I HM HÀ NI 2  KHOA SINH - KTNN  THM NGHIÊN CU QUY TRÌNH NHÂN NHANH GING MÍA ROC10 (Saccharum officinarum L.) BNG CÔNG NGH NUÔI CY IN VITRO KHÓA LUN TT NGHII HC Chuyên  Hà Ni, 2014  KHOA SINH - KTNN  THM NGHIÊN CU QUY TRÌNH NHÂN NHANH GING MÍA ROC10 (Saccharum officinarum L.) BNG CÔNG NGH NUÔI CY IN VITRO TÓM TT KHÓA LUN TT NGHII HC  Người hướng dẫn khoa học Th.S PHAN TH THU HIN PGS.TS CHU HOÀNG HÀ Hà Ni, 2014 LI C   Tôi             PGS.TS Chu Hoàng Hà          và Ths. Phan Thị Thu Hiền    Tôi    Tôi  trong kh      , tháng 5  Sinh viên   Tôi xi    Sinh viên   BAP : 6- Benzyl amino purine CCS  cs :   : Môi    IBA : Indol - 3 - butiric acid MS :  NAA : Naphthalene Acetic Acid NN1 :  NN2 :  NN3 :  NN4 :  ROC : Republic of China TB : Trung bình TR1 :  TR2 :  TR3 :  TR4 :   Hình Tên hình Trang 1.1             4 1.2 Ging mía ROC10 15 1.3  15 3.1 Quá trình hình thành và phát trin c nh sinh ng, chi nách sau khi kh trùng 26 3.2 Bi ng ca n BAP và IBA ti h s nhân nhanh chi mía ROC10 29 3.3 S phát trin ca chi mía sau 30 ngày nuôi cy 30 3.4 Bi s r trung bình/chi ca chi mía ROC10 33 3.5 R hình thành sau 30 ngày nuôi cy 34 3.6 Cây ging trng trong bt 35    Trang 1.1 Mt s chu ting dùng 5 2.1  22 2.2  23 3.1 Kt qu nuôi cy chi nách sau 7 ngày nuôi cy 24 3.2   25 3.3 ng ca t hn kh  nhân nhanh chi mía ROC10 28 3.4 ng ca n - n kh o r ca ging mía ROC10 32   1  1 2. Mc tiêu nghiên cu 2  2  2  3 U 3  3 1.1.1.  3  4 in vitro 7  in vitro 9 1.2.1.  9  10 1.3.  12 1.3.1 12 1.3.2.  12  14 1.4.1.  14 1.4.2.  14 1.4.3.  15 .  17  17  17  17  17  17  18  19  19  19  19 2.5.4 in vitro 21 2.5.5-   22 .  24  24 3.2 24  ROC10 27 3.4-  31  36  37  38 1  1.  Mía (Saccharum L.) thuc chi Mía (Saccharum), h Hòa tho (Poaceae), b lúa (Poales), lp Mt lá mm (Monocotyledoneae). ng là cây trng kinh t quan trng ca vùng nhii và cn nhic trng trong khong 74 quc gia trên th gii. Hin nay,  khnh v trí là cây công nghi  u cung cp ngun nguyên liu cho ngành công nghing, phc v nhu cc và còn là mt hàng xut khu quan trng. Ngoài ra các ph phm ca ngành công nghing còn là ngun nguyên liu quí báu cho các ngành công nghip giu, cn. Vì vy, khi mà ngun nhiên liu lng ngày càng cn kin vic thay th ng ca th k 21 là ly t mía, sn xut men các loi, sn xut ethanol [15].  c ta liên tc phát trin, tng mnh v din tích, sc trng rng rãi  nhia   c ta các t      An, Thanh ng Nai Tuy nhiên, ngành công nghip c  máy ho công sut vì thiu nguyên liu. Nguyên nhân ca v này là do các ging mía bt cao dn dn b thoái hóa sau mt thi gian canh tác còn các gic nhp ni v d b sâu bnh, không phù hp vu kin khí h sut thp. V i bc thit là phi tìm ra ngun ging cây trng t cao, va sch bnh, phù hp vu kin khí hu Vi phc v sn xut. Có nhiu gic nhp ni, khng hiu nhit trt cao, chng tt, [...]... bằng công nghệ nuôi cấy in vitro 2 Mục tiêu nghiên cứu Nhân nhanh thành công giống mía ROC10 bằng công nghệ nuôi cấy mô tế bào in vitro 3 P ƣơn p áp n n cứu - Phương pháp khử trùng, nuôi cấy đỉnh sinh trưởng và chồi nách - Phương pháp nhân nhanh bằng công nghệ tế bào - Phương pháp tạo rễ - Phương pháp huấn luyện và trồng cây trong nhà lưới 4 Nộ dun n n cứu - Nghiên cứu tạo vật liệu sạch bệnh bằng nuôi. .. Khoa học - Công nghệ sinh học và Phòng thí nghiệm trọng điểm về Công nghệ Gen thuộc viện Hàn lâm khoa học Việt Nam 2.4 Nộ dun n n cứu Đề tài nghiên cứu quy trình nhân nhanh giống mía ROC10 bằng công nghệ nuôi cấy in vitro được tóm tắt như sau: - Thí nghiệm 1: Nghiên cứu tạo vật liệu sạch bệnh bằng nuôi cấy đỉnh sinh trưởng và chồi nách từ các cá thể mía ROC10 - Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng... cấy mô cây mía thì bộ phận mô nuôi cấy thích hợp nhất cho việc tạo callus và tái sinh cây hoàn chỉnh là các lá non còn đang bọc trong bẹ và đòng hoa non của cây 16] Năm 2003, Thân Thị Thu Hạnh và Lưu Thị Duyên đã nghiên cứu kĩ thuật nhân nhanh giống mía VN84-422 và VN85-1427 bằng phương pháp in vitro, sử dụng nguyên liệu nuôi cấy là mắt mầm Kết quả nghiên cứu thu được là: ở giai đoạn nhân nhanh chồi... Trung Tâm nghiên cứu ứng dụng KH và CN Hải Phòng, Sở KHCN Nam Định, công ty giống cây trồng Trung ương I, Viện Sinh học Đà Lạt,… m i năm sản xuất hàng triệu cây giống in vitro, củ giống in vitro của các loại cây hoa, cây khoai tây, cây mía, … Tại Đà Lạt từ nhiều năm nay, rất nhiều phòng nuôi cấy mô của tư nhân ra đời, hoạt động rất có hiệu quả và m i năm đã cung cấp một số lượng lớn cây giống in vitro cho... nhưng cho đến nay thì nuôi cấy mô cây mía vẫn còn là một vấn đề mới mà các nhà chọn tạo giống đang rất quan tâm nghiên cứu 6] 10 Chi Thị Tứ, Mai Văn Quắc, Hồ Hữu Nhị (1994) đã nghiên cứu sử dụng kĩ thuật nuôi cấy mô tế bào để nhân nhanh một số giống mía ở Việt Nam như: CP5243, VN 72234, Việt đường và giống ROC 10 Kết quả nghiên cứu thu được là: ở giai đoạn vào mẫu, lá non của cây mía được sử dụng làm... nhân nhanh chồi đối với 2 giống mía VN84-422 và VN851427 thì nồng độ 0,5 mg/l kinetin + 1,5 - 2 mg/l BAP thích hợp nhất và hệ số nhân nhanh đạt 2,8 lần sau 3 - 4 tuần Ở giai đoạn ra rễ tạo cây hoàn chỉnh nồng độ 2 - 4 mg/l α-NAA là thích hợp nhất [5] Nguyễn Thị Nhẫn (2005) nghiên cứu kĩ thuật nhân nhanh các giống mía Quế Đường 15 và F134 bằng phương pháp in vitro Kết quả nghiên cứu thu được: Ở giai đoạn... tăng nhanh sản lượng mía đường thì việc cấp thiết là phải cung cấp cho nông dân nguồn giống tốt, năng suất cao, sạch bệnh Và để có một sô lượng cây con đáp ứng đủ nhu cầu đó thì áp dụng kĩ thuật nuôi cấy in vitro là một lợi thế lớn Hơn nữa, kĩ thuật này giúp bảo tồn nguồn gen thực vật Xuất phát từ những lý do trên chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Nghiên cứu quy trình nhân nhanh giống mía ROC10 bằng. .. tái sinh tốt [26] 16 C ƣơn 2 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật l ệu n n cứu Chồi nách và đỉnh sinh trưởng của cây mía ROC10 khỏe mạnh được thu thập tại vùng nguyên liệu của Công ty mía đường Sơn Dương- Tuyên Quang 2.2 T ờ an v địa đ ểm n n cứu - Đề tài tiến hành từ tháng 10/2013 đến tháng 05/2014 - Thí nghiệm được tiến hành tại Phòng Công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật - Viện Công Nghệ Sinh... nuôi cấy đỉnh sinh trưởng và chồi nách từ các cá thể ưu tú ROC10 - Xây dựng quy trình nhân giống mía ROC10 bằng công nghệ in vitro - Tiến hành ra rễ - Tiến hành trồng cây trong điều kiện nhà lưới 2 NỘI DUNG C ƣơn 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 P ƣơn p áp nuô cấ mô tế b o t ực vật 1.1.1 Cơ sở k oa ọc của p ƣơn p áp nuô cấ mô tế b o t ực vật K thuật nuôi cấy mô tế bào (tissue culture) nói chung và k thuật nhân. .. đoạn nhân nhanh tạo cụm chồi kết quả thu được là: đối với 2 giống mía CP5243 và VN 72234 thì nồng độ BAP thích hợp nhất cho sự phát sinh cụm chồi là 0,1 mg/l môi trường Đối với hai giống mía ROC10 và Việt đường thì nồng độ BAP thích hợp nhất cho sự phát sinh cụm chồi là 0,3 mg/l môi trường [14] Theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Uyển và cộng sự tại Trung Tâm Công Nghệ Sinh Học đã cho thấy đối với nuôi cấy .  KHOA SINH - KTNN  THM NGHIÊN CU QUY TRÌNH NHÂN NHANH GING MÍA ROC10 (Saccharum officinarum L. ) BNG CÔNG NGH NUÔI CY IN VITRO KHÓA LUN TT NGHII.  KHOA SINH - KTNN  THM NGHIÊN CU QUY TRÌNH NHÂN NHANH GING MÍA ROC10 (Saccharum officinarum L. ) BNG CÔNG NGH NUÔI CY IN VITRO TÓM TT KHÓA LUN TT NGHII. 1.  Mía (Saccharum L. ) thuc chi Mía (Saccharum) , h Hòa tho (Poaceae), b l a (Poales), l p Mt l mm (Monocotyledoneae). ng l cây trng kinh t quan trng ca