với GN, chủng NDM có tỷ lệ nhạy thấp 19,4%, chủng KPC có tỷ lệ nhạy cảm cao 69,4% Các chủng mang gen carbapenemase có tỷ lệ nhạy cảm cao so với nhóm mang gen kháng: KPC+NDM: 71,4%, NDM+OXA-48-like: 87,5% 76,6% số chủng nhạy cảm với Fosfomycin; 5,6% số chủng trung gian 17,8% đề kháng Mức độ đề kháng nhóm khác nhau, nhóm KPC có tỷ lệ đề kháng cao 25% Tigecycline kháng sinh cho hiệu cao thử nghiệm này: 86,9% số chủng nhạy cảm; 12,1% trung gian, có chủng kháng thuộc nhóm KPC chiếm 0,9% Nhóm KPC có tỷ lệ nhạy cảm thấp nhất: 77,8% nhạy cảm: 19,4% trung gian Minocycline có hiệu thấp nhiều, có 36,4% số chủng nhạy cảm Trong nhóm NDM có tỷ lệ nhạy cảm thấp nhất: 22,6% Trong kháng sinh nhạy cảm Trimethoprim/ sulfamethoxazole kháng sinh có hiệu thấp nhất: 29% số chủng nhạy Nhóm NDM có tỷ lệ nhạy cảm thấp nhất: 12,9% Theo lý thuyết, nhóm NDM khơng phân giải Aztreonam, thường đề kháng hay mang kèm men phân giải AZT ( ví dụ: CTX-M, CMY-type ESBLs) Ở có 2/31 chủng NDM nhạy cảm với AZT (6,5%) Rõ ràng AZT lựa chọn hợp lý với chủng carbapenemase, kể với nhóm NDM 49 Các chủng OXA-48-like thường đánh giá phân giải yếu kháng sinh nhóm carbapenem nhóm cephalosporin thệ 2,3 Tuy nhiên, nghiên cứu chủng OXA-48-like phần lớn đề kháng hết carbapenem cephalosporin, có 16% số chủng OXA-48-like cho kết trung gian với carbapenem 16% số chủng OXA-48-like cho kết nhạy với cefoxitin ceftazidime Có thể phần lớn chủng OXA-48-like kết hợp thêm chế đề kháng khác mà nghiên cứu chúng tơi khơng có điều kiện tìm hiểu sâu Colistin thường coi giải pháp cuối trường hợp kháng carbapenem Tuy nhiên, có 7/107 chủng kháng với colistin (chiếm 6,6%) giá trị MIC colistin thẻ NMIC-500 không chia nhỏ không CLSI công nhận nên phân tích sâu 50 KẾT LUẬN - Để phát carbapenemase, phương pháp hiệu quả, tiện lợi mCIM Ở nghiên cứu này, phương pháp mCIM đạt 100% độ nhạy, độ đặc - hiệu không đánh giá khơng có chủng carbapenemase âm tính Để phân loại chế đề kháng, phương pháp thực có nhiều thiếu sót Phương pháp PCR cho độ nhạy độ đặc hiệu cao phát gen kháng có cặp mồi Chi phí u cầu nhân lực, thiết bị phương pháp PCR chưa phù hợp với điều kiện thực tế Phương pháp dùng khoanh giấy D73C phân loại xác 52.3% số chủng nghiên cứu, gặp lỗi phiên giải chủng nhóm D So với khoanh giấy D73C, phương pháp dùng thẻ kháng sinh đồ NMIC-500 đạt hiệu cao phiên giải xác nhóm D không đủ tiêu chuẩn để sử dụng thực tế Nguyên nhân vấn đề phương pháp phân loại dựa vào kiểu hình khơng thể xác định xác chủng có phối hợp chế đề kháng chủng mang gen carbapenemase chủng carbapenemase có kháng chất ức chế betalactamase Để giải vấn đề này, cần sử dụng phương pháp xác định kiểu gen với xác định kiểu hình, cách khơng phù hợp để áp dụng - phòng xét nghiệm thơng thường Xét tỷ lệ nhóm carbapenemase, chúng tơi thấy Việt Nam, có chủ yếu nhóm gen KPC, NDM OXA-48-like với tỷ lệ nghiên cứu 4:4:3; có chủng mang gen carbapenemase Do cỡ mẫu chưa đủ lớn nên tỷ lệ có giá trị tham khảo chưa thể đại diện cho khu - vực miền Bắc Về tính chất đề kháng chủng sinh carbapeneamase, chúng tơi nhận thấy nhóm kháng sinh có hiệu điều trị cho Enterobacteriaceae sinh carbapenemase Colistin, Tigecycline, Amikacin, Fosfomycin Gentamicin Riêng Ceftazidime/avibactam có tác dụng tốt chủng 51 nhóm A D Tính riêng theo nhóm chủng NDM có tỷ lệ đề kháng với kháng sinh cao - Có vấn đề đáng quan tâm tính kháng kháng sinh chủng Enterobacteriaceae sinh carbapenmase có xu hướng gia tăng Chúng tơi đốn ngun nhân tượng di truyền ngang gen đề kháng chọn lọc thói quen sử dụng kháng sinh bác sĩ, dẫn đến tình trạng gia tăng chủng mang nhiều chế đề kháng gây khó khăn việc xác định chế điều trị Để chứng thực đánh giá mức độ quan trọng vấn đề cần có nhiều nghiên cứu chuyên sâu TÀI LIỆU THAM KHẢO WHO (2017) WHO publishes list of bacteria for which new antibiotics are urgently needed http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2017/bacteria-antibioticsneeded/en/ Xem ngày 19/07/2017 CDC (2015) Facility Guidance for Control of Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) – November 2015 Update CRE Toolkit Victoria A Parker, Caroline K Logan, Brian Currie cộng (2014) Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae (CRE) Control and Prevention Toolkit Latania K Logan, Robert A Weinstein (2017) The Epidemiology of Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae: The Impact and Evolution of a Global Menace The Journal of Infectious Diseases, 215(S1), S28–36 Zhanel G.G., Wiebe R., Dilay L cộng (2007) Comparative review of the carbapenems Drugs, 67(7), 1027–1052 Papp-Wallace K.M., Endimiani A., Taracila M.A cộng (2011) Carbapenems: Past, Present, and Future ▿ Antimicrob Agents Chemother, 55(11), 4943–4960 Mouton J.W., Touzw D.J., Horrevorts A.M cộng (2000) Comparative pharmacokinetics of the carbapenems: clinical implications Clin Pharmacokinet, 39(3), 185–201.khơng có free Breilh D., Texier-Maugein J., Allaouchiche B cộng (2013) Carbapenems J Chemother Florence Italy, 25(1), 1–17 Pharmacist’s letter (2007) Comparison of carbapenem antibiotics 10 Nguyễn Thị Xuyên Đồng, Lương Ngọc Khuê, Trần Quỵ (2015) Hướng dẫn sử dụng kháng sinh Nhà xuất Y học 11 Amerinet (2007) Updated comparison of cabapenem antimicrobials PharmAdvisor, 14(4), 1-9 khơng có free 12 Queenan A.M Bush K (2007) Carbapenemases: the Versatile βLactamases Clin Microbiol Rev, 20(3), 440–458 13 Alina Iovleva Yohei Do (2017) Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae Clin Lab Med, 37(2):303-315 14 EUCAST (2017) EUCAST guidelines for detection of resistance mechanisms and specific resistances of clinical and/or epidemiological importance Version 2.01 15 Osei Sekyere J., Govinden U., Essack S.Y (2015) Review of established and innovative detection methods for carbapenemase-producing Gramnegative bacteria J Appl Microbiol, 119(5), 1219–1233 16 CDC (2009) Modified Hodge Test for Carbapenemase Detection in Enterobacteriaceae https://www.cdc.gov/hai/pdfs/labsettings/hodgetest_carbapenemase_enterobac teriaceae.pdf Xem ngày 19/07/2017 17 Walsh T.R., Toleman M.A., Poirel L cộng (2005) Metallo-β-Lactamases: the Quiet before the Storm? Clin Microbiol Rev, 18(2), 306–325 18 Hammoudi D, Moubareck CA Sarkis DK (2014) How to detect carbapenemase producers? A literature review of phenotypic and molecular methods Journal of Microbiological Method, 107(2014), 106-118 19 Pasteran F., Mendez T., Guerriero L cộng (2009) Sensitive Screening Tests for Suspected Class A Carbapenemase Production in Species of Enterobacteriaceae J Clin Microbiol, 47(6), 1631–1639 20 bioMérieux - Culture Media | product - chromID® http://www.biomerieux-culturemedia.com/product/1-chromid-carba CARBA Xem ngày: 02/08/2017 21 van der Zwaluw K., de Haan A., Pluister G.N cộng (2015) The Carbapenem Inactivation Method (CIM), a Simple and Low-Cost Alternative for the Carba NP Test to Assess Phenotypic Carbapenemase Activity in GramNegative Rods PLoS ONE, 10(3) 22 Tests for biochemical detection of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae | Atlas of Science Xem ngày: 02/08/2017 23 Lutgring J.D Limbago B.M (2016) The Problem of CarbapenemaseProducing-Carbapenem-Resistant-Enterobacteriaceae Detection J Clin Microbiol, 54(3), 529–534 24 Jean B Patel, Melvin P Weinstein, George M Eliopoulos cộng (2017) M100 Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 27th ed Clinical and Laboratory Standards Institute 25 Mast Group (2016) Mastdiscs combi Carba plus (Enterobacteriaceae) IFUS http://www.mastgrp.com/IFUS/IFU190_GB.pdf Đã xem: 08/08/2017 26 Mast Group (2016) Mastdiscs combi Carba plus (Enterobacteriaceae) Flier http://www.mastgrp.com/Identification%20strips%20discs%20and %20rings/Glossies/ZT171%20-%20D73C%20Carba%20Plus%20Flier%20%20v1.0.pdf Đã xem: 08/08/2017 27 Doyle D., Peirano G., Lascols C cộng (2012) Laboratory Detection of Enterobacteriaceae That Produce Carbapenemases J Clin Microbiol, 50(12), 3877–3880 ... carbapenem kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến, khoanh giấy phối hợp PCR Với mục tiêu sau: 1: Phát carbapenemase kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến khoanh giấy phối hợp 100 chủng Enterobacteriaceae. .. trạng đề kháng kháng sinh chủng Enterobacteriaceae kháng carbapenem Từ mục tiêu chúng tơi thực nghiên cứu Tìm hiểu chế đề kháng carbapenem carbapenemase 100 chủng Enterobacteriaceae kháng carbapenem. .. DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN TUẤN LINH t×m hiĨu chế đề kháng carbapenem carbapenemase 100 chủng enterobacteriaceae kháng carbapenem kỹ thuật bất hoạt carbapenem cải tiến,