1 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HĨA NGHIÊN CỨU MỘT SỐ TÍNH CHẤT CỦA MUỐI MAGIE HYDROXYCITRAT, ỨNG DỤNG CHẾ BIẾN BỘT GIẢM BÉO HÒA TAN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN SU PHẠM Sinh viên thực : Trần Thị Quỳnh Lớp : 08SHH Giáo viên hướng dẫn : GS.TS Đào Hùng Cường Đà Nẵng - Năm 2012 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM Độc lập – Tự – Hạnh phúc ….… KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : Trần Thị Quỳnh Lớp : 08SHH Tên đề tài: “Nghiên cứu số tính chất muối magie hydroxycitrat, ứng dụng chế biến bột giảm béo hòa tan” Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị  Nguyên liệu: vỏ bứa khô  Hóa chất: cồn 96 0, nước cất, etylaxetat, MgO, glucose, NaCl, NaOH 0,1N, phenolphtalein  Dụng cụ thiết bị: - Cốc thủy tinh 100ml, 250ml, 500ml, 1000ml; - Phễu lọc, nồi áp suất, bếp điện, bếp cách thủy, tủ sấy, cân phân tích; - Đũa thủy tinh, nhiệt kế, buret, pipet, bình tam giác, ống đong; - Máy đo HPLC Nội dung nghiên cứu  Điều tra sơ bộ, thu gom xử lí nguyên liệu;  Dùng phương pháp chưng ninh để chiết tách axit;  Tổng hợp muối Magie hydroxycitrat;  Xác định số số hóa lý: độ ẩm, độ tan, độ quay cực riêng, nhiệt độ nóng chảy;  Chế biến bột hòa tan từ muối magie hydroxytrat, đường glucose muối NaCl;  Đánh giá, nhận xét sản phẩm muối thu bột hòa tan I Giáo viên hướng dẫn: GS.TS Đào Hùng Cường II Ngày giao đề tài: 05/05/2011 III Ngày hoàn thành: 21/05/2012 Chủ nhiệm Khoa Giáo viên hướng dẫn PGS.TS Lê Tự Hải GS.TS Đào Hùng Cường Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày … tháng 05 năm 2012 Kết điểm đánh giá: Ngày… tháng 05 năm 2012 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (Ký ghi rõ họ tên) MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Hội nghị quốc tế lần thứ VIII béo phì họp Paris ngày 01/09/1998 nhận định Bệnh béo phì trở thành đại dịch toàn cầu, vấn đề lớn đe dọa sức khoẻ cộng đồng Số liệu thống kê gần Tổ chức Y tế giới (WHO) cho thấy số người béo phì gia tăng cách đáng báo động với 1,5 tỉ người toàn cầu Theo tính tốn WHO, người xem béo phì số khối lượng thể (dựa thể trọng chiều cao) cao 30, người thừa cân có số dao động từ 25 30 Tại Trung Quốc, tình trạng thừa cân béo phì lên đến 20% dân số số thành phố Tại Mỹ, 30% người trưởng thành bị béo phì (60 triệu người) Tại châu Âu, Anh đứng đầu bảng với 23% người béo phì Ở Việt Nam, theo Viện Dinh dưỡng quốc gia, tỷ lệ béo phì người trưởng thành, từ 25-64 tuổi lên tới 16,8% Kết khảo sát cho thấy tình trạng thừa cân, béo phì tăng nhanh lứa tuổi từ 45 trở lên (chiếm 2/3 số người bị thừa cân, béo phì) tỷ lệ béo phì người dân thành thị cao gấp lần so với nông thôn Tình trạng tăng trẻ em Trên giới có 22 triệu trẻ từ năm tuổi trở xuống bị thừa cân Theo báo cáo công bố Viện y tế Mỹ, năm 2010, gần 1/5 trẻ em Mỹ bị béo phì Tỉ lệ trẻ béo phì mức báo động châu Âu, nơi có 14 triệu trẻ thừa cân Tình trạng dẫn đến hệ niên béo phì tương lai Béo phì vấn đề nước phát triển Tại Thái Lan, vòng hai năm, tỉ lệ béo phì trẻ 5-12 tuổi tăng từ 12,2% lên 15,6% Bệnh béo phì khơng ảnh hưởng đến lao động, sinh hoạt, thẫm mỹ mà nguy hại định đến sức khoẻ Người trung niên lớn tuổi bị béo phì dễ mắc bệnh như: huyết áp cao, bệnh mạch vành, tiểu đường, bệnh Gout, tai biến mạch não,… Cuộc chiến chống béo phì diễn từ lâu, khắp quốc gia giới với nhiều biện pháp đưa Từ việc tập thể dục thường xuyên, chế độ ăn uống hợp lý với nhiều rau quả, hạn chế đường, chất béo… đến việc sử dụng sản phẩm chức giúp giảm cảm giác thèm ăn, giảm hấp thụ chất béo,…Những sản phẩm giảm cân có nguồn gốc từ thiên nhiên chiếm ưu tính hiệu an tồn Trong số đó, sản phẩm có Axit hydroxycitric (HCA) Hydrotrim, Maximum Protein, Agel SLM, Healtheries Slim,…Ở Mỹ, Hydrotrim sản phẩm độc quyền điều chế từ muối HCA, người tiêu dùng ưa chuộng, có hiệu cao việc điều trị giảm cân Hơn nữa, sản phẩm chức dạng bột hòa tan nên tiện dụng HCA chiết từ vỏ bứa có tác dụng kiềm hãm q trình chuyển hóa lượng đường dư thừa thể thành mỡ Không giúp giảm cân, HCA giảm loại mỡ xấu cho sức khỏe tryglycerid, LDL cholesterol, cholesterol toàn phần tăng HDL cholesterol loại mỡ có tác dụng bảo vệ thành mạch Ngoài ra, HCA làm gia tăng nồng độ serotonin, chất dẫn truyền thần kinh yếu có vai trị kiểm sốt thèm ăn cảm xúc HCA kiềm hãm cảm giác thèm ăn, đồng thời cải thiện tâm lí phiền muộn người dư cân, béo phì giúp họ giảm lượng phần HCA dạng tự có hoạt tính sinh học khơng bền, dễ chuyển hóa thành dạng lacton, bền hoạt động Vì cần phải tạo HCA tồn dạng dẫn xuất, bền có hoạt tính sinh học Theo kết nghiên cứu giới muối HCA kim loại kiềm kiềm thổ có tác dụng giảm cân Một số muối magie HCA (magie hydroxycitrat) Muối magie HCA có hoạt tính sinh học HCA, ngồi cịn bổ sung lượng magie, loại khoáng chất quan trọng cho thể Ở Việt Nam, bứa loại dễ trồng, phát triển tốt, cho suất cao có hầu hết địa bàn Miền Trung, Tây Nguyên, Nam Bộ Dân ta dùng bứa làm ăn, dùng vỏ bứa để trị số bệnh da dùng búp non nhai ăn để chữa bệnh động thai, Tuy nhiên, nước ta chưa có nhiều cơng trình nghiên cứu ứng dụng loại axit này, dẫn xuất cách rộng rãi hiệu Thiếu nghiên cứu mang tính thành phần, tính chất, khả ứng dụng, công nghệ khai thác hợp chất hố học có bứa Đây vấn đề đáng quan tâm nghiên cứu nhằm góp phần quy hoạch, khai thác, chế biến ứng dụng sản phẩm bứa cách có hiệu quả, khoa học Với lí trên, chọn đề tài: “Nghiên cứu số tính chất muối magie hydroxycitrat, ứng dụng chế biến bột giảm béo hịa tan” Mục đích nghiên cứu - Nghiên cứu số tính chất lý hóa muối magie hydroxycitrat tổng hợp từ MgO axit hydroxycitric chiết tách từ vỏ bứa - Nghiên cứu chế biến bột giảm béo hòa tan từ muối magie hydroxycitrat theo công thức sản phẩm chức Hydrotrim - Đóng góp thêm thơng tin, tư liệu khoa học muối HCA, tạo sở khoa học ban đầu cho nghiên cứu sâu ứng dụng muối HCA Đối tượng phạm vi nghiên cứu  Đối tượng nghiên cứu - Muối magie hydroxycitrat  Phạm vi nghiên cứu - Tổng hợp muối magie hydroxycitrat từ MgO axit hydroxycitric chiết tách từ vỏ bứa - Chế biến bột hòa tan từ muối magie hydroxycitrat tổng hợp được, đường glucose muối NaCl Phương pháp nghiên cứu - Nghiên cứu lý thuyết: Phương pháp nghiên cứu hợp chất tự nhiên, tổng quan tài liệu đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hoá học, ứng dụng số loài thực vật thuộc họ bứa Clusiaceae - Phương pháp lấy mẫu: Mẫu vỏ chọn chín Quả hái dạng tươi, sau sấy khơ đến độ ẩm thích hợp Dung mơi nước - Phương pháp thực nghiệm: Sử dụng chiết chưng ninh để chiết tách HCA; Chuyển hóa HCA thành muối; Phối trộn muối tạo thành với đường glucose muối NaCl tạo thành bột hịa tan; Phân tích cơng cụ để xác định hàm lượng, độ tinh khiết muối magie hydroxycitrat mẫu muối tạo thành bột hịa tan, nhiệt độ nóng chảy, độ quay cực riêng muối tạo thành; Xác định độ ẩm muối tạo thành, độ hịa tan dung mơi khác nhiệt độ khác Cấu trúc luận văn Luận văn gồm 59 trang, có 10 bảng 28 hình Phần mở đầu 04 trang, kết luận kiến nghị 01 trang, tài liệu tham khảo 01 trang Nội dung luận văn chia làm 03 chương: Chương 1: Tổng quan, 19 trang Chương 2: Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu, 06 trang Chương 3: Kết thảo luận, 18 trang NỘI DUNG CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 CÂY BỨA 1.1.1 Bộ Chè [2] Là lớn, bao gồm chủ yếu thân gỗ có quan hệ gần gũi với sổ sớm ra từ Bộ mầm thuộc phân lớp sổ Dilleniiae Lá đơn có kép; hoa thường cánh phân; nhiều nhị; đài xếp xoắn ốc sát [2] Bộ chè gồm 19 họ, nước ta có họ có họ quan trọng họ Chè họ Măng cụt, phân biệt với chủ yếu sau: - Cây khơng có nhựa mủ, mọc cách thường thuộc Họ Chè - Cây có nhựa mủ màu vàng, mọc đối thường thuộc Họ Măng cụt 1.1.1.1 Họ Chè (Theaceae) Cây gỗ hay bụi, mọc cách, đơn ngun khơng có kèm, thường có tế bào phân nhánh Hoa lưỡng tính, thường mọc đơn độc Đài gồm đài không nhau, tồn Tràng gồm 5-9 cánh rời Nhị nhiều Nhụy 3-5 noãn hợp thành bầu trên, số ô tương ứng với số nỗn, có hay nhiều nỗn, đính nỗn trụ Quả có hay nhiều hạt, khơng có nội nhũ, phơi lớn Họ chè có 29 giống khoảng 550 loài, phân bố chủ yếu nước nhiệt đới cận nhiệt đới hai bán cầu, đặc biệt Đông Đông Nam Á Ở Việt Nam có 11 giống với 100 lồi - Hải đường (Camellia amplexicaulis (Pit.) Coh-Swart.) : Cây bụi Hoa mọc 2-3 gần ngọn, khơng có hương thơm Cánh hoa trịn, đỏ, dính gốc, nhị nhiều, màu vàng, trồng làm cảnh Hoa nở vào dịp tết, thường chưng ngày tết hoa đẹp lâu tàn - Chè (Camellia sinensis (L.) O.Ktze) : Còn gọi trà, chè xanh Hoa mọc đơn độc nách Gốc có 3-4 bắc dễ rụng Đài cánh khơng Tràng có 5-6 cánh, nhị nhiều xếp làm 4-5 dãy Ra hoa từ tháng 9, 10 đến tháng năm sau Hiện nước ta chè loại đặc sản trồng nhiều nông trường Chè tiếng ta chè Phú Thọ, Hà Giang, Thái nguyên 1.1.1.2 Họ Măng cụt (Clusiaceae) Họ măng cụt Guttiferae gọi họ bứa Clusiaceae thuộc Chè Cây gỗ có mủ vàng, cành nhỏ mọc thành nhiều tầng Lá đơn mọc đối, khơng có kèm Phiến dày, mép ngun gân bên nhiều nhỏ không rõ Hoa thường đơn tính hoa tạp tính tức hoa đực hoa lưỡng tính gốc, bầu Quả thịt hay hạch thường có đài tồn gốc Như Măng cụt Garcinia mangostana; dọc G multiflora; bứa G oblongifolia; Tai chua G cowa; mù u (hồ đồng) Calophyllum inophyllum [2], [7] Họ măng cụt gồm 14 giống 350 loài phân bố giới hạn nước nhiệt đới ẩm Ở Việt Nam có giống, 41 lồi [7] 1.1.2 Bứa [1], [7] Bứa - Garcinia oblongifolia Champ Ex Benth., thuộc họ măng cụt-Clusiaceae Mô tả: Cây gỗ thường xanh cao 6-7 m (hình 1.1) Cành non thường vng, xoè ngang rủ xuống Lá hình thuẩn, dài, nhọn, chóp dài, mép ngun, nhẵn bóng, có nhiều điểm mờ Hoa đực mọc thành cụm 3-5 hoa nách lá, đài cánh hoa, 20 nhị có nhị ngắn Hoa lưỡng tính có đài cánh hoa hoa đực, màu vàng trắng; bầu (6-10) ơ, hình cầu, vịi ngắn Quả mọng mang đài tồn tại; vỏ dày, có khía múi, chín màu vàng, phía đỏ chứa 6-10 hạt Mùa hoa tháng 3-6 Bộ phận dùng: Vỏ 10 Nơi sống thu hái: Cây mọc hoang rừng thứ sinh tỉnh từ Hà Tuyên, Vĩnh Phú đến Quảng Nam - Đà Nẵng Cũng thường trồng lấy tươi nấu canh chua Thu hái vỏ quanh năm, cạo bỏ lớp vỏ ngồi, thái nhỏ, phơi khơ Tính vị, tác dụng: Vỏ có tính săn da đắng, mát, độc, có tác dụng tiêu viêm, hạ nhiệt, làm săn da, hàn vết thương Cơng dụng: Lá có vị chua thường dùng thái nhỏ nấu canh chua Hạt có áo hạt chua, ăn được, dùng nấu canh chua Vỏ thường dùng trị: Loét dày, loét tá tràng; Viêm dày ruột, tiêu hoá; Viêm miệng, bệnh cặn răng; Ho máu; Dùng trị bỏng, mụn nhọt, sâu quảng, eczema, dị ứng mẫn ngứa, rút vết đạn đâm vào thịt Liều dùng 20-30 g dạng thuốc sắc; dùng giã vỏ tươi đắp Đơn thuốc: Viêm dày ruột, tiêu hố: Vỏ Bứa sắc đặc đặc lấy 50%; hàng ngày uống 30 ml Bỏng: Nhựa bứa pha dầu làm thành cao lỏng, bôi ngày 1-2 lần 39 (H = 43,718 %), ứng với thể tích axit 200 ml, nhiệt độ chuyển hóa 80 0C, thời gian chuyển hóa phút 3.1.3 Điều chế bột hịa tan Hình 3.11 Sản phẩm Hydrotrim Sản phẩm chức Hydrotrim (hình 3.11) chứa Super Citrimax TM HCA-700FES chất chiết từ Garcinia cambogia chứa 70% Axit Hydroxycitric (HCA) Mỗi gói bột chứa (bảng 3.3): Bảng 3.3 Thành phần gói Hydrotrim (khối lượng 2,26 gam) Thành phần Khối lượng Super Citrimax TM HCA-700-FES 1715 mg (Cung cấp Axit Hydroxycitric (HCA) 1200 mg Glucose 400 mg Muối NaCl 40 mg Aspartame 30 mg Cách chế biến bột hòa tan: cân 1724 mg muối magie hydroxycitrat điều chế được, 434 mg đường glucose (thay aspartame đường glucose), 47 mg muối NaCl cân phân tích Sau trộn hỗn hợp trên, nghiền mịn ta thu bột hịa tan (hình 3.12) Đem hỗn hợp đo HPLC để định lượng muối magie hydroxycitrat có hỗn hợp 40 Hình 3.12 Mẫu bột hịa tan Hình 3.13 Bột hịa tan pha với 100 ml nước cất Pha bột hòa tan (bao gồm: 1724 mg muối magie hydroxycitrat tạo thành, 434 mg đường glucose, 47 mg muối NaCl) chế biến với 100 ml nước cất điều kiện thường (nhiệt độ 30 C), khuấy đũa thủy tinh để hòa tan hết lượng bột Thu dung dịch đồng nhất, màu vàng nhạt, mùi cồn nhẹ (hình 3.13) 3.2 XÁC ĐỊNH MỘT SỐ TÍNH CHẤT CỦA MUỐI MAGIE HYDROXYCITRAT 3.2.1 Xác định độ tan Dụng cụ, thiết bị: cốc thủy tinh 250 ml, đũa thủy tinh, ống đong, bếp cách thủy, tủ sấy, cân phân tích, phễu, giấy lọc, nhiệt kế, tủ lạnh Để xác định độ tan muối tạo thành, trước tiên ta chuẩn bị 100 g 03 loại dung môi nước, cồn 960, etylaxetat Dựa vào khối lượng riêng loại dung môi có nhãn chai đựng dung mơi, ta xác định thể tích cần phải chuẩn bị sau: Dung môi Khối lượng (g) Khối lượng riêng (g/ml) Thể tích (ml) Nước 100 1.00 100 Cồn 96 100 0,78-0,80 126,5 Etylaxetat 100 0,89-0,91 110 41 Trước tiến hành xác định độ tan nhiệt độ khác 20 0C, 30 0C, 50 C, cần chuẩn bị mẫu muối cách nghiền mịn muối tạo thành giấy bạc để giúp q trình hịa tan nhanh chóng Ở 20 0C, đong xác dung môi nước, cồn 96 0, etylaxetat vào 03 cốc thủy tinh sạch, khô Cho lượng muối nghiền mịn biết khối lượng xác (m1) vào 03 cốc đựng 03 dung môi Dùng đũa thủy tinh khuấy phút, đặt vào cốc nhiệt kế Sau đặt 03 cốc thủy tinh chứa muối/nước, muối/ cồn 960 , muối/etylaxetat vào tủ lạnh Khi nhiệt kế 20 C, lấy cốc khỏi tủ lạnh, tiến hành lọc để thu lại lượng muối không tan Đem giấy lọc cốc có chứa muối khơng tan vào tủ sấy, sấy khô Tập hợp lượng muối giấy lọc cốc thủy tinh đem cân xác định khối lượng, ta m Lượng muối tan dung môi (m1- m2) Ở 30 0C, 50 0C, tiến hành tương tự Nhưng lần đặt 03 cốc chứa dung môi muối vào bếp cách thủy nhiệt độ cao nhiệt độ xét khoảng 5-100C, khuấy Sau đó, lấy cốc ngoài, dung dịch cốc hạ nhiệt độ xuống đến nhiệt độ cần xác định tiến hành lọc, thu lượng muối không tan Kết xác định độ tan muối Magie hydroxycitrat dung môi nước, cồn 96 0, etylaxetat 20 0C, 30 C, 50 0C sau (bảng 3.4 hình 3.14): Bảng 3.4 Sự phụ thuộc độ tan vào nhiệt độ dung môi Dung môi Nhiệt độ (100 gam) (o C) Nước Cồn 96 m1 m2 (m1- m2) S % tan 20 6,397 0,955 5,442 5,442 85,1 30 6,352 0,455 5,897 5,897 92,8 50 6,229 0,185 6,044 6,044 97,0 20 1,446 1,300 0,146 0,146 10,1 30 1,317 1,154 0,163 0,163 12,4 50 1,264 1,039 0,225 0,225 17,8 42 Etylaxetat Độ tan (g/100 g dung mơi) Trong đó, 20 1,158 1,046 0,112 0,112 9,7 30 1,153 1,016 0,137 0,137 11,9 50 1,169 0,971 0,198 0,198 16,9 m1 : Khối lượng muối ban đầu (g) m2 : Khối lượng muối lại (g) (m1- m2) : Khối lượng muối tan (g) S : Độ tan (g/100g dung môi) Nước Cồn 96 độ Etylaxetat 20 30 50 Nhiệt độ (oC) Hình 3.14 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Độ tan muối Magie hydroxycitrat vào nhiệt độ dung môi Nhận xét: Đối với ba dung mơi trên, nhiệt độ tăng độ tan tăng Điều hoàn toàn phù hợp với lý thuyết độ tan Độ tan muối Magie hydroxycitrat nước lớn gấp nhiều lần cồn 96 etylaxetat Đó muối Magie hydroxycitrat chất phân cực, dễ dàng tan dung môi phân cực nước 43 3.2.2 Xác định độ ẩm Dựa vào phương pháp trọng lượng xác định độ ẩm muối tạo thành Dụng cụ, thiết bị: cốc thủy tinh (100 ml) để đựng mẫu, tủ sấy, bình hút ẩm, cân phân tích Để xác định độ ẩm muối tạo thành sau thời gian tổng hợp 06 tuần trước tiên, tiến hành nghiền mịn mẫu muối giấy bạc Cân khoảng g mẫu muối nghiền mịn cho vào cốc thủy tinh sấy khô biết khối lượng xác Cho cốc thủy tinh có chứa muối vào tủ sấy sấy 100 C Ta chọn nhiệt độ sấy nhiệt độ nước bay mạnh, không làm ảnh hưởng đến mẫu muối nhiệt độ làm khô mẫu muối trình tổng hợp Sau sấy khoảng 30 phút, ta lấy cốc cho vào bình hút ẩm cốc thủy tinh nguội hẳn tiến hành cân khối lượng cân phân tích Sau đó, khoảng 10 phút ta lại tiến hành trình lần khối lượng lần cân khơng đổi hay có sai số khoảng 0,005g dừng q trình sấy Từ ta tính độ ẩm muối tạo thành theo cơng thức trình bày phần 2.2.6, chương Kết thể bảng 3.5 Bảng 3.5 Kết xác định độ ẩm muối tạo thành STT mẫu m mo w  (%) 5,024 4,828 0,196 3,90 5,132 4,930 0,202 3,94 4,960 4,768 0,192 3,87 5,097 4,898 0,198 3,88 3,90 Trong đó, m (g) : Khối lượng chung nguyên liệu (m = mo + w) mo (g) : Khối lượng chất khơ tuyệt đối (khơng có ẩm) w (g) : Khối lượng nước chứa nguyên liệu  (%) : Độ ẩm tương đối muối tạo thành 44 Nhận xét: Vậy độ ẩm trung bình mẫu muối tạo thành (sau thời gian tổng hợp 06 tuần) 3,90% Độ ẩm nhỏ thuận lợi cho việc cất giữ, bảo quản nơi khơ ráo, thống mát 3.2.3 Xác định nhiệt độ nóng chảy, độ quay cực riêng Như trình bày mục 2.2.3 2.2.5, chương – Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu, kết xác định nhiệt độ nóng chảy độ quay cực riêng muối tạo thành sau: - Theo kết đo phịng thí nghiệm khoa Hóa, khu B2, trường ĐH Sư phạm Đà Nẵng muối khơng có điểm nóng chảy mà bị cháy 300 C - Theo kết đo Trung tâm kỹ thuật tiêu chuẩn đo lường chất lượng II, thành phố Đà Nẵng, muối tạo thành có độ quay cực riêng 20 0C, dung dịch 5% nước +0,7 3.3 ĐỊNH LƯỢNG MUỐI MAGIE HYDROXYCITRAT BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC Chất chuẩn: (-)-Calcium threo-hydroxycitrat tribasic hydrate (CaHC), cung cấp hãng Sigma-Aldrich, công thức C12 H10 Ca3 O16 xH2 O Xây dựng đường chuẩn: Phương pháp xây dựng đường chuẩn thực cách dựa vào kết phân tích chuỗi mẫu CaHC chuẩn Năm mẫu dung dịch chuẩn chứa 1,954; 4,89; 9,772; 19,54; 48,85 ppm CaHC chuẩn tiêm vào HPLC, kết thu diện tích pic Đường chuẩn CaHC vẽ dựa biểu diễn phụ thuộc nồng độ CaHC diện tích pic Phương trình đường chuẩn: A = 14589 C – 8145,2 với A diện tích pic CaHC, C nồng độ CaHC, hệ số tương quan R2 = (hình 3.15) Định lượng muối Magie hydroxycitrat mẫu muối tạo thành: Hòa tan 0,1139 g mẫu muối tạo thành với nước cất lần, định mức tới 50 ml, pha loãng theo tỉ lệ 1:50 với nước cất lần Tiêm mẫu vào HPLC, MgHC thu trực tiếp dựa vào diện tích pic, cách áp dụng hệ số pha loãng sử dụng đường chuẩn Nồng độ 45 MgHC mẫu trình bày dạng % tính tốn theo cơng thức sau: X= Cm  Kpl  f  Vdm m Trong đó, Cm : Nồng độ mẫu tính theo đường chuẩn f : Hệ số chuyển đổi (f= MMgHC/MCaHC= 0,9094) Kpl : Hệ số pha lỗng Vdm : thể tích định mức m : khối lượng mẫu Theo kết tính hàm lượng muối magie hydroxycitrat mẫu muối tạo thành 53,9% Hình 3.15 Đường chuẩn muối Canxi hydroxycitrat (CaHC) 46 Hình 3.16 Sắc kí đồ muối Magie hydroxycitrat tổng hợp Nhận xét: Đối chiếu hai đường sắc kí đồ muối tổng hợp với sắc kí đồ muối canxi hydroxycitrat chuẩn ta thấy thời gian lưu gần trùng Như kết luận thành phần muối tổng hợp muối magie hydroxycitrat, ngồi cịn có tạp chất 3.4 ĐỊNH LƯỢNG MUỐI MAGIE HYDROXYCITRAT TRONG BỘT HÒA TAN BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC Chất chuẩn: (-)-Calcium threo-hydroxycitrat tribasic hydrate (CaHC), cung cấp hãng Sigma-Aldrich, công thức C12 H10 Ca3 O16 xH2 O Xây dựng đường chuẩn: Phương pháp xây dựng đường chuẩn thực cách dựa vào kết phân tích chuỗi mẫu CaHC chuẩn Năm mẫu dung 47 dịch chuẩn chứa 2,546; 5,090; 10,180; 20,360; 50,910 ppm CaHC chuẩn tiêm vào HPLC, kết thu diện tích pic Đường chuẩn CaHC vẽ dựa biểu diễn phụ thuộc nồng độ CaHC diện tích pic Phương trình đường chuẩn: A = 14725 C – 4567,7 với A diện tích pic CaHC, C nồng độ CaHC, hệ số tương quan R2 = 0,9999 (hình 3.17) Định lượng muối Magie hydroxycitrat mẫu muối tạo thành: Hòa tan 0,2086 g mẫu bột hòa tan với nước cất lần, định mức tới 100 ml, pha loãng theo tỉ lệ 1:50 với nước cất lần Tiêm mẫu vào HPLC, hàm lượng MgHC bột hòa tan thu trực tiếp dựa vào diện tích pic, cách áp dụng hệ số pha loãng sử dụng đường chuẩn Nồng độ MgHC bột hịa tan trình bày dạng % tính tốn theo cơng thức sau tương tự trình bày mục 3.3 Theo kết tính hàm lượng muối magie hydroxycitrat mẫu bột hịa tan 37,9% Hình 3.17 Đường chuẩn muối Canxi hydroxycitrat (CaHC) 48 Hình 3.18 Sắc kí đồ bột hịa tan gồm muối Magie hydroxycitrat tổng hợp được, đường glucose, muối NaCl Nhận xét: Đối chiếu hai đường sắc kí đồ mẫu bột hịa tan với sắc kí đồ muối canxi hydroxycitrat chuẩn ta thấy thời gian lưu gần trùng So sánh thời gian lưu CaHC/mẫu muối tạo thành với CaHC/bột hịa tan, thấy có khác biệt khơng đáng kể (5.680 so với 6.080) Đó ảnh hưởng thành phần khác có mẫu bột hịa tan Như kết luận muối magie hydroxycitrat không bị biến đổi phối trộn tạo bột hòa tan 3.5 ĐÁNH GIÁ THÀNH PHẦN KIM LOẠI NẶNG VÀ MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH CỦA MUỐI THU ĐƯỢC [6], [9] Từ nghiên cứu trước muối magie hydroxycitrat cho kết thành phần kim loại nặng số tiêu vi sinh thể bảng 3.6 3.7 49 Bảng 3.6 Kết xác định thành phần kim loại nặng mẫu muối magie hydroxycitrat tổng hợp Tên kim loại Tiêu Phương pháp thử Kết (AAS) chuẩn Hàm lượng CODEX (mg/kg) STAN cho 164-1989 phép [6] [6] (mg/kg) (mg/kg) Pb TCVN 6193-1996 0,0112 0,3 Cu TCVN 6193-1996 0,2638 5,0 30 Zn TCVN 6193-1996 1,5604 5,0 40 Fe TCVN 6193-1996 5,363 15,0 Sn TCVN 6193-1996 0,1552 200,0 40 As TCVN 6193-1996 0,0146 0,2 7,1872 25,0 Tổng Cu, Zn Fe Bảng 3.7 Kết xác định số tiêu vi sinh muối tổng hợp TT TÊN CHỈ TIÊU – ĐƠN PHƯƠNG VỊ TÍNH PHÁP KẾT QUẢ THỬ GIỚI THỬ NGHIỆM HẠN CHO PHÉP Tổng vi khuẩn hiếu khí TCVN 5042 - 1994 25 khuẩn lạc/g 1000 kl/g E.Coli TCVN 5042 - 1994 Không phát Vắng mặt Tổng bào tử nấm men – TCVN 5042 - 1994 Không phát 100 kl/g nấm mốc Nhận xét: Hàm lượng kim loại nặng tiêu vi sinh muối thu 50 nằm giới hạn cho phép, đó, sử dụng muối Magie hydroxycitrat để làm thực phẩm dược phẩm mà không ảnh hưởng đến sức khoẻ người  Tóm lại, đề tài cung cấp cách cụ thể số tính chất muối Magie hydroxycitrat trình bày cụ thể bảng 3.8 sau: Bảng 3.8 Một số tính chất muối Magie hydroxycitrat Tính chất STT Magie hydroxycitrat Vẻ ngồi Chất bột có màu biến đổi từ vàng nhạt đến trắng Mùi Mùi cồn nhẹ Độ tan nước (30 C) 5,9 g/100 g nước (92,8% tan) Tan HCl lỗng Tan hồn tồn pH (dung dịch 5%) 8-9 Độ ẩm 3,9 % Nhiệt độ nóng chảy 157,7 0C (tham khảo) 10 Độ quay cực riêng (20 C, +0,7 dung dịch 5% nước) Bảo quản Ở nhiệt độ phịng, nơi khơ ráo, thống mát Hàm lượng kim loại nặng Trong giới hạn cho phép tiêu vi sinh 51 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Trong trình triển khai nghiên cứu, đề tài đạt số kết sau: Đã thực chiết tách HCA từ vỏ bứa khô với nồng độ HCA 18,197% Đã thực phản ứng chuyển hóa từ HCA thành muối Magie hydroxycitrat Hiệu suất q trình chuyển hóa 43,718 % Hàm lượng muối Magie hydroxycitrat mẫu muối tạo thành 53,9 % Đã chế biến bột hịa tan có thành phần gồm muối Magie hydroxycitrat, đường glucose, muối NaCl Hàm lượng muối Magie hydroxycitrat mẫu bột hòa tan 37,9 % Đã xác định số số lý hóa muối Magie hydroxycitrat tổng hợp được: Độ quay cực riêng (20 0C, dung dịch 5% nước) +0,7 0; Độ tan nước (30 0C) 5,9 g/100 g nước KIẾN NGHỊ Muối Magie hydroxycitrat tổng hợp từ axit HCA từ vỏ bứa khơ có tác dụng tốt việc giảm béo Hơn nữa, sản phẩm giảm béo dạng bột hòa tan tiện dụng ưa chuộng Vì vậy, nên tiếp tục nghiên cứu theo hướng ứng dụng bứa vào sản xuất thực phẩm chức năng, cụ thể thực phẩm chức có tác dụng giảm béo dạng bột hòa tan Nghiên cứu tỉ lệ phối trộn, thành phần nguyên liệu, hương liệu để bột hòa tan có mùi vị dễ uống, hấp dẫn Và cần đánh giá cảm quan diện rộng 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt 1 Võ Văn Chi (1999), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất y học, Hà Nội [2] Trần Văn Cừ, Nguyễn Thu Hiền, Trần Bá Hoành, Trần Mạnh Kỳ, Đặng Văn Sử, Lê Dĩnh Thái, Nguyễn Văn Thân, Phạm Ngọc Thịnh (2003), Từ điển bách khoa sinh học, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, Hà Nội 3 Đào Hùng Cường (2007), Cơ sở hóa học hữu cơ, Nhà xuất Đà Nẵng 4 Nguyễn Tinh Dung (2000), Hóa học phân tích, Phần III - Các phương pháp phân tích định lượng hóa học, Nhà xuất Giáo dục, Hà Nội 5 Nguyễn Minh Hiền, Khóa luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm năm 2008 6 Phan Thị Huyền, Khóa luận tốt nghiệp cử nhân sư phạm năm 2011 7 Đỗ Tất Lợi (2005), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất y học, Hà Nội 8 Trần Quốc Sơn, Đặng Văn Liếu (2008), Giáo trình sở Hóa học hữu cơ, Tập 1, Nhà xuất Đại học Sư phạm 9 TCVN 5042 – 1994 Nước giải khát: Yêu cầu vệ sinh – Phương pháp thử 10 Tiêu chuẩn Việt Nam 4336 – 86 11 Tuyển tập cơng trình nghiên cứu khoa học Khoa Hóa, trường Đại học Sư phạm Đà Nẵng, Đà Nẵng 2010 [12] Đặng Quang Vinh, Luận văn thạc sĩ với đề tài “Nghiên cứu chiết tách xác định axit hydroxycitric lá, vỏ bứa” [13] Bùi Xuân Vững, Giáo trình phân tích cơng cụ Tiếng Anh 14 Benny Antony (2003), "Studies on Hydroxycitric acid in Garcinia", Research center of Mahatma Gandhi University, Kerala, India 53 ... tơi chọn đề tài: ? ?Nghiên cứu số tính chất muối magie hydroxycitrat, ứng dụng chế biến bột giảm béo hịa tan? ?? Mục đích nghiên cứu - Nghiên cứu số tính chất lý hóa muối magie hydroxycitrat tổng... 08SHH Tên đề tài: ? ?Nghiên cứu số tính chất muối magie hydroxycitrat, ứng dụng chế biến bột giảm béo hòa tan? ?? Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị  Nguyên liệu: vỏ bứa khơ  Hóa chất: cồn 96 0, nước cất,... lượng muối Magie hydroxycitrat mẫu muối tạo thành 53,9 % Đã chế biến bột hịa tan có thành phần gồm muối Magie hydroxycitrat, đường glucose, muối NaCl Hàm lượng muối Magie hydroxycitrat mẫu bột hòa