i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Nguyễn Đình Chung NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA RỄ CỦ CÂY MẠCH MƠN (OPHIOPOGON JAPONICUS (L.f.) KER-GAWL.) LUẬN ÁN TIẾN SỸ HĨA HỌC Hà Nội – 2018 ii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Nguyễn Đình Chung NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA RỄ CỦ CÂY MẠCH MÔN (OPHIOPOGON JAPONICUS (L.f.) KER-GAWL.) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 62.44.01.14 LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS Nguyễn Tiến Đạt TS Nguyễn Văn Thanh Hà Nội – 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây cơng trình nghiên cứu riêng hướng dẫn PGS TS Nguyễn Tiến Đạt TS Nguyễn Văn Thanh Các số liệu kết luận án hoàn toàn trung thực chưa công bố công trình khác Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Tác giả luận án Nguyễn Đình Chung ii LỜI CẢM ƠN Luận án hồn thành Viện Hố sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới PGS TS Nguyễn Tiến Đạt TS Nguyễn Văn Thanh người thầy tận tình hướng dẫn, hết lịng bảo tạo điều kiện giúp đỡ thời gian làm luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Hóa sinh biển tập thể cán Viện quan tâm giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu thực luận án Tơi xin chân thành cảm ơn Phịng Hoạt chất sinh học Phịng Dược liệu biển - Viện Hóa Sinh biển đặc biệt TS Nguyễn Phương Thảo, TS Nguyễn Hải Đăng, ThS Phạm Thanh Bình cộng tạo điều kiện giúp đỡ có lời khun bổ ích góp ý q báu việc thực hồn thiện luận án Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới tồn thể gia đình, bạn bè người thân ln ln quan tâm, khích lệ, động viên tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả Nguyễn Đình Chung iii MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng ix Danh mục hình x MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chi Ophiopogon…………………………………………… 1.2 Giới thiệu Mạch môn…………………………………………… 1.2.1 Vài nét thực vật học…………………………………………………… 1.2.2 Cơng dụng tính vị……………………………………………………… 1.2.2.1 Tại Việt Nam………………………………………………… 1.2.2.2 Trên giới…………………………………………………… 1.2.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Mạch mơn……………………………………………………………………………… 1.2.3.1 Thành phần hóa học………………………………………… 1.2.3.2 Hoạt tính sinh học…………………………………………… 18 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu…………………………………………………… 26 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu……………………………………… 26 2.3 Phƣơng pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất………………… 27 2.4 Phƣơng pháp đánh giá hoạt tính sinh học……………………………… 29 iv 2.4.1 Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào…………………… 29 2.4.2 Phương pháp đánh giá sản sinh NO………………………… 31 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 34 3.1 Chiết phân lập hợp chất……………………………………… 34 3.2 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập 39 CHƢƠNG THẢO LUẬN 45 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập đƣợc…………………… 45 4.1.1 Xác định cấu trúc nhóm chất benzofuran…… …………………… 47 4.1.1.1 Hợp chất OJ-1….…………………… ……………………… 47 4.1.1.2 Hợp chất OJ-2………………………………………………… 53 4.1.1.3 Hợp chất OJ-3………… …………………………………… 58 4.1.1.4 Hợp chất OJ-4………………………………………………… 62 4.1.1.5 Hợp chất OJ-5………………………………………………… 68 4.1.2 Xác định cấu trúc nhóm chất homoisoflavonoid…… ……………… 72 4.1.2.1 Hợp chất OJ-6………………………………………………… 72 4.1.2.2 Hợp chất OJ-7………… …………………………………… 77 4.1.2.3 Hợp chất OJ-8………………………………………………… 82 4.1.2.4 Hợp chất OJ-9………………………………………………… 87 4.1.3 Xác định cấu trúc nhóm chất flavonoid……….…………………… 92 4.1.3.1 Hợp chất OJ-10……………… ……………………………… 92 4.1.3.2 Hợp chất OJ-11………………… …………………………… 97 4.1.4 Xác định cấu trúc nhóm chất eudesmane sesquiterpenoid……… 97 4.1.4.1 Hợp chất OJ-12………………… …………………………… 99 4.1.4.2 Hợp chất OJ-13……………………………………………… 104 4.1.4.3 Hợp chất OJ-14………………………….…………………… 107 v 4.1.5 Xác định cấu trúc hợp chất khác……………………………… 110 4.1.5.1 Hợp chất OJ-15……………………………………………… 110 4.2 Đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất phân lập đƣợc………… 116 4.2.1 Hoạt tính gây độc tế bào…………………………………………… 116 4.2.2 Hoạt tính ức chế sản sinh NO……………………………………… 119 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 121 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN 123 TÀI LIỆU THAM KHẢO 124 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT A549 Human adenocarcinoma Dòng tế bào ung thư biểu mô lung epithelial cell line phổi BEL-7402 Human hepatoma cell line Dòng tế bào ung thư gan CC Column Chromatography Sắc ký cột 13 C NMR CH2Cl2 DEPT DMEM Carbon-13 Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Nuclear Resonance Spectroscopy cacbon 13 dichloromethan Diclometan Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer Dulbecco’s Modified Phổ DEPT Eagle Môi trường nuôi cấy tế bào Medium DMEM DMSO Dimethylsulfoside Dimethylsulfoside EC100 Effective concentration 100% Nồng độ có hiệu 100% EC50 Effective concentration 50% Nồng độ có hiệu 50% ED50 Effective dose 50% Liều hiệu dụng 50% EGFR ESI-MS H NMR Epidermal H- H COSY Hela Factor Thụ thể yếu tố phát triển biểu Receptor mô Electronspray Ionization Mas Phổ khối ion hóa phun mù điện tử Spectrum Proton Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Spectroscopy 1 Growth H-1H Chemical Correlation Spectroscopy Hela human cervix cell line proton Shift Phổ tương tác proton Dòng tế bào ung thư cổ tử cung vii Hep-3B Hep-G2 HMBC Human HSQC hepatocellular carcinoma cell line Heteronuclear Multiple Dòng tế bào ung thư gan người Bond Phổ tương tác di hạt nhân qua nhiều liên kết Connectivity High HR-TOF-MS Dòng tế bào ung thư gan người Human hepatoma cell line Time Phổ khối phân giải cao thời Resolution of-Flight Mass Spectrometer gian bay Single Phổ tương tác dị hạt nhân qua Heteronuclear Quantum Coherence liên kết IC50 Inhibitory concentration 50% Nồng độ ức chế 50% IR Infrared Spectroscopy Phổ hồng ngoại IUPAC KB International Union of Pure and Applied Chemistry Human epidemoid carcinoma cell line Hiệp hội Hóa học Quốc tế Dịng tế bào ung thư biểu mô LPS Lipopolysaccharide Lipopolysacaride LU Lung carcinoma cell lines Dòng tế bào ung thư phổi MeOH Methanol Metanol/ rượu metylic MCF-7 MIC Mp MTT Human breast adenocarcinoma cell line Minimal inhibitory concentration Dong tế bào ung thư vú người Nồng độ ức chế tối thiểu Melting Point Điểm chảy [3-(4,5-dimethylthiazol-2- [3-(4,5-dimetylthiazol-2-yl)2,5- yl)2,5-diphenyltetrazolium diphenyltetrazoli bromua] viii bromide] NSCLC Non-small cell lung cancer Ung thư phổi tế bào khơng nhỏ SK-MEL-2 Human melanoma cell line Dịng tế bào sắc tố người TKI Tyrosine kinase inhibitor Chất ức chế Tyrosine kinase TLC Thin layer chromatography Sắc ky lớp mỏng TMS Tetrametyl Silan Tetrametyl Silan 120 chất OJ-2 thể hoạt tính ức chế trung bình với giá trị IC50 = 29,1 µM Các hợp chất khác thể hoạt tính ức chế yếu khơng có hoạt tính (Bảng 15) 2,3Dihydrobenzofuran biết đến hợp chất có tác dụng kháng viêm mạnh Điều chứng minh thể hợp chất có khung 2,3dihydrobenzofuran-2-one có khả kháng viêm mạnh thử nghiệm in vivo Các hợp chất có khung 5-chloro-6-cyclohexyl-2,3-dihydrobenzofuran-2-one có ý nghĩa ức chế mạnh so với chất tham khảo diclofenac tất thí nghiệm [100] Thêm vào đó, hợp chất dihydrobenzofuran phân lập từ hạt Prunus tomentosa thử nghiệm thu kết ức chế mạnh sản sinh NO dòng tế bào BV-2 [101] Từ kết nghiên cứu rằng, nhóm chất dihydrobenzofuran từ rễ củ Mạch môn nguồn kháng viêm từ tự nhiên tiềm nên nghiên cứu sâu để tìm nguồn kháng viêm công nghiệp sản xuất dược phẩm Hai hợp chất thuộc nhóm homoisoflavonoid homoisopogon A (OJ-6) homoisopogon B (OJ-7) thể tác dụng ức chế sản sinh NO với giá trị IC50 22,5 19,3 μM, tương ứng Các hợp chất khác tác dụng nồng độ thử nghiệm lớn 30 μM 121 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Về nghiên cứu thành phần hóa học Từ rễ củ Mạch môn (O japonicus), 15 hợp chất phân lập bao gồm 09 hợp chất mới, 02 hợp chất lần phân lập từ thiên nhiên 04 hợp chất biết Các hợp chất thuộc nhóm chất benzofuran (05 chất), homoisoflavonoid (04 chất), flavonoid (02 chất), eudesmane sesquiterpenoid (03 chất) steroidal glycoside (01 chất) Cấu trúc hóa học chúng xác định có tên sau: Nhóm chất benzofuran: (2R)-(4-methoxybenzyl)-5,7-dimethyl-6-hydroxyl2,3-dihydrobenzofuran (OJ-1, chất mới), 2-(2-hydroxyl-4-methoxy-benzyl)-5methyl-6-methoxyl-2,3-dihydrobenzofuran (OJ-2, chất mới), 2-(4-hydroxy- benzyl)-5,6-dihydroxylbenzofuran (OJ-3, chất mới), 2-(4-methoxy-benzyl)-6,7dimethoxyl-2,3-dihydrobenzofuran (OJ-4, chất lần đầu phân lập từ thiên nhiên) 2-(4-methoxy-benzyl)-6,7-methylenedioxy-2,3-dihydrobenzofuran (OJ-5, chất lần đầu phân lập từ thiên nhiên) Nhóm chất homoisoflavonoid: homoisopogon A (OJ-6, chất mới), homoisopogon B (OJ-7, chất mới), homoisopogon C (OJ-8, chất mới) homoisopogon D (OJ-9, chất mới) Nhóm chất flavonoid: 8-C-methyl-3',5,5',7-tetrahydroxy-3,4′-dimethoxy flavone (OJ-10, chất mới) myricetin 3,4'-dimethyl ether (3',5,5',7-tetrahydroxy3,4'-dimethoxyflavone) (OJ-11) Nhóm chất eudesmane sesquiterpenoid: 1α,4β,6β-trihydroxy-5,10-bis-epieudesmane-6-O-β-D-glucopyranoside (OJ-12), 1α,6β-dihydroxy-5,10-bis-epi- eudesm -4(15)-ene-6-O-β-D-glucopyranoside (OJ-13) 1α,6β-dihydroxy-5,10-bisepi-eudesm-3-ene-6-O-β-D-glucopyranoside (OJ-14) Nhóm chất steroidal glycoside: (25R)-ruscogenin 1-O-(4-O-sulfo)-β-Dfucopyranoside (OJ-15, chất mới) Các hợp chất có khung 2-benzylbenzofuran gặp dẫn xuất 2-benzyl-2,3-dihydrobenzofuran chưa phân lập từ thiên nhiên Luận 122 án phân lập xác định cấu trúc hoá học 05 hợp chất thuộc nhóm chất Cùng với hợp chất thuộc nhóm chất khác, điểm bật luận án đóng góp vào ngân hàng liệu hố học hợp chất thiên nhiên Về nghiên cứu hoạt tính sinh học 2.1 Đã khảo sát hoạt tính gây độc tế bào in vitro hợp chất phân lập dòng tế bào ung thư phổi kháng thuốc (A549), ung thư phổi (LU-1), ung thư biểu mô (KB), ung thư sắc tố (SK-Mel-2) Kết cho thấy hợp chất homoisopogon A (OJ-6) có hoạt tính mạnh dòng tế bào thử nghiệm (LU-1, KB SK-Mel-2) với giá trị IC50 từ 0,51 đến 0,66 µM, so sánh với chất đối chứng ellipticine Hợp chất (2R)-(4-methoxybenzyl)-5,7-dimethyl-6-hydroxyl-2,3dihydro benzofuran (OJ-1) có tác dụng mạnh với giá trị IC50 từ 8,86 đến 14,0 µM Đối với dịng tế bào ung thư phổi kháng thuốc (A549), homoisopogon A (OJ-6) thể tác dụng mạnh so với đối chứng dương camptothecin Hợp chất thể tác dụng gây chết tế bào ung thư A549 chế gây chết theo chương trình nồng độ thử nghiệm 25 50 μM 2.2 Đánh giá hoạt tính kháng viêm dựa ảnh hưởng ức chế sản sinh NO 15 hợp chất tế bào đại thực bào RAW264.7 Trong số hợp chất phân lập được, hợp chất dẫn xuất thuộc nhóm benzofuran thể hoạt tính tốt Hợp chất OJ-1 ức chế mạnh sản sinh NO với giá trị IC50 = 11,4 µM, hợp chất OJ-2 thể hoạt tính ức chế trung bình với giá trị IC50 = 29,1 µM Hai hợp chất thuộc nhóm homoisoflavonoid homoisopogon A (OJ-6) homoisopogon B (OJ-7) thể tác dụng ức chế sản sinh NO với giá trị IC50 22,5 19,3 μM Kiến nghị: Đây cơng trình nghiên cứu Mạch môn (O japonicus), hợp chất phân lập thể hoạt tính gây độc tế bào hoạt tính kháng viêm nhiều tiềm Đặc biệt hợp chất homoisopogon A (OJ-6) cần nghiên cứu sâu hoạt tính sinh học theo tác dụng gây chết tế bào ung thư kháng viêm 123 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Nguyen Dinh Chung, Nguyen Phuong Thao, Ha Manh Tuan, Nguyen Van Thanh, Nguyen Hai Dang, Nguyen Tien Dat New steroidal glycoside and flavonoid constituents from Ophiopogon japonicus Nat Prod Commun., 2017, 12(6), 905–906 Nguyen Hai Dang, Nguyen Dinh Chung, Ha Manh Tuan, Nguyen Tuan Hiep, Nguyen Tien Dat Cytotoxic homoisoflavonoids from Ophiopogon japonicus tubers Chem Pharm Bull., 2017, 65(2), 204–207 Nguyen Hai Dang, Nguyen Dinh Chung, Ha Manh Tuan, Nguyen Van Thanh, Nguyen Tuan Hiep, Dongho Lee, and Nguyen Tien Dat 2-Benzyl-benzofurans from the tubers of Ophiopogon japonicus Chem Cent J., 2017, 11:15 Nguyen Dinh Chung, Nguyen Tien Dat, Le Thi Van Anh, Jeong-Hyung Lee, Nguyen Hai Dang Homoisopogon A from Ophiopogon japonicus induced apoptosis in A549-a non small cell lung cancer cell line Tạp chí Sinh học, 2017, 15(1), 35–39 Nguyen Dinh Chung, Nguyen Hai Dang, Nguyen Van Thanh, Nguyen Tien Dat Eudesmane sesquiterpene glucosides from Ophiopogon japonicus Tạp chí Khoa học Công nghệ, 2015, 53(4C), 56–62 124 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Editorial board of flora of China Flora of China Science Publishing House, Beijing 1978, Vol 24, p 252 [2] Masaoud, M.; Ripperger, H.; Porzel, A.; Adam, G Flavonoids of dragon's blood from Dracaena cinnabari Phytochemistry 1995, 38, 745–749 [3] Bích, Đ.H Cây thuốc động vật làm thuốc Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật 2004, Tập 2, 216–220 [4] Chi, V.V Từ điển thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học, Hà Nội 2012, 1, 1023 [5] Hung, T.M.; Thu, C.V.; Dat, N.T.; Ryoo, S.W.; Lee, J.H.; Kim, J.C.; Na, M.; Jung, H.J.; Bae, K.; Min, B.S Homoisoflavonoid derivatives from the roots of Ophiopogon japonicus and their in vitro anti-inflammation activity Bioorg Med Chem Lett., 2010, 20, 2412–2416 [6] Anh, N.T.H.; Sung, T.V.; Porzel, A.; Franke, K.; A, L.; Wessjohann Homoisoflavonoids from Ophiopogon japonicus Ker-Gawler Phytochemistry 2003, 62, 1153–1158 [7] Đỏ, N.T Thực vật chí Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật 2007, Tập 8, 16–192 [8] Lợi, Đ.T Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học 2006, pp 428–429 [9] Feng, Z.Y.; Jin, Q.; Ni, Z.D.; Yang, Y.B Homoisoflavonoids from Ophiopogon japonicus and its oxygen free radicals (OFRS) scavenging effects Chinese J Nat Med., 2008, 6(3), 201–204 [10] Chi, V.V Dictionary of common plants Science and Technology: Hanoi 1999, Vol 1, p 709 [11] State administration of traditional chinese medicine of PRC Chinese materia medica Shanghai Science and Technology Publishers, Shanghai, China 1999 125 [12] Liang, H.; Xing, Y.; Chen, J.; Zhang, D.; Guo, S.; Wang, C Antimicrobial activities of endophytic fungi isolated from Ophiopogon japonicus (Liliaceae) BMC Complement Altern Med., 2012, 238, 1472–1477 [13] Xia, C.H.; Sun, J.G.; Wang, G.J.; Shang, L.L.; Zhang, X.X.; Zhang, R.; Wang, X.J.; Hao, H.P.; Xie, L Differential effect of shenmai injection, a herbal preparation, on the cytochrome P450 3a-mediated 1’-hydroxylation and 4-hydroxylation of midazolam Chem Biol Interact., 2009, 180(3), 440– 448 [14] Yao, H.T.; Chang, Y.W.; Chen, C.T.; Chiang, M.T.; Chang, L.; Yeh, T.K Shengmai san reduces hepatic lipids and lipid peroxidation in rats fed on a high-cholesterol diet J Ethnopharmacol., 2008, 116(1), 49–57 [15] Izawa, M.D Colored illustrations of medicinal plants (material medica) of Japan Seibundo-shinkosha Publishing Co Tokyo, Japan 1967, 272–273 [16] Iqbal, Z.; Hiradate, S.; Araya, H.; Fujii, Y Plant growth inhibitory activity of Ophiopogon japonicus Ker-Gawler and role of phenolic acids and their analogues: A comparative study Plant Grow Reg., 2004, 43(3), 245–250 [17] Tada, A.; Kobayashi, M.; Shoji, J Studies on the constituents of Ophiopogonis tuber III On the structure of ophiopogonin D Chem Pharm Bull., 1973, 21, 308–311 [18] Tada, A.; Shoji, J Studies on the constituents of Ophiopogonis tuber II On the structure of ophiopogonin B Chem Pharm Bull., 1972, 20(8), 1729– 1734 [19] Watanabe, Y.; Sanada, S.; Tada, A.; Shoji, J Studies on the constituents of ophiopogonis tuber IV On the structures of ophiopogonin A, B’, C, C’, and D’ Chem Pharm Bull., 1977, 25(11), 3049–3055 [20] Asano, T.; Murayama, T.; Hirai, Y.; Shoji, J Comparative studies on the constituents of ophiopogonis tuber and its congeners VIII Studies on the glycosides of the subterranean part of Ophiopogon japonicus Ker-Gawler cv nanus Chem Pharm., Bull., 1993, 41(3), 566–570 126 [21] Liu, N.; Wen, X.B.; Liu, J.H.; Liang, M.; Zeng, H.J.; Lin, Y Determination of ruscogenin in crude chinese medicines and biological samples by immunoassay Anal Bioanal Chem., 2006, 386(6), 1727–1733 [22] Duan, C.L.; Ma, X.F.; Jiang, Y.; Liu, J.X.; Tu, P.F Spirostanol saponins from the fibrous roots of Ophiopogon japonicus (Thunb.) Ker-Gawl Helv Chim Acta 2010, 93(2), 227–232 [23] Duan, C.L.; Ma, X.F.; Jiang, Y.; Liu, J.X.; Tu, P.F Two new furostanol glycosides from the fibrous root of Ophiopogon japonicus (Thunb.) KerGawl J Asian Nat Prod Res., 2010, 12(9), 745–751 [24] Zhang, T.; Kang, L.P.; Yu, H.S.; Liu, Y.X.; Zhao, Y.; Xiong, C.Q.; Zhang, J.; Zou, P.; Song, X.B.; Liu, C., et al Steroidal saponins from the tuber of Ophiopogon japonicus Steroids 2012, 77(12), 1298–1305 [25] Li, N.; Zhang, L.; Zeng, K.W.; Zhou, Y.; Zhang, J.Y.; Che, Y.Y.; Tu, P.F Cytotoxic steroidal saponins from Ophiopogon japonicus Steroids 2013, 78(1), 1–7 [26] Zhou, Y.F.; Qi, J.; Zhu, D.N.; Yu, B Two new steroidal glycosides from Ophiopogon japonicus Chinese Chem Lett., 2000, 11, 901–904 [27] Xu, T.-H.; Xu, Y.-J.; Xie, S.-X.; Zhao, H.-F.; Han, D.; Li, Y.; Niu, J.-Z.; Xu, D.-M A novel steroidal glycoside, ophiofurospiside A from Ophiopogon japonicus (Thunb.) Ker-Gawl J Asian Nat Prod Res., 2008, 10(5-6), 415– 418 [28] Liu, Y.X Study on steroidal saponins from Ophiopogon japonicus Master thesis of Nanhua University 2013 [29] Ye, Y.; Qu, Y.; Tang, R.; Cao, S.; Yang, W.; Xiang, L.; Qi, J Three new neuritogenic steroidal saponins from Ophiopogon japonicus (Thunb.) KerGawl Steroids 2013, 78(12-13), 1171–1176 [30] Liu, Y.; Meng, L.-Z.; Xie, S.-X.; Xu, T.-H.; Sun, L.-k.; Liu, T.-H.; Xu, Y.-J.; Xu, D.-M Studies on chemical constituents of Ophiopogon japonicus J Asian Nat Prod Res., 2014, 16(10), 982–990 127 [31] Li, N.; Zhang, J.Y.; Zeng, K.W.; Zhang, L.; Che, Y.Y.; Tu, P.F Antiinflammatory homoisoflavonoids from the tuberous roots of Ophiopogon japonicus Fitoterapia 2012, 83(6), 1042–1045 [32] Zhu, Y.; Yan, K.; Tu, G Two homoisoflavones from Ophiopogon japonicus Phytochemistry 1987, 26(10), 2873–2874 [33] Duan, C.L.; Kang, Z.Y.; Lin, C.R.; Jiang, Y.; Liu, J.X.; Tu, P.F Two new homoisoflavonoids from the fibrous roots of Ophiopogon japonicus (Thunb.) Ker-Gawl J Asian Nat Prod Res., 2009, 11(10), 876–879 [34] Zhou, Y.-F.; Qi, J.; Zhu, D.-N.; Yu, B.-Y Homoisoflavonoids from Ophiopogon japonicus and its oxygen free radicals (OFRS) scavenging effects Chinese J Nat Med., 2008, 6, 201–204 [35] Lan, S.; Yia, F.; Shuang, L.; ChenJie, W.; Zheng, X.W Chemical constituents from the fibrous root of Ophiopogon japonicus, and their effect on tube formation in human myocardial microvascular endothelial cells Fitoterapia 2013, 85, 57–63 [36] Wang, Y.Y.; Xu, J.Z.; Qu, H.B Determination of three steroidal saponins from Ophiopogon japonicus (Liliaceae) via high-performance liquid chromatography with mass spectrometry Nat Prod Res., 2013, 27(1), 72– 75 [37] Tada, A.; Kasai, R.; Saitoh, T.; Shoji, J Studies on the constituents of ophiopogonis tuber V Isolation of a novel class of homoisoflavonoids and determination of their structures Chem Pharm Bull., 1980, 28, 1477–1484 [38] Kaneda, N.; Nakanishi, H.; Kuraishi, T.; Katori, T Studies on the components of Ophiopogon roots (China).I J Pharm Soc Japan 1983, 103, 1133–1139 [39] Asano, T.; Murayama, T.; Hirai, Y.; Shoji, J Comparative studies on the constituents of ophiopogonis tuber and its congeners VII Studies on the homoisoflavonoids of the subterranean part of Ophiopogon japonicus KerGawler cv Chem Pharm Bull., 1993, 41, 391–393 128 [40] Chang, J.M.; Shen, C.C.; Huang, Y.L.; Chien, M.Y.; Ou, J.C.; Shieh, B.J.; Chen, C.C Five new homoisoflavonoids from the tuber of Ophiopogon japonicus J Nat Prod., 2002, 65(11), 1731–1733 [41] Li, N.; Zhang, J.Y.; Zeng, K.W.; Zhang, L.; Che, Y.Y.; Tu, P.F Antiinflammatory homoisoflavonoids from the tuberous roots of Ophiopogon japonicus Fitoterapia 2012, 83(6), 1042–1045 [42] Zhou, C.; Zou, X.L.; Mo, J.X.; Wang, X.Y.; Yang, B.; He, Q.J.; Gan, L.S Homoisoflavonoids from Ophiopogon japonicus Helv Chim Acta 2013, 96, 1397–1405 [43] Cheng, Z.-H.; Wu, T.; Bligh, S.W.A.; Bashall, A.; Yu, B.-Y Cis-eudesmane sesquiterpene glycosides from Liriope muscari and Ophiopogon japonicus J Nat Prod., 2004, 67(10), 1761–1763 [44] Xiong, S.l.; Li, A.; Huang, N.; Lu, F.; Hou, D Antioxidant and immunoregulatory activity of different polysaccharide fractions from tuber of Ophiopogon japonicus Carbohydr Polym., 2011, 86(3), 1273–1280 [45] Chen, X.; Jin, J.; Tang, J.; Wang, Z.; Wang, J.; Jin, L.; Lu, J Extraction, purification, characterization and hypoglycemic activity of a polysaccharide isolated from the root of Ophiopogon japonicus Carbohydr Polym., 2011, 83(2), 749–754 [46] Wang, L.Y.; Wang, Y.; Xu, D.S.; Ruan, K.F.; Feng, Y.; Wa, S MDG-1, a polysaccharide from Ophiopogon japonicus exerts hypoglycemic effects through the PI3K/AKT pathway in a diabetic kkay mouse model J Ethnopharmacol., 2012, 143(1), 347–354 [47] She, G.; Shi, J Structural features of two neutral polysaccharides MD-1, MD-2 from Ophiopogon japonocus Zhong Yao Cai 2003, 26, 100–101 [48] Cheng, Z.H.; Wu, T.; Li, L.Z.; Liu, N.; Yu, B.Y.; Xu, L.S Studies on the liposoluble components from tuber of Ophiopogon japonicus Zhongguo Yao Xue Za Zhi 2005, 5, 337–341 [49] Cheng, Z.H.; Wu, T.; Yu, B.Y Chemical constituents in the tubers of Ophiopogon japonicus Nat Prod Res Devel., 2005, 17, 1–3 129 [50] Dai, H.; Mei, W Ophiopojaponin D, a new phenylpropanoid glycoside from Ophiopogon japonicus Ker-Gawl Arch Pharm Res., 2005, 28(11), 1236– 1238 [51] Shen, H.L.; Xiang, N.J.; Xu, Y.; Gao, Q.; Miao, M.M.; Li, J.M Analysis of fatsoluble components of Ophiopogon japonicus by GC-MS Chinese J Spec Lab., 2008, 4, 669–672 [52] Nakanishi, H.; Kameda, N Studies on the component of ophiopogon tuber (China) II J Pharm Soc Japan 1987, 107, 780–784 [53] Kato, H.; Sakuma, S.; Tada, A.; Kawanishi, S.; Shoji, J Studies on the constituents of ophiopogonis tuber I Isolation of steroidal glycosides from tuber of Ophiopogon japonicus Ker-Gawler var genuinus Maxim J Pharm Soc Japan 1968, 88, 710–714 [54] Chen, X.; Tang, J.; Xie, W.; Wang, J.; Jin, J.; Ren, J.; Jin, L.; Lua, J Protective effect of the polysaccharide from Ophiopogon japonicus on streptozotocin-induced diabetic rats Carbohydr Polym., 2013, 94(1), 378– 385 [55] Zhou, Y.F.; Qi, J.; Zhu, D.N.; Yu, B Two new steroidal glycosides from Ophiopogon japonicus Chinese Chem Lett., 2008, 1086–1088 [56] Song, J.; Kou, J.; Huang, Y.; Yu, B Ruscogenin mainly inhibits nuclear factorlategut microbiota in high-fat diet-induced obese C57BL/6 mice Int J Biol Macromol Urnal Pharm Sci., 2010, 113, 409–413 [57] Tian, Y.; Kou, J.; Li, L.; Yu, B Anti-inflammatory effects of aqueous extract from radix liriope muscari and its major active fraction and component Chinese J Nat Med., 2011, 9(3), 222–226 [58] Lina, Y.; Zhua, D.; Qia, J.; Qin, M.; Yu, B Characterization of homoisoflavonoids in different cultivation regions of Ophiopogon japonicus and related antioxidant activity J Pharm Bio Ana., 2010, 52(5), 757–762 [59] Wang, X.M.; Sun, R.G.; Zhang, J.; Chen, Y.Y.; Liu, N.N Structure and antioxidant activity of polysaccharide POJ-U1A extracted by ultrasound from Ophiopogon japonicus Fitoterapia 2012, 83, 1576–1584 130 [60] Huang, Q.; Gao, B.; Wang, L.; Zhang, H.Y.; Li, X.J.; Shi, J.; Wang, Z.; Zhang, J.K.; Yang, L.; Luo, Z.J., et al Ophiopogonin D: A new herbal agent against osteoporosis Bone 2015, 74, 18–28 [61] Sun, K.; Cao, S.; Pei, L.; Matsuura, A.; Xiang, L.; Qi, J.H A steroidal saponin from Ophiopogon japonicus extends the lifespan of yeast via the pathway involved in SOD and UTH1 Int J Mol Sci., 2013, 14(3), 4461– 4475 [62] Xiong, S.; Li, A.; Huang, N.; Lu, F.; Hou, D Antioxidant and immunoregulatory activity of different polysaccharide fractions from tuber of Ophiopogon japonicus Carbohydr Polym., 2011, 86(3), 1273–1280 [63] Chen, M.; Du, Y.; Qui, M.; Wang, M.; Chen, K.; Huang, Z.; Jiang, M.; Xiong, F.; Chen, J.; Zhou, J., et al Ophiopogonin B-induced autophagy in non-small cell lung cancer cells via inhibition of the PI3K/AKT signaling pathway Oncol Rep., 2013, 29, 430–436 [64] Chen, M.; Yang, Z.W.; Zhu, J.T.; Xiao, Z.Y.; Xiao, R Antiarrhythmic effects and electrophysiological properties of ophiopogon total saponins Zhong Guo Yao Li Xue Bao 1990, 11, 161–165 65 Tao, J.; Wang, H.; Chen, J.; Xu, H.; Li, S Effects of saponin monomer 13 of dwarf lilyturf tuber on L-type calcium currents in adult rat ventricular myocytes American J Chinese Med., 2005, 33, 797–806 [66] Zhang, Y.-Y.; Meng, C.; Zhang, X.-M.; Yuan, C.-H.; Wen, M.-D.; Chen, Z.; Dong, D.-C.; Gao, Y.-H.; Liu, C.; Zhang, Z Ophiopogonin D attenuates doxorubicininduced autophagic cell death by relieving mitochondrial damage in vitro and in vivo J Pharmacol Exp Ther., 2015, 352, 166–174 [67] Guan, T.; Liu, Q.; Qian, Y.; Yang, H.; Kong, J.; Kou, J.; Yu, B Ruscogenin reduces cerebral ischemic injury via NF-kappab-mediated inflammatory pathway in the mouse model of experimental stroke European J Pharmacol., 2013, 714(1-3), 303–311 131 [68] Duan, C.; Wang, Y.; Ma, X.; Jiang, Y.; Liu, J.; Tu, P A new furostanol glycoside with fatty acid synthase inhibitory activity from Ophiopogon japonicus Chem Nat Comp., 2012, 48, 613–615 [69] Tian, Y.; Ma, S.; Lin, B.; Kou, J.; Yu, B Ruscogenin glycoside (LM-3) isolated from liriope muscari improves liver injury by dysfunctioning liverinfiltrating lymphocytes J Pharm Pharmacol., 2000, 53(5), 681–688 [70] Fan, Y.; Ma, X.; Zhang, J.; Ma, L.; Gao, Y.; Zhang, W.; Song, X.; Hou, W.; Guo, C.; Tong, D Ophiopogon polysaccharide liposome can enhance the non-specific and specific immune response in chickens Carbohydr Polym., 2015, 119, 219–227 [71] Linwei, D.; Peibo, L.; San, L.C.B.; Wa, C.Y.; Dingzhou, X.; Kwok-Pui, F.; Weiwei, S Mechanistic studies on the antidiabetic activity of a polysaccharide-rich extract of radix ophiopogonis Phytother Res., 2012, 26(1), 101–105 [72] Wang, H Preventive effects of ophiopogon-polysaccharide on apiponectin in gestational diabetes mellitus rat Asian Pac J Trop Med., 2013, 6(4), 296– 299 [73] Li, P.-B.; Lin, W.-L.; Wang, Y.-G.; Peng, W.; Cai, X.-Y.; Su, W.-W Antidiabetic activities of oligosaccharides of Ophiopogonis japonicus in experimental type diabetic rats Int J Biol Macromol., 2012, 51(5), 749– 755 [74] Wang, Y.; Zhu, Y.; Ruan, K.; Wei, H.; Feng, Y MDG-1, a polysaccharide from Ophiopogon japonicus, prevents high fat diet-induced obesity and increases energy expenditure in mice Carbohydr Polym., 2014, 114, 183– 189 [75] Zhu, Y.; Cong, W.; Shen, L.; Wei, H.; Wang, Y.; Wang, L.; Ruan, K.; Wua, F.; Feng, Y Fecal metabonomic study of a polysaccharide, MDG-1 from Ophiopogon japonicus on diabetic mice based on gas chromatography/timeof-flight mass spectrometry (GC TOF/MS) Mol bioSys., 2014, 10, 304–312 132 [76] Tian, Q.; Wang, W.; Miao, C.; Peng, H.; Liu, B.; Leng, F.; Dai, L.; Chen, F.; Bao, J Purification, characterization and molecular cloning of a novel mannosebinding lectin from rhizomes of Ophiopogon japonicus with antiviral and antifungal activities Plant Sci., 2008, 175, 877–884 [77] Tian, Q.; Wang, W.; Miao, C.; Peng, H.; Liu, B.; Leng, F.; Dai, L.; Chen, F.; Bao, J Purification, characterization and molecular cloning of a novel mannosebinding lectin from rhizomes of Ophiopogon japonicus with antiviral and antifungal activities Plant Sci., 2008, 175, 877–884 [78] Zhang, M.; Liu, X.; Song, J.; Hu, Y.; Wang, X.; Li, B Effects of radix ophiopogonis is decoction on embryo-fetal development in rats China J Chinese Mat Med., 2010, 35, 2334–2337 [79] Ye, G.; Ye, M.; Guo, D.; Huang, C Determination of homoisoflavonoids in Ophiopogon japonicus by RP-HPLC Chromatographia 2005, 61, 121–125 [80] Ye, M.; Guo, D.; Ye, G.; Huang, C Analysis of homoisoflavonoids in Ophiopogon japonicus by HPLC-DAD-ESI-MSN1 J American Soc Mass Spec., 2005, 16, 234–243 [81] Mosmann, T Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays J Immunol Methods 1983, 65, 55–63 [82] Skehan, P.; Storeng, R.; Scudiero, D.; Monks, A.; McMahon, J.; Vistica, D.; Warren, J.T.; Bokesch, H.; Kenney, S.; Boyd, M.R New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer-drug screening J Nat Cancer Ins.,1990, 82, 1107–1112 [83] Nathan, C Nitric oxide as a secretory product of mammalian cells FASEB journal: official publication Fed American Soci Exp Biol., 1992, 6, 3051– 3064 [84] Dirsch, V.M.; Stuppner, H.; Vollmar, A.M The griess assay: Suitable for a bio-guided fractionation of anti-inflammatory plant extracts? Planta Med., 1998, 65(4), 423–426 133 [85] Hatziieremia, S.; Gray, A.I.; Ferro, V.A.; Paul, A.; Plevin, R The effects of cardamonin on lipopolysaccharide-induced inflammatory protein production and map kinase and nfkappab signalling pathways in monocytes/macrophages British J Pharmacol., 2006, 149, 188–198 [86] Ortega, N.; Urban, S.; Beiring, B.; Glorius, F Ruthenium nhc catalyzed highly asymmetric hydrogenation of benzofurans Angewandte Chem Int Edition 2012, 51, 1710–1713 [87] Qi, P.; Jiang, J.; Qi, H.; Jin, Y.; Shen, Q.; Wu, Y.; Song, H.; Zhang, W Synthesis and antiproliferative activity of new polyoxo 2-benzyl-2,3dihydrobenzofurans and their related compounds Lett Drug Design Dis., 2013, 10(9), 886–894 [88] Kwon, J.; Hiep, N.T.; Kim, D.W.; Hong, S.; Guo, Y.; Hwang, B.Y.; Lee, H.J.; Mar, W.; Lee, D Chemical constituents isolated from the root bark of Cudrania tricuspidata and their potential neuroprotective effects J Nat Prod., 2016, 79(8), 1938–1951 [89] Franke, K.; Porzel, A.; Masaoud, M.; Adam, G.; Schmidt, J Furanocoumarins from dorstenia gigas Phytochemistry 2001, 56, 611–621 [90] Zhang, W.; Song, H.; Wu, Y.; Shen, Q.; Jin, Y.; Qi, H.; Jiang, J.; Qi, P Synthesis and antiproliferative activity of new polyoxo 2-benzyl-2,3dihydrobenzofurans and their related compounds Lette Drug Design Dis., 2013, 10(6), 886–894 [91] Guo, H.; Zhao, H.; Kanno, Y.; Li, W.; Mu, Y.; Kuang, X.; Inouye, Y.; Koike, K.; Jiang, H.; Bai, H A dihydrochalcone and several homoisoflavonoids from Polygonatum odoratum are activators of adenosine monophosphateactivated protein kinase Bioorg Med Chem Lett., 2013, 23(11), 3137– 3139 [92] Namikoshi, M.; Saitoh, T Homoisoflavonoids and related ompounds Iv.1) absolute configurations of homoisoflavonoids from Caesalpinia sappan L Chem Pharm Bull 1987, 35(9), 3597–3602 134 [93] Awale, S.; Miyamoto, T.; Linn, T.Z.; Li, F.; Win, N.N.; Tezuka, Y.; Esumi, H.; Kadota, S Cytotoxic constituents of Soymida febrifuga from Myanmar J Nat Prod., 72(9), 1631–1636 [94] Coxon, D.T.; O'Neill, T.M.; Mansfield, J.W.; Porter, A.E.A Identification of three hydroxyflavan phytoalexins from Daffodil bulbs Phytochemistry 1980, 19(5), 889–891 [95] Morimoto, S.; Nonaka, G.I.; Nishioka, I.; Ezakiand, N.; Takizawa, N Seven new methyl derivatives of flavan-3ols and a 1,3-diarylpropan-2-ol from Cinnamomum cassia, C Obtusifolium and Lindera umbellata var membranacea Chem Pharm Bull., 1985, 33, 2281–2286 [96] Fang, N.; Leidigand, M.; Mabray, T.J Highly oxygenated flavonoid aglycones from Gutierrezia grandis Phytochemistry 1985, 24(11), 2693– 2698 [97] Hua, Y.; Zhou, J.; Chen, C.X A new eudesmane sesquiterpene glycoside from Parepigynum funingense Chinese Chem Lett., 2007, 18, 73–75 [98] Cheng, Z.H.; Wu, T.; Guo, Y.L.; Yu, B.Y.; Xu, L.S Two new steroidal glycosides from liriope muscari Chinese Chem Lett., 2006, 17, 31–34 [99] Yang, Z.G.; Matsuzaki, K.; Takamatsu, S.; Kitanaka, S Inhibitory effects of constituents from Morus alba var multicaulison differentiation of 3T3-L1 cells and nitric oxide production in RAW264.7 cells Molecules 2011, 16(17), 6010-6022 [100] Closse, A.; Haefliger, W.; Hausser, D.; U.Gubler, H.; Dewald, B.; Baggiolini, M 2,3-Dihydrobenzofuran-2-ones: A new class of highly potent antiinflammatory agents J Med Chem., 1981, 24(12), 1465–1471 [101] Liu, Q.-B.; Huang, X.-X.; Bai, M.; Chang, X.-B.; Yan, X.-J.; Zhu, T.; Zhao, W.; Peng, Y.; Song, S.-J Antioxidant and anti-inflammatory active dihydrobenzofuran neolignans from the seeds of Prunus tomentosa J Agri Food Chem., 2014, 62(31), 7796–7803 ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Nguyễn Đình Chung NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA RỄ CỦ CÂY MẠCH... sinh trưởng thực vật [16] Mạch môn coi loại thức phẩm chức Trung Quốc nước Đông Á 5 1.2.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Mạch mơn 1.2.3.1 Thành phần hóa học Từ nghiên cứu. .. giới…………………………………………………… 1.2.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Mạch mơn……………………………………………………………………………… 1.2.3.1 Thành phần hóa học? ??……………………………………… 1.2.3.2 Hoạt tính sinh học? ??…………………………………………