PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP NHỜ AGROBACTERIUM pot

PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP NHỜ AGROBACTERIUM • Là vi khuẩn gram - • Khi ở trong đất sẽ sinh độc tố • Gây ung thư ở thực vật • mang những plasmid lớn đặc trưng... PHƯƠNG PHÁP CHUYỂ

PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP

NHỜ AGROBACTERIUM

• Là vi khuẩn gram (-)

• Khi ở trong đất sẽ sinh

độc tố

• Gây ung thư ở thực vật

• mang những plasmid lớn

đặc trưng

PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP

NHỜ AGROBACTERIUM

Agrobacterium có khả

năng xâm nhiễm vào tế

bào thực vật nằng cách

chuyển 1 đoạn DNA của

nó vào tế bào thực vật

Ưu điểm: có hiệu quả

Nhược điểm: thực hiện

khó trên lớp 1 lá mầm

Chuyển gen nhờ súng DNA “biolistic”

• Là sử dụng các viên

đạn có kích thước hiển

vi có tỷ trọng cao để đạt

gia tốc cao xuyên qua vỏ

và màng tế bào ,đưa lớp

DNA bọc ngoài tiếp cận

với bộ máy di truyền của tế bào

CÁC LOẠI SÚNG BẮN GEN

• Súng bắn gen PDS-1000

• Súng bắn gen PDS-1000He

• Súng bắn gen Sauter 1991

CHUYỂN GEN NHỜ VIRUS

• Virrus dễ dàng bám và lây nhiễm vào tế bào trên

những thực vật nguyên vẹn

• Một số Virrus lây nhiễm vào thực vật từ vị trí xâm nhiễm và chuyển acid nucleic của nó vào mỗi tế bào sống của ký chủ

• Virrus có thể sao chép vài ngàn lần và tồn tại khoảng

103 -105 bản sao trong mỗi tế bào thực vật

• Gen của Virrus được đi khắp nơi và vì vậy có biểu

PHƯƠNG PHÁP VI TIÊM

• Là phương pháp tiêm các đại phân tử vào

trong tế bào thực vật

• Được theo dõi bằng kính hiển vi và sự thành công được nhận ra bằng một chất phát huỳnh quang được cùng tiêm vào trong tế bào

KỸ THUẬT XUNG ĐIỆN

• Làm rối loạn cấu trúc màng kép phospholipid cho phép các phân tử DNA ngoại lai từ môi trường xâm nhập vào bên trong tế bào

• Kỹ thuật xung điện (electroporation) là một phương pháp cơ học được sử dụng để đưa các phân tử phân cực vào trong tế bào chủ qua

màng tế bào