III Công nghệ lên men tạo enzym α amylase I KHÁI QUÁT CHUNG VỀ ENZYME AMYLASE a) Khái niệm về enzyme amylase Enzyme amylase là một hệ enzyme rất phổ biến trong giới sinh vật Enzyme này thuộc nhóm en[.]
I KHÁI QUÁT CHUNG VỀ ENZYME AMYLASE a) Khái niệm enzyme amylase: Enzyme amylase hệ enzyme phổ biến giới sinh vật Enzyme thuộc nhóm enzyme thủy phân,xúc tác phân giải liên kết nội phân tử nhóm polysaccharide với tham gia nước RR’ + H-OH RH + R’OH b) Phân loại enzyme amylase: Hiện có loại enzyme amylase chia làm nhóm là: endoamylase exoamylase • Endoamylase:gồm có α-amylase nhóm ezyme khử nhánh • Exoamylase :gồm có β-amylase ϒ-amylase c) enzyme α-amylase: enzyme loại protein thủy phân liên kết alpha polysaccharide chứa liên kết alpha tinh bột glycogen maltose Đây dạng chủ yếu amylase tìm thấy người động vật có vú khác Nó có mặt loại hạt giống sử dụng tinh bột loại lương dư trữ có chất tiết nhiều loại nấm III.Công nghệ lên men tạo enzym α-amylase Quy trình lên men cơng nghiệp enzym α-amylase: a) Nguyên liệu: - Nguyên liệu để sản xuất chủ yếu là:Tinh Bột - Nguồn cung cấp tinh bột: Gạo, ngô, sắn(khoai mì) b) Sơ đồ quy trình lên men Nguyên liệu Giống vi sinh vật Xử Lý nguyên liệu Thanh trùng Nhân giống Cấy giống Lên men sinh tổng hợp enzym Chế phẩm enzym Tách tinh enzym Ly tâm:thu nhận chế phẩm enzym thô Nguyên liệu: Trong phương pháp lên men bề mặt: Nguyên liệu chủ yếu cám gạo,cám mì Hai loại khơng cần bổ xung thêm thành phần nữa.Nếu cần bổ xung thêm thêm trấu mùn cưa… để làm tăng độ xốp giúp nấm phát triển tốt hơn,tận dung tối đa nguồn chất để sinh hoạt lục enzym cao Chú ý:- Cám không chưa tinh bột 20-30% - Nên dùng cám tốt,mới khơng có vị chua ,vị đắng - Độ ẩm cám không 15%, - tạp chất,chất độc không 0.05% Thanh trùng: - Cám,chất phụ gia,canh trường nuôi cấy hấp trùng để loại bỏ nấm mốc khác (nấm mốc ngoại lai) - Thanh trùng áp suất 1-1,5 atm, thời gian từ 4560 phút - Sau trùng môi trường để nguội để bắt đầu nuôi cấy thu nhận enzym Cấy giống vsv: -Cấy giống rắc bào tử lên môi trường, ủ thành đống vài - Tỉ lệ giống đưa vào nuôi cấy thường khoảng 0,5-20% so với khối lượng môi trường Lên men sinh tổng hợp enzym: -Sau cấy giống,môi trường trải khay với chiều dài 2-3cm -Nhiệt độ ni cấy thích hợp 28-C -Khơng cần điều chỉnh pH -Thời gian nuôi cấy nấm sợi thu nhận enzym vào khoảng 3660h -Quá trình phát triển nấm mốc trải qua giai đoạn: -Giai đoạn 1: kéo dài 10-14h kể từ bắt đầu nuôi cấy -Giai đoạn 2: kéo dài 14-18h -Giai đoạn 3: kéo dài 18-36h Thu nhận sản phẩm: -Kết thúc q trình ni cấy ta thu enzym thô.Để đảm bảo cho enzym thơ khơng bị hoạt tính người ta nhanh chóng đem sấy khơ đến độ ẩm -Có thể dùng enzym thô không cần tinh -Nếu cân tinh người ta tiến hành sau: + Nghiền nhỏ enzym thô để vừa phá vỡ thành tế bào vừa làm nhỏ thành phần chế phẩm thô + Người ta thường sử dụng chất trợ nghiền thạch anh bột thủy tinh +Sau nghiền người ta cho nước tiến hành trích ly enzym Cứ phần enzym khô người ta cho thêm 4-5 phần nước Lọc lấy dịch,bã cho thức ăn chăn nuôi Quá trình kết tủa enzym α-amylase: -Người ta thường dùng cồn sunfat amon để kết tủa enzym -Cứ phần enzym thô người ta cho 2-2,5 lần cồn sunfat amon -Để yên nhiệt độ 4-sau đưa độ ẩm đạt 58% =>Enzym lúc chưa tinh khiết cịn chứa protase cellulose Để tinh khiết hồn tồn kết tủa q trình lọc Gel • c) Các yếu tố ảnh hưởng trình lên men: Độ ẩm mơi trường: pH:pH thích hợp cho nấm khoảng 5,55,6 Thời gian ni:36-60h, kéo dài 60-72h 55-60%,tốt 45% Các yếu tố ảnh hưởng Nhiệt độ: nhiệt độ thích hợp 28-C Độ ẩm tương đối khơng khí: 80-100% Ảnh hưởng khơng khí:cứ 1h nấm men cần 1,7 khơng khí.Nồng độ CO2 8% ... tinh bột loại lương dư trữ có chất tiết nhiều loại nấm III.Cơng nghệ lên men tạo enzym α-amylase Quy trình lên men công nghiệp enzym α-amylase: a) Nguyên liệu: - Nguyên liệu để sản xuất chủ yếu... quy trình lên men Nguyên liệu Giống vi sinh vật Xử Lý nguyên liệu Thanh trùng Nhân giống Cấy giống Lên men sinh tổng hợp enzym Chế phẩm enzym Tách tinh enzym Ly tâm:thu nhận chế phẩm enzym thô... nhận enzym Cấy giống vsv: -Cấy giống rắc bào tử lên môi trường, ủ thành đống vài - Tỉ lệ giống đưa vào nuôi cấy thường khoảng 0,5-20% so với khối lượng môi trường ? ?Lên men sinh tổng hợp enzym: