BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ ĐỘ NHẠY CẢM CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmuns), CÁ RÔ PHI (Oreochromis niloticus) VÀ CÁ CHÉP (Cyprinus carpio) ĐỐI VỚI ẤU TRÙNG SÁN LÁ (Haplorchis pumilio) Sinh viên thực : PHAN THỊ BÍCH TUYỀN Ngành : Ni trồng Thủy sản Chuyên ngành : Ngư Y Niên khóa : 2008 – 2012 Tháng 7/2012 ĐÁNH GIÁ ĐỘ NHẠY CẢM CỦA CÁ TRA ( Pangasianodon hypophthalmus), CÁ RÔ PHI (Oreochromis niloticus) VÀ CÁ CHÉP (Cyprinus carpio) ĐỐI VỚI ẤU TRÙNG SÁN LÁ (Haplorchis pumilio) Tác giả PHAN THỊ BÍCH TUYỀN Khóa luận đệ trình để đáp ứng u cầu cấp Kỹ sư Nuôi trồng Thủy sản, Chuyên ngành Ngư Y Giáo viên hướng dẫn: TS ĐINH THỊ THỦY ThS HỒ THỊ TRƯỜNG THY Tháng 7/2012 i LỜI CẢM TẠ Lời em xin kính chúc sức khỏe gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban giám hiệu trường đại học Nông Lâm TP HCM, Ban chủ nhiệm Khoa thủy sản nói chung mơn Bệnh học Thủy sản nói riêng, tồn thể q thầy ngồi khoa Thủy Sản tận tâm giảng dạy, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm chuyên môn, kỹ sống làm việc, hướng dẫn em suốt thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Ban giám đốc Trung Tâm Quốc Gia Quan Trắc Cảnh Báo Mơi Trường Phòng Ngừa Dịch Bệnh Thủy Sản Khu Vực Nam Bộ – Viện Nghiên Cứu Ni Trồng Thủy Sản II, q thầy anh chị quản lý phòng thí nghiệm thuộc Trung Tâm Quốc Gia Quan Trắc Cảnh Báo Mơi Trường Phòng Ngừa Dịch Bệnh Thủy Sản Khu Vực Nam Bộ nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt q trình nghiên cứu thực khóa luận tốt nghiệp Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cô Hồ Thị Trường Thy – Bộ môn bệnh học thủy sản, trường đại học Nông Lâm TP HCM cô Đinh Thị Thủy - Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản II, hướng dẫn em tận tình phương pháp thực đề tài giúp đỡ chỉnh sửa đề cương, báo cáo bảo vệ khóa luận tốt nghiệp em Đặc biệt, xin gởi lòng biết ơn đến cha mẹ ni dưỡng, dạy dỗ kề vai, sát cánh bên suốt chặn đường ngồi ghế nhà trường Đồng thời, gửi lời cảm ơn đến tất anh chị bạn bè quan tâm, động viên giúp đỡ nhiều thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, kiến thức giới hạn, bước đầu làm quen với phương pháp nghiên cứu khoa học nên luận văn khơng thể tránh khỏi thiếu sót Rất mong đón nhận ý kiến đóng góp q thầy bạn để luận văn hoàn chỉnh ii TÓM TẮT Đề tài: “Đánh giá độ nhạy cảm cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus ) cá chép (C carpio) ấu trùng sán (H pumilio)” tiến hành từ tháng 2/2012 đến 6/2012 phòng thí nghiệm thuộc Trung Tâm Quốc Gia Quan Trắc CBMT PNDBTS KVNB – Viện NCNT Thủy Sản II Nghiên cứu xác định tỷ lệ nhiễm hậu ấu trùng (Haplorchis cercariae) ốc (Melanoides tuberculatus) thu ao nuôi cá tra, cá rô phi cá chép bờ kênh dọc ao nuôi thuộc hai tỉnh An Giang Bến Tre; tỷ lệ nhiễm cao chiếm 16,84 % với ốc thu tỉnh Bến Tre 6,16 % với ốc thu An Giang Nghiên cứu chứng minh mối quan hệ vòng đời sống sán (Haplorchis cercariae), với ký chủ trung gian thứ ốc (M tuberculatus), ký chủ trung gian thứ hai cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus), cá chép (C carpio) Khi gây nhiễm 21000 sán (Haplorchis cercariae)/60 cá loại, sau 14, 21 30 ngày gây nhiễm, kết ấu trùng sán (H pumilio) nhạy cảm cá tra (P hypophthalmus), tiếp đến cá chép (C carpio) sau cá rô phi (O niloticus) Thật vậy, kết đợt thí nghiệm ghi nhận tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis pumilio cá tra chiếm từ 50,0 % đến 75,0 %; tiếp đến cá chép có tỷ lệ nhiễm từ 35,0 % đến 60,0 % sau cá rô phi có tỷ lệ nhiễm từ 20,0 % đến 35,0 % Cường độ nhiễm ấu trùng cá tra có số cao (chiếm 32,5 - 37,0 ấu trùng/cá) so với cường độ nhiễm cá rô phi (chiếm 19,7 24,0 ấu trùng/cá) cá chép (18,5 - 25,4 ấu trùng /cá) Bên cạnh đó, nghiên cứu ghi nhận thời gian gây nhiễm không ảnh hưởng đến tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm sán Haplorchis pumilio ba nhóm cá iii MỤC LỤC Trang Trang tựa i Lời cảm tạ ii Tóm tắt iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách bảng vii Danh sách hình đồ thị viii Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt Vấn Đề 1.2 Nội dung đề tài 1.3 Mục tiêu Chương TỔNG QUAN 2.1 Đặc điểm sinh học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) 2.2 Đặc điểm sinh học cá rô phi (Oreochromis niloticus) 2.3 Đặc điểm sinh học cá chép (Cyprinus carpio) 2.4 Sơ lược ốc (Melanoides tuberculatus) 2.5 Sơ lược ấu trùng (metacercaria) Haplorchis pumilio 2.5.1 Phân loại 2.5.2 Hình thái 2.5.3 Chu kỳ phát triển ấu trùng sán (Haplorchis pumilio) 2.5.4 Tác hại ấu trùng sán (Haplorchis pumilio) cá người 10 2.5.6 Tình trạng nhiễm ấu trùng sán (Haplorchis pumilio) người 10 2.5.7 Một số nghiên cứu báo cáo tóm tắt trước nhiễm ấu trùng sán (Haplorchis pumilio) cá nuôi 11 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 3.1 Thời gian nghiên cứu 12 3.2 Địa điểm nghiên cứu 12 3.3 Vật liệu nghiên cứu 12 3.3.1 Dụng cụ 12 iv 3.3.2 Hóa chất 13 3.4 Đối tượng nghiên cứu 13 3.5 Phương pháp nghiên cứu 13 3.5.1 Phương pháp thu mẫu ốc 13 3.5.2 Phương pháp kích thích ốc tiết dịch để thu hậu ấu trùng sán (Haplorchis cercariae)13 3.5.3 Phương pháp bố trí hệ thống thí nghiệm 14 3.5.3.1 Bố trí cá .14 3.5.3.2 Bố trí gây nhiễm sán (giai đoạn hâụ ấu trùng Haplorchis cercariea) cá tra, cá rô phi cá chép .15 3.5.4.Phương pháp chăm sóc quản lý 15 3.5.4.1 Thức ăn 15 3.5.4.2 Vệ sinh, thay nước .16 3.5.5 Phương pháp thu sán (giai đoạn ấu trùng Haplorchis metacercariae) 16 3.5.6 Phương pháp định danh sán (giai đoạn ấu trùng Haplorchis metacercariae) 16 3.5.7 Phương pháp tính tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm ấu trùng (Haplorchis metacercariae) cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) 17 3.5.8 Phân tích xử lý số liệu 17 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 4.1 Tỷ lệ nhiễm (%) sán (hậu ấu trùng Haplorchis cercariae) ốc 18 M tuberculata thu ĐBSCL 18 4.2 Kết mô tả định loại sán ( giai đoạn hậu ấu trùng Haplorchis cercariae) 19 4.3 Kết gây nhiễm hậu ấu trùng (Haplorchis cercariae) cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) 21 4.4 Kết xác định ấu trùng (Haplorchis metacercariae) từ ký chủ trung gian thứ hai (cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép ta (C Carpio)) 25 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 29 5.1 Kết luận 29 5.2 Đề nghị 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO 31 PHỤ LỤC v DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT P hypophthalmus : Pangasianodon hypophthalmus O niloticus : Oreochromis niloticus C carpio : Cyprinus carpio M tuberculata : Melanoides Tuberculata H pumilio : Haplorchis pumilio SC : Scales (vảy) OS : Oral suckers (giác bám miệng) H : Hooks (Gai) KST : Ký sinh trùng ĐBSCL : Đồng Bằng Sông Cửu Long TTQG QUAN TRẮC : Trung Tâm Quốc Gia Quan Trắc Cảnh Báo Mơi Trường CBMT PNDBTS Phòng Ngừa Dịch Bệnh Thủy Sản Khu Vực Nam Bộ - KVNB – Viện NCNT Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thủy Sản II Thủy Sản II vi DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 4.1 Tỷ lệ nhiễm (%) (hậu ấu trùng Haplorchis cercariae) ốc M Tuberculatus 18 Bảng 4.2 Đặc điểm hình thái học kích thước sán (giai đoạn hậu ấu trùng Haplorchis cercariae) .20 Bảng 4.3: Tỷ lệ nhiễm (%) ấu trùng Haplorchis metacercariae ba lồi cá thí nghiệm 21 Bảng 4.4: Thời gian gây nhiễm ảnh hưởng đến tỷ lệ nhiễm (%) Haplorchis metacercariae ba loài cá thí nghiệm 21 Bảng 4.5: Cường độ nhiễm trung bình ấu trùng Haplorchis metacercariae ba lồi cá thí nghiệm 23 Bảng 4.6 : Thời gian gây nhiễm ảnh hưởng đến cường độ nhiễm trung bình Haplorchis metacercariae ba lồi cá thí nghiệm .23 Bảng 4.7 Đặc điểm hình thái học kích thước sán Haplorchis pumilio (ấu trùng Haplorchis metacercariae nang) 28 vii DANH SÁCH CÁC HÌNH ẢNH VÀ ĐỒ THỊ Đồ thị 4.1 Tỷ lệ nhiễm ấu trùng (Haplorchis metacercariae) theo ngày gây nhiễm 22 Đồ thị 4.2 Cường độ nhiễm trung bình ấu trùng (Haplorchis metacercariae) .24 Hình 2.1 Cá tra (P hypophthalmus) sử dụng thí nghiệm .3 Hình 2.2 Cá rơ phi (O niloticus) sử dụng thí nghiệm Hình 2.3 Cá chép (C carpio) sử dụng thí nghiệm .7 Hình 2.4 A,B Ốc Melanoides tuberculatus sử dụng thí nghiệm Hình 2.5 Vòng đời sán truyền qua cá (http://fibozopa2.ria1.org/) 10 Hình 3.1 Ao cá tra thu ốc M tuberculatus tỉnh Bến Tre 12 Hình 3.2 Máy đo pH dùng thí nghiệm .13 Hình 3.3 Ốc (Melanoides tuberculata) kích thích tiết dịch nhờn ánh đèn 14 Hình 3.4 Bể bố trí thí nghiệm 15 Hình 3.5 A, B Kính giải phẩu tủ ủ dùng thí nghiệm 16 Hình 4.1 Hậu ấu trùng Haplorchis cercariae .19 Hình 4.2 A,B Trứng (Haplorchis) thu từ cá sau gây nhiễm 25 Hình 4.3 Ấu trùng (Haplorchis metacercaria) bung vỏ từ trứng (Haplorchis) .25 Hình 4.4 A,B,C Ấu trùng H pumilio (SC) vảy, (OS) giác bám miệng, (H) gai 26 Hình 4.5 (trái) Hậu ấu trùng H pumilio (thanh đo = 100 µm) (Skov et al., 2009) 27 Hình 4.6 (phải) Ấu trùng bung vỏ Haplorchis pumilio, (thanh đo = 50 µm) (Skov et al., 2009) 27 viii Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt Vấn Đề Cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) loài cá ni có giá trị kinh tế cao đối tượng nuôi truyền thống vùng ĐBSCL, với sản lượng nuôi trồng hàng năm không ngừng tăng lên sản lượng thủy sản nuôi năm 2011 ĐBSCL đạt gần 2,2 triệu tăng 252.000 so với năm 2011 Do đó, nghề ni cá khơng tạo thêm thu nhập mà chúng mang lại cho người nguồn thực phẩm dồi dào, đáp ứng nhu cầu tiêu thụ nước Tuy nhiên với diện tích ni trồng thủy sản ngày mở rộng làm cho dịch bệnh xảy thường xuyên hơn, bệnh vi khuẩn, vi rút bệnh ký sinh trùng loài cá nuôi phần ao nuôi cá thường xuất nhiều lồi ốc có loài ốc (M tuberculatus) tám loài ốc xác nhận đóng vai trò vật chủ trung gian chứa ấu trùng sán gây bệnh cho cá, có tỷ lệ nhiễm hậu ấu trùng cercariae cao 13,28 % vật chủ nhiễm đa dạng nhóm hậu ấu trùng cercariae (Bùi Thị Dung, 2006), góp phần làm tăng tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán cá nuôi, ảnh hưởng đến suất vụ nuôi chất lượng sản phẩm cá đặc biệt dẫn đến nguy lây nhiễm bệnh ký sinh trùng người thói quen ăn cá chưa nấu chín lây nhiễm người cao mà việc sử dụng thực phẩm có nguồn gốc từ cá chưa nấu chín ngày trở nên phổ biến hơn, đặc biệt nước phát triển Theo báo cáo Đinh Thị Thủy Đoàn Văn Cường (2011), tỷ lệ nhiễm hậu ấu trùng Haplorchis cercariae ốc (M tuberculatus) thu ĐBSCL từ 5,10 % đến 6,09 % giai đoạn mùa mưa từ 1,82 % đến 2,68 % giai đoạn mùa khô (hai năm 2007 2008) Do đó, việc tìm hiểu mức độ nhạy cảm số lồi cá ni phổ biến cá tra, cá rô phi cá chép khu vực ĐBSCL ấu trùng sán (H pumilio) Đường kính giác bám bụng 32 - 38 µm Chiều dài hầu từ 20 - 36 µm rộng 20 - 31 µm Bộ phận sinh dục có cấu tạo dạng vòng tròn hở với 42 Chiều dài thực quản trung bình từ 60 - 89 µm Buồng trứng dài 18 - 25 µm rộng từ 16 - 26 µm Buồng tinh dài trung bình từ 32 - 62 µm rộng dao động từ 22 - 40 µm Tuyến tiết có hình dạng tròn, chứa nhiều hạt nhỏ sậm màu (Bảng 4.3) Bảng 4.3 thể so sánh đặc điểm hình thái học kích thước phận sán với mẫu sán nghiên cứu Skov et al (2009) Dựa vào đặc điểm hình thái học nêu trên, sán xác định Haplorchis pumilio (Looss, 1896; Saad and Abed, 1995) (Bảng 4.3, Hình 4.4 A,B,C, Hình 4.5; 4.6) Qua kết trên, với việc dựa vào đặc điểm phân loại hình thái học định danh sán, nghiên cứu khẳng định ốc (M tuberculatus) ký chủ trung gian thứ cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) ký chủ trung gian thứ hai vòng đời sống sán Haplorchis pumilio Theo Waikagul and Radomyos (2002), vòng đời sống H.pumilio bao gồm vật chủ ốc M tuberculatus ký chủ trung gian thứ quan trọng nhất, loài khác Thiara and Terebia; ký chủ trung gian thứ hai cá nước cá nước lợ; ký chủ trung gian thứ ba bò sát, chim ăn cá, chó, lợn… H OS A SC B C Hình 4.4 A,B,C Ấu trùng H pumilio (SC) vảy, (OS) giác bám miệng, (H) gai 26 Hình 4.5 (trái) Hậu ấu trùng H pumilio (thanh đo = 100 µm) (Skov et al., 2009) Hình 4.6 (phải) Ấu trùng bung vỏ Haplorchis pumilio, (thanh đo = 50 µm) (Skov et al., 2009) 27 Bảng 4.7 Đặc điểm hình thái học kích thước sán Haplorchis pumilio (ấu trùng Haplorchis metacercariae nang) Đặc điểm ấu trùng Trung bình Dãy Trung bình Dãy Nghiên cứu (1) Skov et al (2009)(2) Chiều dài (µm) 323 297-372 336 308-392 Chiều rộng phần trước thể (µm) 118 85-124 102 84-115 Chiều rộng phần sau thể (µm) 103 85-115 94 74-106 Chiều dài (µm) 39 36-43 43 40-46 Chiều rộng (µm) 50 45-55 49 45-54 Giác bám bụng (đường kính) (µm) 36 32-38 35 32-37 Chiều dài (µm) 27 20-36 29 23-34 Chiều rộng (µm) 26 20-31 26 20-30 70 60-89 67 54-89 Chiều dài (µm) 24 18-25 22 18-25 Chiều rộng (µm) 20 16-26 19 16-22 Chiều dài (µm) 44 32-62 49 32-59 Chiều rộng (µm) 35 22-40 36 24-43 Tuyến tiết Tròn Có hạt Tròn, hướng phía sau buồng tinh Có nhỏ sậm màu hạt nhỏ sậm màu 1.Kích cỡ thể ấu trùng Giác bám miệng Hầu Thực quản Chiều dài (µm) Buồng trứng Buồng tinh (1) Nghiên cứu này: Hình thái học dựa 20 mẫu, cố định formalin nóng (270C) (2) Skov et al (2009): Hình thái học dựa 10 mẫu, cố định formalin nóng 28 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Nghiên cứu xác định tỷ lệ nhiễm hậu ấu trùng (Haplorchis cercariae) ốc (M tuberculatus) thu ao nuôi bờ kênh dọc ao nuôi vùng nuôi thuộc hai tỉnh An Giang Bến Tre; tỷ lệ nhiễm cao chiếm 16,84 % với ốc thu tỉnh Bến Tre 6,16 % với ốc thu An Giang Nghiên cứu thành công việc gây nhiễm sán cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) Sau 14, 21 30 ngày gây nhiễm, hậu ấu trùng (Haplorchis cercariae) phát triển thành ấu trùng (Haplorchis metacercariae) Ấu trùng (Haplorchis metacercariae) xác định loài Haplorchis pumilio Qua kết trên, với việc dựa vào đặc điểm phân loại hình thái học định danh sán, nghiên cứu khẳng định ốc (M tuberculatus) ký chủ trung gian thứ cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) ký chủ trung gian thứ hai vòng đời sống sán H pumilio Khi gây nhiễm 21000 Haplorchis cercariae/60 cá loại, sau 14, 21 30 ngày gây nhiễm, kết ấu trùng sán (H pumilio) nhạy cảm cá tra (P hypophthalmus), tiếp đến cá chép (C carpio) sau cá rô phi (O niloticus) Thật vậy, kết đợt thí nghiệm ghi nhận tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis pumilio cá tra chiếm từ 50,0 % đến 75,0 %; tiếp đến cá chép có tỷ lệ nhiễm từ 35,0 % đến 60,0 % sau cá rơ phi có tỷ lệ nhiễm từ 20,0 % đến 35,0 % Cường độ nhiễm ấu trùng cá tra có số cao (chiếm 32,5 37,0 ấu trùng/cá) so với cường độ nhiễm cá rô phi (chiếm 19,7 - 24,0 ấu trùng/cá) cá chép (18,5 - 25,4 ấu trùng /cá) Bên cạnh đó, nghiên cứu ghi nhận thời gian gây nhiễm không ảnh hưởng đến tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm sán Haplorchis pumilio cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) 29 tỷ lệ nhiễm H pumilo ba nhóm cá lại bị ảnh hưởng đặc điểm sinh học khác loài cá 5.2 Đề nghị Kết nghiên cứu chứng minh ốc (M tuberculatus) ký chủ trung gian thứ cá tra (P hypophthalmus), cá rô phi (O niloticus), cá chép (C carpio), ký chủ trung gian thứ hai vòng đời sống sán H pumilio Bên cạnh đó, nghiên cứu cho cá tra (P hypophthalmus) lồi cá có tỷ lệ nhiễm cường độ nhiễm ấu trùng H pumilio trung bình cao so với cá rô phi (O niloticus) cá chép (C carpio) Do đó, để phòng tránh cá ni bị nhiễm ấu trùng H Pumilio, đảm bảo chất lượng an toàn vệ sinh thực phẩm nguy lây nhiễm ấu trùng H pumilio từ cá sang người cần: - Cải tiến kỹ thuật nuôi, phát triển mô hình ni mới, ni để hạn chế lây nhiễm phát sinh bệnh, đặc biệt bệnh ký sinh trùng cá nuôi - Diệt vật chủ trung gian sán H pumilio ốc nhằm cắt đứt vòng đời phát triển sán - Nước sử dụng ao nuôi sau bơm trực tiếp từ kênh sông vào ao nuôi nên xử lý qua thuốc hoặc/và hóa chất - Bên cạnh đó, khơng nên ăn cá sống gỏi cá.và cá chưa nấu chín để hạn chế ấu trùng sán H.pumilio lây từ cá sang người nhằm phòng tránh bệnh sán gây bệnh cho người 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đồng Thị Thanh Dung (2011) Nghiên cứu đặc điểm mơi trường sống số lồi ốc nước vật chủ trung gian sán gan xã Bình An, huyện Thăng Bình, tỉnh Quảng Nam Lận văn tốt nghiệp Thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng, Tp Đà Nẵng Lê Thị Kim Gương, Phạm Cử Thiện Phạm Duy Tân Khảo sát kỹ thuật ương nuôi mức độ nhiêm ấu trùng sán song chủ giai đoạn Metacercariae cá Tra giống (Pangasianodon hypophthalmus) tỉnh Tiền Giang, Đồng Tháp Cần Thơ Nguyễn Văn Hảo Ngô Sỹ Vân Cá nước Việt Nam, tập họ cá chép (Cyprinidae) Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội K Darwin Murell, Jong – Yil Chai, Woon – Mok Sohn WHO/FAO Trung tâm hợp tác ký sinh trùng gây bệnh khẩn khấp, Khoa bệnh Thú y, Trường Đại học Nơng nghiệp Thú y Hồng gia Đan Mạch Khoa ký sinh trùng, Truờng Đại học y khoa quốc gia Seoul, Hàn Quốc Khoa Ký sinh trùng học, Trường Cao đẳng y khoa, Đại học quốc gia Gyeonsang, Chinju, Hàn Quốc Fibozopa Laboratory Manual - Phân loại ấu trùng sán (Metacercariae) cá nước Hà Ký Bùi Quang Tề Ký sinh trùng cá nước Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội , 2007 Ngô Văn Ngọc (2009) Khoa Thủy Sản, ĐH Nông Lâm Tp HCM Kỹ thuật nuôi cá nước 31 Huỳnh Hồng Quang (2008) Tổng hợp biên dich từ nguồn tài liệu) Sán ruột lớn sán ruột nhỏ - bệnh ký sinh trùng chưa cộng đồng quan tâm Đặng Tất Thế, Phạm Ngọc Danh Phòng Ký sinh trùng học Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật Kết khảo sát khu hệ ốc nước ấu trùng sán tỉnh An Giang Đinh Thị Thủy Đoàn Văn Cường (2011) Mối quan hệ vòng đời sán (Haplorchis pumilio) với ký chủ trung gian ốc (Melanoides tuberculata) cá Tra (Pangasianodon hypophthalmus) 10 Nguyễn Lê Mai Trâm (2008) Xác định LD50 (Lethal Dose 50%) vi khuẩn Edwardsiella ictaluri cá tra (Pangasianodon hypophthalmus Sauvage, 1878)” Luận văn tốt nghiệp Kỹ sư Thủy sản chuyên ngành Ngư y, Đại học Nơng lâm, TP Hồ Chí Minh Tài liệu tiếng Anh 11 Buchmann K (2007) “An introduction to fish parasitological methods – lassical and molecular methods.” BioFolia, Frederiksberg, Denmark, ISBN 12 Nguyen Diem Thu, Ly Thi Thanh Loan, ANDERS Dalsgaard, K DARWIN Murell Running head : zonotic metacercaria in farmed fish in Vietnam “ Survey for zonotic liver and intestinal metacercaraie ( Digenea) in cultured and wild fish of southern Vietnam 13 Dinh Thi Thuy (2010) Parasitic diseases in sutchi catfish ( Pangasianodon Hypophthalmus, Sauvage, 1878) cultured in the Mekong delta (Viet Nam) with special emphasis on zoonotic digeneans 32 Tài liệu tham khảo từ hệ thống niternet 14 http://www.vietnamplus.vn/Home/Xuat-khau-thuy-san-vung-DBSCL-uoc-dat-4-ty- USD/20121/119882.vnplus 15 http://www.tvvn.org/forum/showthread.php/33341 16 http://agriviet.com 17 http://fibozopa2.ria1.org/ 33 PHỤ LỤC Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 14 ngày gây nhiễm Loài cá Cá tra Số Trọng Độ Số lượng lượng cá lượng lệch hậu ấu gây trung bình nhiễm/ (TB) bể (g/con) 60 12,34 chuẩn trùng gây (SD) nhiễm/ Sau 14 ngày gây nhiễm Tỷ lệ Cường nhiễm độ (%) nhiễm bể 1,58 21000 SD (TB) 75,0 32,5 18,70 24,0 3,74 25,4 3,93 (15/20) Cá rô phi 60 5,18 3,16 21000 35,0 (7/20) Cá chép 60 5,93 0,83 2100 50,0 (10/20) Cá tra (P hypophthalmus); cá rô phi (Oreochromus niloticus); cá chép (Cyprinus carpio) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 21 ngày gây nhiễm Loài cá Số Trọng Độ Số lượng lượng cá lượng lệch hậu ấu gây Cá tra trung bình chuẩn trùng gây nhiễm/ (TB) bể (g/con) 60 12,34 (SD) nhiễm/ Sau 21 ngày gây nhiễm Tỷ lệ Cường nhiễm độ (%) nhiễm bể 1,58 21000 SD (TB) 50,0 37,0 8,42 20,4 10,8 18,5 7,40 (10/20) Cá rô phi 60 5,18 3,16 21000 35,0 (7/20) Cá chép 60 5,93 0,83 21000 35,0 (7/20) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 30 ngày gây nhiễm Loài cá Số Trọng Độ Số lượng lượng cá lượng lệch hậu ấu gây Cá tra trung bình chuẩn trùng gây nhiễm/ (TB) bể (g/con) 60 12,34 (SD) nhiễm/ Sau 30 ngày gây nhiễm Tỷ lệ Cường nhiễm độ (%) nhiễm bể 1,58 21000 SD (TB) 70,0 33,2 5,03 19,7 6,66 20,3 7,30 (14/20) Cá rô phi 60 5,18 3,16 21000 20,0 (4/20) Cá chép 60 5,93 0,83 2100 60,0 (12/20) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 14 ngày gây nhiễm Thời gian từ tháng 12/2/2012 đến 13/3/2012 Loài cá Số Trọng Độ Số lượng lượng cá lượng lệch hậu ấu gây trung bình chuẩn trùng gây (SD) nhiễm/ (TB) nhiễm/ bể (g/con) bể Sau 14 ngày gây nhiễm Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (TB) SD Cá tra 60 12,4 1,64 2100 80,0 (16/20) 35,0 21,2 Cá rô phi 60 5,21 3,19 2100 25,0 20,0 3,1 30,0 4,5 (5/20) Cá chép 60 5,94 0,84 2100 60,0 (12/20) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 21 ngày gây nhiễm Thời gian từ tháng 12/2/2012 đến 13/3/2012 Loài cá Số lượng cá gây nhiễm/ bể Cá tra 60 Trọng Độ Số lượng lượng lệch hậu ấu trung bình chuẩn trùng gây (SD) (TB) nhiễm/ (g/con) bể 12,4 1,64 2100 Sau 21 ngày gây nhiễm Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (TB) SD 40,0 29,6 7,86 20,4 10,8 20,0 8,0 (8/20) Cá chép 60 5,21 3,19 2100 35,0 (7/20) Cá rô phi 60 5,94 0,84 2100 40 (8/20) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 30 ngày gây nhiễm Thời gian từ tháng 12/2/2012 đến 13/3/2012 Loài cá Cá tra Số Trọng Độ Số lượng lượng cá lượng lệch hậu ấu gây trung bình chuẩn trùng gây (SD) nhiễm/ (TB) nhiễm/ bể (g/con) bể 60 12,4 1,64 2100 Sau 30 ngày gây nhiễm Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (TB) SD 60,0 32 4,8 21 6,9 18,6 6,3 (12/20) Cá chép 60 5,21 3,19 2100 50,0 (5/10) Cá rô phi 60 5,94 0,84 2100 50,0 (8/20) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 14 ngày gây nhiễm Thời gian từ tháng 07/04/2012 đến 08/05/2012 Loài cá Cá tra Số Trọng Độ Số lượng lượng cá lượng lệch hậu ấu gây trung bình chuẩn trùng gây (SD) nhiễm/ (TB) nhiễm/ bể (g/con) bể 60 12,28 1,56 2100 Sau 14 ngày gây nhiễm Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (TB) SD 70,0 30,0 16,2 28,0 4,38 20,8 3,36 (14/20) Cá rô phi 60 5,15 3,13 2100 45,0 (9/20) Cá chép 60 5,92 0,82 2100 40,0 (8/20) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 21 ngày gây nhiễm Thời gian từ tháng 07/04/2012 đến 08/05/2012 Loài cá Cá tra Số Trọng Độ Số lượng lượng cá lượng lệch hậu ấu gây trung bình chuẩn trùng gây (SD) nhiễm/ (TB) nhiễm/ bể (g/con) bể 60 12,28 1,56 2100 Sau 21 ngày gây nhiễm Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (TB) SD 60,0 44,4 8,98 20,4 10,8 17 6,8 (12/20) Cá chép 60 Cá 60 5,15 3,13 2100 35,0 (7/20) 5,92 0,82 2100 30,0 (6/20) Phụ lục Tỷ lệ nhiễm ấu trùng Haplorchis metacercariae sau 30 ngày gây nhiễm Thời gian từ tháng 07/04/2012 đến 08/05/2012 Loài cá Cá tra Số Trọng lượng cá lượng gây trung bình nhiễm/ (TB) bể (g/con) 60 12,28 Độ lệch chuẩn (SD) Số lượng hậu ấu trùng gây nhiễm/ bể Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (TB) SD 1,56 2100 65,0 34,4 5,8 18,4 6,42 22,0 8,3 Sau 21 ngày gây nhiễm (13/20) Cá rô phi 60 5,15 3,13 2100 15,0 (3/20) Cá chép 60 5,92 0,82 2100 80,0 (16/20) Phụ lục 10 Kiểm định thống kê sai khác có ý nghĩa với độ tin cậy 95% nghiệm thức tỷ lệ nhiễm (%) ấu trùng Haplorchis metacercariae cá tra, cá rô phi cá chép Source DF SS MS F P nt1 1839 919 6.76 0.029 Error 817 136 Total 2656 S = 11.67 R-Sq = 69.25% R-Sq(adj) = 59.00% Grouping Information Using Tukey Method nt1 N Mean Grouping a 65.00 A c 48.33 A B b 30.00 B Means that not share a letter are significantly different (Nt a: Cá tra (P hypophthalmus); nt b: cá rô phi (Oreochromus niloticus); nt c: cá chép (Cyprinus carpio)) Phụ lục 11 Kiểm định thống kê sai khác có ý nghĩa với độ tin cậy 95% khối thời gian gây nhiễm sau 14, 24 30 ngày ảnh hưởng đến tỷ lệ nhiễm (%) ấu trùng Haplorchis metacercariae cá tra, cá rô phi cá chép Source DF SS MS F P kh1 289 144 0.37 0.708 Error 2367 394 Total 2656 S = 19.86 R-Sq = 10.88% R-Sq(adj) = 0.00% Grouping Information Using Tukey Method kh1 N Mean Grouping 53.33 A 3 50.00 A 40.00 A Means that not share a letter are significantly different (Kh 1: sau 14 ngày gây nhiễm; Kh 2: sau 21 ngày gây nhiễm; Kh 3: sau 30 ngày gây nhiễm) Phụ lục 12 Kiểm định thống kê sai khác có ý nghĩa với độ tin cậy 95% nghiệm thức cường độ nhiễm trung bình ấu trung Haplorchis metacercariae cá tra, cá rô phi cá chép Source DF SS MS F P nt2 330.25 165.12 20.64 0.002 Error 47.99 8.00 Total 378.24 S = 2.828 R-Sq = 87.31% R-Sq(adj) = 83.08% Grouping Information Using Tukey Method nt2 N Mean Grouping a 34.233 A c 21.400 B b 21.367 B Means that not share a letter are significantly different Phụ lục 13 Kiểm định thống kê sai khác có ý nghĩa với độ tin cậy 95% khối thời gian gây nhiễm sau 14, 24 30 ngày ảnh hưởng đến cường độ nhiễm trung bình ấu trùng Haplorchis metacercariae cá tra, cá rơ phi cá chép Source DF SS MS F P kh3 13.2 6.6 0.11 0.899 Error 365.0 60.8 Total 378.2 S = 7.800 R-Sq = 3.50% R-Sq(adj) = 0.00% Grouping Information Using Tukey Method kh3 N Mean Grouping 27.300 A 25.300 A 3 24.400 A Means that not share a letter are significantly different ... ni phổ biến cá tra, cá rô phi cá chép khu vực ĐBSCL ấu trùng sán (H pumilio) cần thi t để từ có biện pháp can thi p đắn nhằm nâng cao điều kiện quản lý ao ni, giúp phòng tránh cá ni bị nhiễm... kiến thức giới hạn, bước đầu làm quen với phương pháp nghiên cứu khoa học nên luận văn tránh khỏi thi u sót Rất mong đón nhận ý kiến đóng góp q thầy bạn để luận văn hồn chỉnh ii TĨM TẮT Đề tài:... (Oreochromis niloticus) VÀ CÁ CHÉP (Cyprinus carpio) ĐỐI VỚI ẤU TRÙNG SÁN LÁ (Haplorchis pumilio) Tác giả PHAN THỊ BÍCH TUYỀN Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Kỹ sư Nuôi trồng Thủy sản, Chuyên