ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MƠI TRƯỜNG  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY CAROTENOID TRONG PHA SINH TRƯỞNG CỦA VI TẢO SCENEDESMUS OBLIQUUS PHAN THỊ DIỄM MY Đà Nẵng, năm 2020 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MƠI TRƯỜNG  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY CAROTENOID TRONG PHA SINH TRƯỞNG CỦA VI TẢO SCENEDESMUS OBLIQUUS Ngành: Công nghệ sinh học Khóa: 2016 – 2020 Sinh viên: Phan Thị Diễm My Người hướng dẫn: TS Trịnh Đăng Mậu Đà Nẵng, năm 2020 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan liệu trình bày khóa luận trung thực Đây kết nghiên cứu chưa cơng bố cơng trình khác trước Tơi hồn tồn chịu trách nhiệm vi phạm quy định đạo đức khoa học Đà Nẵng, ngày 16 tháng 07 năm 2020 Tác giả khóa luận Phan Thị Diễm My i LỜI CẢM ƠN Đầu tiên tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Trịnh Đăng Mậu giảng viên khoa Sinh – Môi trường, trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ suốt thời gian thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Thứ hai, xin cảm ơn thầy Trần Ngọc Sơn, giảng viên khoa Sinh – Môi trường, trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng không ngại thời gian bảo truyền đạt thêm kiến thức giúp đỡ tơi q trình làm khóa luận tốt nghiệp Thứ ba, xin chân thành cảm ơn thầy, cô giáo khoa Sinh – Môi trường, trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng giảng dạy, truyền đạt kiến thức, tạo điều kiện thuận lợi cho suốt q trình học tập hồn thành khóa luận tốt nghiệp Và lời cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè, người giúp đỡ, động viên suốt thời gian làm khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn! Đà Nẵng, ngày 16 tháng 07 năm 2020 Tác giả Phan Thị Diễm My ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Cs cộng GGPP Geranylgeranyl diphosphate IPP Isopentenyl diphosphate N nitơ P phôtpho iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH ẢNH vii MỞ ĐẦU .1 Tính cấp thiết đề tài .1 Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Nội dung nghiên cứu CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung vi tảo Scenedesmus obliquus 1.1.1 Đặc điểm phân loại .3 1.1.2 Hình thái cấu tạo đặc điểm sinh học 1.1.3 Các giai đoạn trình sinh trưởng tảo Scenedesmus obliquus .4 1.1.4 Sinh sản tảo Scenedesmus obliquus .5 1.1.5 Cơ chế tổng hợp carotenoid vi tảo 1.1.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh trưởng tích lũy carotenoid tảo Scenedesmus obliquus 1.2 Một số nghiên cứu giới nước yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh trưởng, tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus 10 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Đối tượng nghiên cứu 15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Phương pháp nhân giống tảo giữ giống môi trường BG-11 15 2.2.2 Phương pháp xác định mật độ tế bào vi tảo buồng đếm Newbauer 16 2.2.4 Bố trí thí nghiệm 17 2.2.5 Thống kê xử lý số liệu 18 iv CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .19 3.1 Ảnh hưởng nitơ đến sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus 19 3.2 Ảnh hưởng phôtpho đến sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus 21 3.3 Ảnh hưởng NaCl đến sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus .23 3.4 Ảnh hưởng nitơ phơtpho đến tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus 25 3.4.1 Ảnh hưởng nitơ đến tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus .25 3.4.2 Ảnh hưởng phơtpho đến tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus .26 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 29 Kết luận 29 Kiến nghị 29 v DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Tên bảng Thành phần mơi trường BG-11 vi Trang 15 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình Tên hình vẽ Trang 1.1 Vi tảo Scenedesmus obliquus phân lập từ thủy vực nước địa bàn thành phố Đà Nẵng 1.2 Quá trình tổng hợp carotenoid vi tảo 3.1 Đường cong sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus 19 nồng độ nitơ khác 3.2 Tốc độ sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus 20 nồng độ nitơ khác 3.3 Đường cong sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus 21 nồng độ phôtpho khác 3.4 Tốc độ sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus 22 nồng độ phôtpho khác 3.5 Tốc độ sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus 24 nồng độ NaCl khác 3.6 Sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus nồng 24 độ NaCl khác 3.7 Hàm lượng suất tổng hợp carotenoid vi tảo 26 Scenedesmus obliquus nồng độ nitơ khác 3.8 Hàm lượng suất tổng hợp carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus nồng độ phôtpho khác vii 27 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH MƠI TRƯỜNG TĨM TẮT ĐỀ TÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Khảo sát ảnh hưởng mơi trường ni đến sinh trưởng tích Tên đề tài Họ tên sinh viên Mã SV lũy carotenoid pha sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus Phan Thị Diễm My 315043161127 Khóa 2016 – 2020 Vi tảo Scenedesmus obliquus đánh giá nguồn nguyên liệu tiềm để sản xuất carotenoid – dạng sắc tố hữu sinh vật quang hợp có giá trị dinh dưỡng cao, ứng dụng rộng rãi dược phẩm, thực phẩm thức ăn nuôi trồng thủy hải sản Nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng nồng độ chất dinh dưỡng nitơ, phôtpho muối NaCl đến khả sinh trưởng tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus phân lập từ thủy vực nước Đà Nẵng Kết môi trường BG-11 với nồng độ nitơ 120 mgN.L-1 nồng độ phôtpho 12,21 mgP.L-1, Scenedesmus obliquus sinh trưởng tốt với tốc độ trung bình 0,298 ± 0,03 ngày-1 0,23 ± 0,01 ngày-1, đồng thời tích lũy carotenoid đạt tốt với hiệu suất trung bình tương ứng đạt 0,80 ± 0,13 % 0,49 ± 18 % sinh khối khô Bên cạnh đó, kết thí nghiệm NaCl gây tác động tiêu cực đến phát triển Scenedesmus obliquus giai đoạn sinh trưởng, nồng độ NaCl nhỏ (0,01 – 0,2 M) kìm hãm phát triển vi tảo nồng độ NaCl 0,6 M ức chế hoàn toàn sinh trưởng vi tảo viii (Sánchez cs, 2008; Pancha cs, 2014; Přibyl cs, 2015) Tuy nhiên, điều kiện bất lợi môi trường lại thường làm giảm tốc độ sinh trưởng sinh khối quần thể vi tảo (Cordero cs, 2011) Trên phương diện ứng dụng sản xuất, hàm lượng carotenoid tế bào yếu tố cần trọng mà tốc độ sinh trưởng, mật độ sinh khối tảo khả chống chịu vi tảo với điều kiện khắc nghiệt môi trường yếu tố quan trọng cần cân nhắc để tối ưu hóa suất lợi nhuận (Přibyl cs, 2015) Tốc độ sinh trưởng tối đa loài Scenedesmus tuyển chọn để sản xuất carotenoid nghiên cứu giới có biến động lớn, từ khoảng 0,3 ngày-1 loài S komarekii (Hanagata Dubinsky, 2002) đến 0,57 ngày-1 Scenedesmus sp (Pirastru cs, 2012) hay lên đến 1,8 ngày-1 S almeriensis (Sánchez cs, 2008) Trong nghiên cứu chúng tôi, tốc độ sinh trưởng S obliquus cao ghi nhận 0,35 ngày-1 nghiệm thức M0; 0,298 ngày-1 nghiệm thức N2 0,252 ngày-1 nghiệm thức P4; điều kiện mơi trường ni mà tảo tích lũy hàm lượng carotenoid cao Điều cho thấy điều kiện mơi trường thích hợp cho việc kích thích tích lũy carotenoid Tuy nhiên, để xác định điều kiện ni trồng tối ưu cho lồi vi tảo cịn cần tiến hành thêm thí nghiệm 28 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Kết nghiên cứu cho thấy nồng độ dinh dưỡng (nitơ, photpho) nồng độ muối (NaCl) môi trường ni cấy có ảnh hưởng rõ rệt đến sinh trưởng khả tích lũy sắc tố carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus - Tốc độ tăng trưởng tối đa vi tảo ghi nhận thí nghiệm đạt 0,298 ± 0,03 ngày-1 môi trường BG-11 chứa 120 mgN.L-1; 0,23 ± 0,01 ngày-1 môi trường BG-11 chứa 12,21 mgP.L-1 0,35 ± 0,03 ngày-1 môi trường BG-11 chuẩn không bổ sung NaCl Bên cạnh đó, muối NaCl khoảng nồng độ 0,01 – 0,6 M chứng minh gây hạn chế chí gây ức chế sinh trưởng vi tảo - Đối với hàm lượng suất tích lũy carotenoid, giá trị cực đại ghi nhận nghiệm thức N2 (BG-11 + 120 mgN.L-1) P4 (BG-11 + 12,21 mgP.L-1) Kiến nghị Các kết từ thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng yếu tố riêng lẻ sở để xây dựng thí nghiệm tối ưu hóa nhằm tìm mơi trường ni phù hợp cho việc tăng sinh khối kích thích tích lũy hợp chất thứ cấp có giá trị vi tảo S obliquus Việt Nam 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Lân Dũng Bùi Việt Hà (2009), Sinh trưởng phát triển vi sinh vật, Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học: 1-9 Đặng Thị Thanh Hòa, Trần Thị Mỹ Xuyên (2007), Phân lập tìm hiểu tăng trưởng Scenedesmus (Chlorophyta) số môi trường, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Nơng lâm nghiệp số 1&2/2007, Đại học Nơng lâm Tp.Hồ Chí Minh Dương Đức Tiến Võ Hành (1997), Tảo nước Việt Nam - Phân loại tảo lục (Chlorococcales) NXB Nông nghiệp, Hà Nội: 503 TÀI LIỆU TIẾNG ANH Aburai, N., Sumida, D., Abe, K (2015), Effect of light level and salinity on the composition and accumulation of free and ester-type carotenoids in the aerial microalga Scenedesmus sp (Chlorophyceae), Algal Res 8, 30–36 https://doi.org/10.1016/j.algal.2015.01.005 Amrita Difus, J T (2015) Effect of light intensity and pH condition on the growth, biomass and lipid content of microalgae Scenedesmus species Arbib, Z., Ruiz, J., Alvarez, P., Garrido-Pérez, C., Barragan, J., & Perales, J (2013) Photobiotreatment: Influence of nitrogen and phosphorus ratio in wastewater on growth kinetics of Scenedesmus obliquus Int J Phytoremediation, 15, 774–788 https://doi.org/10.1080/15226514.2012.735291 Arumugam, M., Agarwal, A., Arya, M C., & Ahmed, Z (2013) Influence of nitrogen sources on biomass productivity of microalgae Scenedesmus bijugatus Bioresource Technology, 131, 246–249 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2012.12.159 Asada, K (1999) THE WATER-WATER CYCLE IN CHLOROPLASTS: Scavenging of Active Oxygens and Dissipation of Excess Photons Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular https://doi.org/10.1146/annurev.arplant.50.1.601 30 Biology, 50, 601–639 Baert, P., Bosteels, T., & Sorgeloos, P (1996) Manual on the Production and Use of Live Food for Aquaculture Pond Production, 196–251 Barsanti, L., & Gualtieri, P (2005) Algae: Anatomy, Biochemistry, and Biotechnology (1 edition) CRC Press Begum, H., Yusoff, F M., Banerjee, S., Khatoon, H., & Shariff, M (2016) Availability and Utilization of Pigments from Microalgae Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 56(13), 2209–2222 https://doi.org/10.1080/10408398.2013.764841 Berges, J., Varela, D., & Harrison, P (2002) Effects of temperature on growth rate, cell composition and nitrogen metabolism in the marine diatom Thalassiosira pseudonana (Bacillariophyceae) Marine Ecology-Progress Series, 225, 139–146 https://doi.org/10.3354/meps225139 Bhosale, P (2004) Environmental and cultural stimulants in the production of carotenoids from microorganisms Applied Microbiology and Biotechnology, 63(4), 351– 361 https://doi.org/10.1007/s00253-003-1441-1 Blanco, A M., Moreno, J., Del Campo, J A., Rivas, J., & Guerrero, M G (2007) Outdoor cultivation of lutein-rich cells of Muriellopsis sp In open ponds Applied Microbiology and Biotechnology, 73(6), 1259–1266 https://doi.org/10.1007/s00253-0060598-9 Blumwald, E., Mehlhorn, R J., & Packer, L (1984) Salt Adaptation Mechanisms in the Cyanobacterium Synechococcus 6311 In C Sybesma (Ed.), Advances in Photosynthesis Research: Proceedings of the VIth International Congress on Photosynthesis, Brussels, Belgium, August 1–6, 1983 Volume (pp 627–630) Springer Netherlands https://doi.org/10.1007/978-94-017-6368-4_140 Boussiba, S., Bing, W., Yuan, J.-P., Zarka, A., & Chen, F (1999) Changes in pigments profile in the green alga Haeamtococcus pluvialis exposed to environmental stresses Biotechnology Letters, 21(7), 601–604 https://doi.org/10.1023/A:1005507514694 Chisti, Y (2007) Biodiesel from microalgae Biotechnology Advances, 25(3), 294–306 https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2007.02.001 31 Chojnacka, K (2004) Kinetic and stoichiometric relationships of the energy and carbonmetabolism in the culture of microalgae Biotechnology (Pakistan) https://agris.fao.org/agris-search/search.do?recordID=PK2004000987 Cordero, B F., Obraztsova, I., Couso, I., Leon, R., Vargas, M A., & Rodriguez, H (2011) Enhancement of Lutein Production in Chlorella sorokiniana (Chorophyta) by Improvement of Culture Conditions and Random Mutagenesis Marine Drugs, 9(9), 1607–1624 https://doi.org/10.3390/md9091607 Damiani, M C., Popovich, C A., Constenla, D., Martínez, A M., Doria, E., Longoni, P., Cella, R., Nielsen, E., & Leonardi, P I (2014) Triacylglycerol content, productivity and fatty acid profile in Scenedesmus acutus PVUW12 Journal of Applied Phycology, 26(3), 1423–1430 https://doi.org/10.1007/s10811-013-0170-9 Dharma, A (2017) Chlorophyll and Total Carotenoid Contents in Microalgae Isolated from Local Industry Effluent in West Sumatera, Indonesia Diana Simionato, M A B., Nicoletta La Rocca, J J., Eric Maréchal, G F., & Tomas Morosinotto (2013) The Response of Nannochloropsis Gaditana to Nitrogen Starvation Includes De Novo Biosynthesis of Triacylglycerols, a Decrease of Chloroplast Galactolipids, and Reorganization of the Photosynthetic Apparatus—PubMed https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23457191/ Duan, Y., Guo, X., Yang, J., Zhang, M., & Li, Y (2020) Nutrients recycle and the growth of Scenedesmus obliquus in synthetic wastewater under different sodium carbonate concentrations Royal Society Open Science, 7(1), 191214 https://doi.org/10.1098/rsos.191214 El-Katony, T M., & El-Adl, M F (2020) Salt response of the freshwater microalga Scenedesmus obliquus (Turp.) Kutz is modulated by the algal growth phase Journal of Oceanology and Limnology, 38(3), 802–815 https://doi.org/10.1007/s00343-019-9067-z FAO, 1991 Manual on the Production and Use of Live Food for Aquaculture Fisheries and Aquaculture Department, USA García-Cedo, J C., Cristiani-Urbina, E., Flores-Ortiz, C M., Ponce-Noyola, T., Esparza-García, F., & Cañizares-Villanueva, R O (2016) Batch and fed-batch culture of Scenedesmus incrassatulus: Effect over biomass, carotenoid profile and concentration, 32 photosynthetic efficiency and non-photochemical quenching Algal Research, 13, 41–52 https://doi.org/10.1016/j.algal.2015.11.013 García-González, M., Moreno, J., Manzano, J C., Florencio, F J., & Guerrero, M G (2005) Production of Dunaliella salina biomass rich in 9-cis-β-carotene and lutein in a closed tubular photobioreactor Journal of Biotechnology, 115(1), 81–90 https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2004.07.010 Guedes, A.C., Amaro, H.M., Pereira, R.D., Malcata, F.X., 2011 Effects of temperature and pH on growth and antioxidant content of the microalga Scenedesmus obliquus Biotechnol Prog 27, 1218–1224 https://doi.org/10.1002/btpr.649 Hagen, C., Grünewald, K., Xyländer, M., & Rothe, E (2001) Effect of cultivation parameters on growth and pigment biosynthesis in flagellated cells of Haematococcus pluvialis Journal of Applied Phycology, 13(1), 79–87 https://doi.org/10.1023/A:1008105909044 Hakalin, N L S., Paz, A P., Aranda, D A G., & Moraes, L M P (2014) Enhancement of Cell Growth and Lipid Content of a Freshwater Microalga Scenedesmus sp By Optimizing Nitrogen, Phosphorus and Vitamin Concentrations for Biodiesel Production Natural Science, 6(12), 1044–1054 https://doi.org/10.4236/ns.2014.612095 Hamouda, A.-E.-S (2018) Influence of Various Concentrations of Phosphorus on the Antibacterial, Antioxidant and Bioactive Components of Green Microalgae Scenedesmus obliquus—SciAlert Responsive Version https://doi.org/10.3923/ijp.2018.99.107 Han, D., Li, Y., & Hu, Q (2013) Astaxanthin in microalgae: Pathways, functions and biotechnological implications Algae, 28(2), 131–147 https://doi.org/10.4490/algae.2013.28.2.131 Hanagata, N., & Dubinsky, Z (2002) Secondary carotenoid accumulation in Scenedesmus komarekii (Chlorophyceae, Chlorophyta) Journal of Phycology, 35, 960– 966 https://doi.org/10.1046/j.1529-8817.1999.3550960.x Ho, S.-H., Chen, C.-Y., & Chang, J.-S (2012) Effect of light intensity and nitrogen starvation on CO2 fixation and lipid/carbohydrate production of an indigenous microalga Scenedesmus obliquus CNW-N Bioresource https://doi.org/10.1016/j.biortech.2011.11.133 33 Technology, 113, 244–252 Jahns, P., Latowski, D., & Strzalka, K (2009) Mechanism and regulation of the violaxanthin cycle: The role of antenna proteins and membrane lipids Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics, 1787(1), 3–14 https://doi.org/10.1016/j.bbabio.2008.09.013 Ji, X., Cheng, J., Gong, D., Zhao, X., Qi, Y., Su, Y., & Ma, W (2018) The effect of NaCl stress on photosynthetic efficiency and lipid production in freshwater microalgaScenedesmus obliquus XJ002 The Science of the Total Environment, 633, 593–599 https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2018.03.240 Kari Skjånes, P L (2013) Potential for green microalgae to produce hydrogen, pharmaceuticals and other high value products in a combined process https://www.tandfonline.com/doi/full/10.3109/07388551.2012.681625 Kim, S., Park, J., Cho, Y.-B., & Hwang, S.-J (2013) Growth rate, organic carbon and nutrient removal rates of Chlorella sorokiniana in autotrophic, heterotrophic and mixotrophic conditions Bioresource Technology, 144, 8–13 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2013.06.068 Kim, S.-K (2015) Handbook of Marine Microalgae: Biotechnology Advances Academic Press Kirrolia, A., Bishnoi, N., & Singh, N (2011) Salinity as a factor affecting the physiological and biochemical traits of Scenedesmus quadricauda J Algal Biomass Util, 2, 28–34 Lai, J., Yu, Z., Song, X., Cao, X., & Han, X (2011) Responses of the growth and biochemical composition of Prorocentrum donghaiense to different nitrogen and phosphorus concentrations Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, 405, 6–17 https://doi.org/10.1016/j.jembe.2011.05.010 Lemoine, Y., & Schoefs, B (2010) Secondary ketocarotenoid astaxanthin biosynthesis in algae: A multifunctional response to stress Photosynthesis Research, 106(1–2), 155– 177 https://doi.org/10.1007/s11120-010-9583-3 Lichtenthaler, H K (1987) Chlorophylls and carotenoids: Pigments of photosynthetic biomembranes In Methods in Enzymology (Vol 148, pp 350–382) Academic Press https://doi.org/10.1016/0076-6879(87)48036-1 34 Liu, Y., Wang, M., Zhao, F., Xu, Z., & Dong, S (2005) The direct electron transfer of glucose oxidase and glucose biosensor based on carbon nanotubes/chitosan matrix Biosensors and Bioelectronics, 21(6), 984–988 https://doi.org/10.1016/j.bios.2005.03.003 Makareviciene, P dr V., Andrulevičiūtė, V., Skorupskaitė, V., & Kasperovičienė, J (2011) Cultivation of Microalgae Chlorella sp And Scenedesmus sp As a Potentional Biofuel Feedstock Environmental Research, Engineering and Management, 57(3), 21– 27 Mao, G, Xu, X, and Xu, Z, “Advances in physiological and biochemical research of salt tolerance in plant”, Chinese Journal of Eco-Agriculture, 12(1), 2004, 43-46 Milne, J L., Cameron, J C., Page, L E., Benson, S M., & Pakrasi, H B (2012) Algal technologies for biological capture and utilization of CO2 require breakthroughs in basic research In Perspectives on Biofuels: Potential Benefits and Possible Pitfalls (pp 107141) American Chemical Society Nigam, S., Rai, M P., & Sharma, R (2011) Effect of Nitrogen on Growth and Lipid Content of Chlorella pyrenoidosa American Journal of Biochemistry and Biotechnology, 7(3), 124–129 https://doi.org/10.3844/ajbbsp.2011.124.129 Novoveská, L., Ross, M E., Stanley, M S., Pradelles, R., Wasiolek, V., & Sassi, J.-F (2019) Microalgal Carotenoids: A Review of Production, Current Markets, Regulations, and Future Direction Marine Drugs, 17(11), 640 https://doi.org/10.3390/md17110640 Pancha, I., Chokshi, K., George, B., Ghosh, T., Paliwal, C., Maurya, R., & Mishra, S (2014) Nitrogen stress triggered biochemical and morphological changes in the microalgae Scenedesmus sp CCNM 1077 Bioresource Technology, 156, 146–154 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2014.01.025 Pirastru, L., Darwish, M., Chu, F L., Perreault, F., Sirois, L., Sleno, L., & Popovic, R (2012) Carotenoid production and change of photosynthetic functions in Scenedesmus sp Exposed to nitrogen limitation and acetate treatment Journal of Applied Phycology, 24(1), 117–124 https://doi.org/10.1007/s10811-011-9657-4 35 Pires, J C M (2015) Chapter 5—Mass Production of Microalgae In S.-K Kim (Ed.), Handbook of Marine Microalgae (pp 55–68) Academic Press https://doi.org/10.1016/B978-0-12-800776-1.00005-4 Pisal, D S., & Lele, S (2005) Carotenoid production from microalga, Dunaliella salina Indian Journal of Biotechnology, 4, 476–483 Přibyl, P., Cepák, V., Kaštánek, P., & Zachleder, V (2015) Elevated production of carotenoids by a new isolate of Scenedesmus sp Algal Research, 11, 22–27 https://doi.org/10.1016/j.algal.2015.05.020 Přibyl, P., Pilný, J., Cepák, V., & Kaštánek, P (2016) The role of light and nitrogen in growth and carotenoid accumulation in Scenedesmus sp Algal Research, 16, 69–75 https://doi.org/10.1016/j.algal.2016.02.028 Pulz, O., & Gross, W (2004) Valuable products from biotechnology of microalgae Applied Microbiology and Biotechnology, 65(6), 635–648 https://doi.org/10.1007/s00253-004-1647-x Qin, S., Liu, G.-X., & Hu, Z.-Y (2008) The accumulation and metabolism of astaxanthin in Scenedesmus obliquus (Chlorophyceae) Process Biochemistry, 43(8), 795–802 https://doi.org/10.1016/j.procbio.2008.03.010 R Core Team (2019) R: A language and environment for statistical computing R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria URL https://www.R-project.org/ Raghothama, K (2000) Phosphate transport and signaling Current Opinion in Plant Biology, 3(3), 182–187 https://doi.org/10.1016/S1369-5266(00)80063-1 Raven, J A., & Geider, R J (1988) Temperature and algal growth New Phytologist, 110(4), 441–461 https://doi.org/10.1111/j.1469-8137.1988.tb00282.x Rhee, G.-Y., & Gotham, I J (1981) The effect of environmental factors on phytoplankton growth: Temperature and the interactions of temperature with nutrient limitation1 Limnology and Oceanography, 26(4), 635–648 https://doi.org/10.4319/lo.1981.26.4.0635 Richmond, A (2004) Handbook of microalgal culture: Biotechnology and applied phycology http://site.ebrary.com/id/10249036 36 Rippka, R., Derueles, J., Waterbury, J B., & Herdman, M S (1979) Generic assignments, strain histories and properties of pure cultures of Cyanobacteria Journal of General Microbiology https://agris.fao.org/agris- search/search.do?recordID=US201301391605 Rodolfi, L., Chini Zittelli, G., Bassi, N., Padovani, G., Biondi, N., Bonini, G., & Tredici, M R (2009) Microalgae for oil: Strain selection, induction of lipid synthesis and outdoor mass cultivation in a low-cost photobioreactor Biotechnology and Bioengineering, 102(1), 100–112 https://doi.org/10.1002/bit.22033 Salama, E.-S., Kim, H.-C., Abou-Shanab, R A I., Ji, M.-K., Oh, Y.-K., Kim, S.-H., & Jeon, B.-H (2013) Biomass, lipid content, and fatty acid composition of freshwater Chlamydomonas mexicana and Scenedesmus obliquus grown under salt stress Bioprocess and Biosystems Engineering, 36(6), 827–833 https://doi.org/10.1007/s00449013-0919-1 Sánchez, J F., Fernández-Sevilla, J M., Acién, F G., Cerón, M C., Pérez-Parra, J., & Molina-Grima, E (2008) Biomass and lutein productivity of Scenedesmus almeriensis: Influence of irradiance, dilution rate and temperature Applied Microbiology and Biotechnology, 79(5), 719–729 https://doi.org/10.1007/s00253-008-1494-2 Sartory, D P., & Grobbelaar, J U (1984) Extraction of chlorophyll a from freshwater phytoplankton for spectrophotometric analysis Hydrobiologia, 114(3), 177–187 https://doi.org/10.1007/BF00031869 Simionato, D., Block, M A., La Rocca, N., Jouhet, J., Maréchal, E., Finazzi, G., & Morosinotto, T (2013) The response of Nannochloropsis gaditana to nitrogen starvation includes de novo biosynthesis of triacylglycerols, a decrease of chloroplast galactolipids, and reorganization of the photosynthetic apparatus Eukaryotic Cell, 12(5), 665–676 https://doi.org/10.1128/EC.00363-12 Skibsted, L H (2012) Carotenoids in Antioxidant Networks Colorants or Radical Scavengers Journal of Agricultural and Food Chemistry, 60(10), 2409–2417 https://doi.org/10.1021/jf2051416 37 Skjånes, K., Rebours, C., Lindblad, P (2012) Potential for green microalgae to produce hydrogen, pharmaceuticals and other high value products in a combined process, CritRev Biotechnol: 33 https://doi.org/10.3109/07388551.2012.681625 Solovchenko, A E (2013) Physiology and adaptive significance of secondary carotenogenesis in green microalgae Russian Journal of Plant Physiology, 60(1), 1–13 https://doi.org/10.1134/S1021443713010081 Sydney, E B., Novak, A C., de Carvalho, J C., & Soccol, C R (2014) Chapter 4— Respirometric Balance and Carbon Fixation of Industrially Important Algae In A Pandey, D.-J Lee, Y Chisti, & C R Soccol (Eds.), Biofuels from Algae (pp 67–84) Elsevier https://doi.org/10.1016/B978-0-444-59558-4.00004-8 Takaichi, S (2011) Carotenoids in Algae: Distributions, Biosyntheses and Functions Marine Drugs, 9(6), 1101–1118 https://doi.org/10.3390/md9061101 Tang, D., Han, W., Li, P., Miao, X., & Zhong, J.-J (2010) CO2 Biofixation and Fatty Acid Composition of Scenedesmus obliquus and Chlorella pyrenoidosa in Response to Different CO2 Levels Bioresource Technology, 102, 3071–3076 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2010.10.047 Touzet, N., Franco, J M., & Raine, R (2007) Influence of inorganic nutrition on growth and PSP toxin production of Alexandrium minutum (Dinophyceae) from Cork Harbour, Ireland Toxicon: Official Journal of the International Society on Toxinology, 50(1), 106– 119 https://doi.org/10.1016/j.toxicon.2007.03.001 Trainor, F P., & Burg, C A (1965) Scenedesmus obliquus Sexuality Science, 148(3673), 1094–1095 https://doi.org/10.1126/science.148.3673.1094 Varela, J., Pereira, H., Vila, M., & León, R (2015) Production of carotenoids by microalgae: Achievements and challenges Photosynthesis Research, 125 https://doi.org/10.1007/s11120-015-0149-2 Wahidin, S., Idris, A., & Shaleh, S R M (2013) The influence of light intensity and photoperiod on the growth and lipid content of microalgae Nannochloropsis sp Bioresource Technology, 129, 7–11 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2012.11.032 Xin, L., Hong-ying, H., Ke, G., & Ying-xue, S (2010) Effects of different nitrogen and phosphorus concentrations on the growth, nutrient uptake, and lipid accumulation of a 38 freshwater microalga Scenedesmus sp Bioresource Technology, 101(14), 5494–5500 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2010.02.016 Yen, H.-W., Hu, I.-C., Chen, C.-Y., Nagarajan, D., & Chang, J.-S (2019) Chapter 10— Design of photobioreactors for algal cultivation In A Pandey, J.-S Chang, C R Soccol, D.-J Lee, & Y Chisti (Eds.), Biofuels from Algae (Second Edition) (pp 225–256) Elsevier https://doi.org/10.1016/B978-0-444-64192-2.00010-X 39 PHỤ LỤC Phụ lục Phương trình tương quan OD mật độ y = 6E-08x + 0.2209 R² = 0.991 OD 0 20000000 40000000 60000000 80000000 100000000 Mật độ (tế bào/ml) Phụ lục Phương trình tương quan mật độ sinh khối khô 0.016 y = 2E-10x + 0.0013 R² = 0.9848 Sinh khối khô (g/ml) 0.014 0.012 0.01 0.008 0.006 0.004 0.002 0 20000000 40000000 60000000 Mật độ (tế bào/ml) 40 80000000 100000000 Phụ lục Phương trình tương quan OD sinh khối khô 0.016 y = 0.0029x + 0.0007 R² = 0.9903 Sinh khối khô (g/ml) 0.014 0.012 0.01 0.008 0.006 0.004 0.002 0 OD Phụ lục Nhân giống vi tảo Scenedesmus obliquus mơi trường BG-11 41 Phụ lục Bố trí thí nghiệm 42 ... pha sinh trưởng - Khảo sát ảnh hưởng phơtpho đến tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus pha sinh trưởng - Khảo sát ảnh hưởng nồng độ NaCl đến tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus. .. sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus - Khảo sát ảnh hưởng nồng độ NaCl đến sinh trưởng vi tảo Scenedesmus obliquus - Khảo sát ảnh hưởng nitơ đến tích lũy carotenoid vi tảo Scenedesmus obliquus. .. NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MƠI TRƯỜNG  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY CAROTENOID TRONG PHA SINH TRƯỞNG CỦA VI TẢO