§1 phản ứng chuỗi polimerase pcr

... pháp dựa khuếch đại vùng ADN đặc hiệu PCR từ khuôn mẫu ADN, với oligonucleotid khởi động bước đầu phản ứng PCR Việc phát gen stx1, stx2 eae thực phản ứng PCR đa mồi sử dụng mồi đặc hiệu (Bảng ... lọc qua lọc vô trùng cỡ lỗ 0,22 μm đun sôi 10 C.3.3 Chuẩn bị phản ứng PCR Đối với mẫu thử, chuẩn bị 50 μl cho phản ứng [chất đệm phản ứng 1×, MgCl2 1,2 mmol/l, deoxynucleotidetriphosphat (dNTP) ... dương tính E.coli kiểm tra lại nhóm huyết mẫu dương tính với nhóm huyết đặc hiệu PCR (ví dụ: phản ứng PCR phản ứng ngưng kết miễn dịch Đặc tính bổ sung (tùy chọn): gửi chủng vi sinh vật đến phòng...

Ngày tải lên: 14/12/2021, 11:34

... Chương 7 PHẢN ỨNG CHUỖI POLIMERASE(POLIMERASE CHAIN REACTION - PCR) Tóm tắt: Kĩ thuật phản ứng chuỗi dùng enzyme polimerase (Polimerase chain reaction = PCR hay PCR Technology) lần ... bản có chọn lọc (Amplifed Fragment Length Potimorphism - AFLP). §1. PHẢN ỨNG CHUỖI POLIMERASE (PCR) 1. Nguyên tắc Phản ứng chuỗi polimerase là một kĩ thuật đơn giản, cho phép khuếch đại invitro ... Mullis đã xứng đáng nhận giải thưởng Nobel về Y học và Sinh lí học năm 1993. Phản ứng chuỗi polimerase (PCR) là kĩ thuật cơ bản và rất quan trọng trong Sinh học phân tử. Phản ứng PCR gồm 3 giai...

Ngày tải lên: 23/10/2013, 16:20

... huyện Chương Mỹ tỉnh Hà Tây, bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR - RFLP) Áp dụng kỹ thuật PCR để nhân vùng phiên mã thứ nhất (ITS-1) ở giun đũa, sau đó cắt sản phẩm PCR bang enzym Haelll tai vị trí ... quả tào tạo: Nâng cao trình độ thực hành kỹ thuật PCR cho các cán bộ nghiên cứu 1.4 Hiệu quả kinh tế và xã hội Áp dụng phản ứng chuỗi polymerase (PCR - RELP) phân biệt giun đũa người và giun đũa ... đoạn phân cất giới hạn bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR-RELP) có thể phân biệt được giun đũa người Ascaris lumbricoides va giun đũa lợn Ascars suum 2 Sản phẩm PCR của 51 mẫu giun đũa lợn khi...

Ngày tải lên: 12/04/2014, 12:00

... đệm cho phản ứng PCR, thường chứa muối đệm Tris HCL 10 mM, KCL 50Mm và MgCl�2 1.5mM Ngoài ra dung dịch đệm PCR còn có thể chứa 0.001% BSA hay Gelatine và trong một số phản ứng PCR còn ... là trộn sẵn trong ống nghiệm làm phản ứng PCR men Uracil N Glycosylase (UNG) là men có khả năng phá hủy các sản phẩm PCR ngoại nhiễm trước khi phản ứng PCR xảy ra[4] Chính nhờ việc... đúng ... hiệu cho chuỗi đích, nghĩa là chỉ có thể bắt cặp trên chuỗi đích mà không thể bắt cặp được trên các chuỗi DNA khác ngoài chuỗi đích, thì sản phẩm PCR càng đặc hiệu và thử nghiệm PCR càng...

Ngày tải lên: 05/07/2014, 15:20

... EcoRI ) Yêu cầu phản ứng cắt RE: - Mồi RE hoạt động tối ưu điều kiện phản ứng xác định, mặt dung dịch đệm Các dung dịch đệm dùng phản ứng RE thường khác nồng độ NaCl Do đó, phản ứng cần sử dùng ... đó, điều kiện phản ứng PCR chưa tối ưu nên mồi không bắt cặp với đoạn gene mong muốn mà bắt cặp với đoạn gene khác trình nhân PCR Tuy nhiên với việc thay đổi điều kiện phản ứng PCR thường không ... sản phẩm phản ứng PCR vào vector tách dòng pCR ™ 2.1 (invitrogen) với mục đích tạo vector tái tổ hợp mang đoạn DNA cần tách dòng sau biến nạp vào tế bào E.coli chủng DH5α Nguyên tắc: Phản ứng dựa...

Ngày tải lên: 24/04/2013, 22:04

... (máy PCR) đoạn gene từ phân tử ADN mẫu khuếch đại Phân lập gene PCR tiến hành theo bước sau: (1) Tách chiết tinh ADN (2) Thiết kế primers (3) Chọn điều kiện phản ứng PCR (4) Nhân đoạn ADN máy PCR ... sản phẩm PCR dòng đậu tương ML61 mở vòng vector pBluescirpt KS (-) Phản ứng gắn vector với đoạn cắt sản phẩm PCR tiến hành 160C vòng 24 giờ, sử dụng enzyme T4 ligaza Sau đó, dịch phản ứng biến ... Điện di đồ sản phẩm PCR gene chaperonin dòng đậu tương Sau 32 chu kì phản ứng, sản phẩm PCR kiểm tra điện di gel agarose 0,8% kết cho thấy ba dòng đậu tương thu sản phẩm PCR đặc hiệu Kích thước...

Ngày tải lên: 23/10/2013, 16:20

... mi chy PCR gen novW ta s dng cp mi cho phn ng l mi xuụi (WF -5- GAA TTC CGA TCA CGA GGA GTT GAA GGA -3) v mi nguc (WR -5- AA GCT TCA CGG GCC CGG GTC TCC GAC - 3) - Chy PCR Cỏc thnh phn PCR ADN ... GCC CGG GTC TCC GAC - 3) - Chy PCR Cỏc thnh phn PCR ADN 25 ng dNTP 200 mM Mi PCR (PCR primer) 200 mM MgCl2 m PCR Enzym Taq polymerase n v 1.5 mM 1X* 35 V Vn Hựng Lp: 06 - 04 Khoa Cụng Ngh ... phm PCR ca gen novW Gen novW cú cha 624 bp nucleotide, gen ny c tỏch dũng nh phn ng PCR nhõn gen novW phn ng ny c thc hiờn vi phn ng liờn tc vi cỏc giỏ tr Tm khỏc (t 60 63,5 0C) tỡm sn phm PCR...

Ngày tải lên: 23/12/2013, 15:31

... Bảo quản mẫu Sản phẩm phản ứng PCR đƣợc kiểm tra điện di gel agarose 1% Kích thƣớc đoạn DNA thu đƣợc sau phản ứng PCR đƣợc so sánh với thang DNA chuẩn (Fermentas) Sản phẩm PCR đƣợc tinh kit PureLinkTM ... chi phản ứng PCR đƣợc thể hình 3.4 Hình 3.4 Điện di đồ kiểm tra sản phẩm PCR cặp mồi ChiBF ChiBR gel agarose 1,0% (Đƣờng chạy M: Thang DNA chuẩn (0,25-10kb); Đƣờng chạy 1: Sản phẩm phản ứng PCR ... N-acetyl-D-glucosamine dung dịch phản ứng đƣợc xác định thông qua đƣờng chuẩn 2.2.16 Xác định đặc tính rCHI Xác định pH tối ƣu cho phản ứng xúc tác rCHI đƣợc thực cách thay đổi dịch đệm phản ứng có pH 4,0; 4,5;...

Ngày tải lên: 07/11/2014, 18:59

... Sinh t bo PCR Sn phm PCR ó tinh sch Vector tỏch dũng PTZ57R/T Gn ni Sn phm gn ni gene Vi khun E coli DH5 kh bin Bin np v chn lc trờn MT chn lc Khun lc trng Sng lc bng PCR Khun lc dng tớnh PCR Chn ... phỏp PCR 40 Phn ng PCR khuch i gene gltA vi cp mi c hiu c thc hin vi tng th tớch 15àl chy 25 chu kỡ Thnh phn phn ng c trỡnh by theo bng: Bng 8: Thnh phn phn ng PCR HểA CHT TH TCH( àl) DNA khuụn PCR ... 9: Chu trỡnh nhit ca phn ng PCR 40 Hỡnh 10: Hỡnh nh tỏch chit DNA tng s ca E coli 47 Hỡnh 11: Ti u húa nhit gn mi cho phn ng PCR .48 Hỡnh 12: Sn phm PCR trc v sau tinh sch ...

Ngày tải lên: 28/04/2016, 22:35

... phm PCR Tin hnh phn ng PCR sau 24h mi thc hin phn ng gn ni cú th sn phm PCR a vo ó b hng u A hot tớnh Exonnuclease Sn phm PCR em thc hin phn ng gn ni khụng c tinh sch cỏc thnh phn phn ng PCR ... 250C - Thu khun Pantoea ananatis s dng lm khuụn cho phn ng PCR 3.4.4 Phng phỏp PCR khuch i gene crtY t Pantoea ananatis Thc hiờn phn ng PCR nhõn bn on gene crtY vi cp mi c trng crtY-F v crtY-R ... qu tỏch dũng gene crtY ln Thc hin phn ng PCR vi cp mi c hiu, thớ nghim ny chỳng tụi s dng trc tip 2àl t bo ó pha loóng 10 ln so vi ln PCR trc Sn phm PCR c tinh sch theo Kit MEGA- sinpTM Agarose...

Ngày tải lên: 18/06/2016, 11:40

... nhân người trẻ: •Van động mạch chủ lá, •dãn gốc động mạch chủ, •hội chứng Turner, •hội chứng Noonan, •hội chứng Marfan, •hội chứng Ehrlers Danlos •50% trường hợp bóc tách động mạch chủ cấp phụ nữ ... yếu thành mạch thúc đẩy động mạch chủ bò bóc tách Tổn thương tưới máu 31% trường hợp Triệu chứng lâm sàng Đau: 93% trường hợp có đau ngực,  85% trường hợp đau xuất đột ngột Đa số trường ... hợp, –khi có dấu hiệu thường bệnh nhân bò chèn ép tim tổn thương động mạch thân tay đầu Triệu chứng lâm sàng Liệt hạ chi: –thường gặp bóc tách động mạch chủ type B với tần suất – 10% Huyết áp...

Ngày tải lên: 22/10/2012, 17:22

... vào phản ứng với nồng độ đơn vị/ 10àl phản ứng Hỗn hợp phản ứng đợc trộn theo thứ tự ddH2O Đệm T4 ligase x10 Đoạn gen cần gắn 34 àl àl àl Vector mở vòng T4 ligase (4 đơn vị/àl) thể tích Phản ứng ... phẩm đợc sử dụng cho phản ứng khuếch đại đoạn cDNA T + Khuếch đại đoạn cDNA: hỗn hợp phản ứng đợc chuẩn bị theo trình tự bảng sau: Thành phần phản ứng Dung dịch MgCl2 Đệm PCR 10X Nớc khử ion Mồi ... theo phản ứng: + Xử lý với enzim: Hỗn hợp phản ứng đợc trộn theo thứ tự (30 -x - 3,5) àl àl x àl (~1àg) 0,5àl 30àl H20 Đệm 10X riêng enzim Dịch plasmid Enzim (10U/àl) Tổng thể tích phản ứng +...

Ngày tải lên: 30/10/2012, 14:53

... pháp PCR Trên sở trình tự gen CP đợc công bố ngân hành gen giới, thiết kế cặp mồi, để nhân gen CP vi rút thông qua phản ứng PCR Bảng Thành phần phản ứng PCR Thành phần Nớc cất hai lần Buffer PCR ... trình gel, đầu -A bị gãy Do đó, thực phản ứng gắn đầu -A vào sản phẩm PCR Sau tinh sạch, thực phản ứng gắn sản phẩm PCR vào vectơ tách dòng Thành phần phản ứng gắn đợc trình bày bảng 7, hỗn hợp ... àl EB 2.2.5 Gắn sản phẩm PCR vào vectơ tách dòng pGEM-T Sau thu đợc ADN nhân từ phản ứng PCR, tiên hành gắn sản phẩm PCR vào vectơ pGEM-T Bảng7 Thành phần hỗn hợp phản ứng nối ghép Thành phần...

Ngày tải lên: 30/10/2012, 14:53

... tổng số hay không thực phản ứng RT -PCR 3.3 Kết RT -PCR ARN tổng số sau tách chiết đợc sử dụng cho phản ứng RT -PCR để nhân gen NIb với cặp mồi đợc thiết kế Nếu phản ứng RT -PCR xảy đặc hiệu, theo ... nhiệt cho phản ứng PCR Bớc Phản ứng Nhiệt độ (0C) Thời gian Biến tính 96 phút Biến tính 96 10 giây Gắn mồi 55 giây Kéo dài chuỗi 60 phút Hoàn tất kéo dài 72 phút Chu kỳ 25 Kết thúc phản ứng 30 phút ... Taq polymerase PCR Reverse transcriptase Mồi nhẫu nhiên cADN (mẫu PCR) Hình Sơ đồ minh họa kỹ thuật RT -PCR 1.5.2 Kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction chuỗi phản ứng trùng hợp)...

Ngày tải lên: 30/10/2012, 15:03