BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Lê Thị Liên NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC CÁC HỢP CHẤT STEROID TỪ CÂY LÁ ĐẮNG (Vernonia amygdalina) LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Hà Nội, năm 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Lê Thị Liên NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC CÁC HỢP CHẤT STEROID TỪ CÂY LÁ ĐẮNG (Veronia amygdalina) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS HOÀNG LÊ TUẤN ANH Hà Nội, năm 2020 Lời cam đoan Luận văn cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn khoa học PGS.TS Hoàng Lê Tuấn Anh Các số liệu, kết luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Tác giả luận văn Lê Thị Liên Lời cảm ơn Luận văn tốt nghiệp cao học hồn thành, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới PGS.TS Hoàng Lê Tuấn Anh trực tiếp hướng dẫn tận tình, dìu dắt giúp đỡ tơi với dẫn khoa học quý giá suốt trình thực hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể phòng Ứng dụng Triển khai Công nghệ - Viện Nghiên cứu Khoa học Miền Trung, đặc biệt TS Lê Cảnh Việt Cường, trực tiếp hướng dẫn, bảo giúp đỡ hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Phạm Việt Cường, chủ nhiệm đề tài “Nghiên cứu phát triển dược liệu Vernonia amygdalina Delile (cây đắng) tỉnh Thừa Thiên Huế định hướng ứng dụng” hỗ trợ thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Ban lãnh đạo thầy cô giáo Học viện Khoa học Công nghệ trực tiếp giảng dạy, truyền đạt kiến thức khoa học chuyên ngành cho năm tháng qua Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, đồng nghiệp, bạn bè, người động viên, chia sẻ, ủng hộ suốt thời gian qua./ Xin chân thành cảm ơn! Tác giả luận văn Lê Thị Liên Danh mục ký hiệu chữ viết tắt Viết tắt Tiếng Anh Diễn giải Proton nuclear magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân resonance spectroscopy Carbon-13 nuclear magnetic proton Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 ABTS resonance spectroscopy 2,2'-Azino-bis (axit 3- A-549 ethylbenzthiazoline-6sulfonic) Human lung carcinoma cell Tế bào ung thư phổi người A2780 line Human ovarian carcinoma Tế bào ung thư biểu mô Bel-7402 cell line Human endocervical buồng trứng người Tế bào ung thư biểu mô CC adenocarcinoma cell line Column chromatography tuyến nội tiết người Sắc ký cột DPPH 2,2-diphenyl-1- DEPT picrylhydrazyl Distortionless enhancement Phổ DEPT ED50 by polarisation transfer Median effective dose Liều lượng ảnh hưởng đến H-NMR 13 C-NMR 50% đối tượng thử nghiệm G6Pase Glucose 6-phosphatase HL-60 Human promyelocytic Tế bào ung thư máu cấp HeLa leukemia cell line HeLa cell người Tế bào ung thư cổ tử cung HepG2 Hepatocellilar carcinoma Tế bào ung thư biểu mô gan HMBC cell line Heteronuclear multiple Phổ tương tác dị hạt nhân bond coherence qua nhiều tương tác HSQC Heteronuclear single Phổ tương tác dị hạt nhân IC50 quantum coherence Inhibitory concentration at qua liên kết Nồng độ ức chế 50% đối MIC 50% Minimum inhibitory tượng thử nghiệm Nồng độ ức chế tối thiểu L-1210 concentration l-1210 cell line Tế bào ung thư bạch cầu NCI-661 Large cell lung carcinoma Tế bào ung thư biểu mô tế OD cell line Optical density bào phổi lớn Mật độ quang học TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng HR-ESI-MS High resolution Phổ khối lượng phân giải cao phun mù điện tử KB electronspray ionization mass spectrum Human epidemoid L-NMMA carcinoma cell line N-methylarginine Tế bào ung thư biểu mô người T-47D GM-CSF Breast cancer cell line Granulocyte-macrophage Tế bào ung thư vú Yếu tố kích thích đại thực SMMC-7721 colony stimulating factor Human papillomavirus- bào bạch cầu Tế bào ung thư biểu mô related endocervical adenocarcinoma cell line tuyến nội tiết liên quan đến papillomavirus người DLD-1 Colorectal adenocarcinoma Tế bào ung thư biểu mô HSC4 cell line Human oral squamous tuyến Tế bào ung thư vòm họng carcinoma cell line người Danh mục bảng Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất VA1 hợp chất tham khảo .30 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất VA2 hợp chất tham khảo .33 Bảng 3.3 Số liệu phổ NMR hợp chất VA3 hợp chất tham khảo (VA2) 40 Bảng 3.4 Số liệu phổ NMR hợp chất VA4 hợp chất tham khảo .43 Bảng 3.5 Số liệu phổ NMR hợp chất VA5 hợp chất tham khảo .45 Bảng 3.6 Số liệu phổ NMR hợp chất VA6 hợp chất tham khảo .48 Bảng 3.11 Các hợp chất phân lập từ loài đắng 49 Bảng 3.12 Kết sàng lọc hoạt tính ức chế enzyme α-amylase enzyme αglucosidase hợp chất 51 Bảng 3.13 Kết đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α-amylase αglucosidase theo nồng độ hợp chất phân lập 51 * Acarbose dùng làm chất đối chứng dương 52 Danh mục hình vẽ Hình 1.1 Hình ảnh số loài thuộc chi Vernonia “Nguồn: Thư viện điện tử Wikipedia ” Hình 2.1 Cây đắng (V amygdalina) 22 Hình 2.2 Sơ đồ phân lập hợp chất từ loài V amygdalina .26 Hình 3.1 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất VA1 29 Hình 3.2 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất VA2 32 Hình 3.3 Cấu trúc hóa học hợp chất VA3 hợp chất tham khảo (VA2) 34 Hình 3.4 Phổ HR-ESI-MS hợp chất VA3 35 Hình 3.5 Phổ 1H-NMR hợp chất VA3 35 Hình 3.6 Phổ 13C-NMR hợp chất VA3 36 Hình 3.7 Phổ HSQC hợp chất VA3 .37 Hình 3.9 Phổ HMBC hợp chất VA3 38 Hình 3.10 Phổ NOESY hợp chất VA3 39 Hình 3.11 HPLC VA3 sau acid hóa 42 Hình 3.12 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất VA4 42 Hình 3.13 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất VA5 44 Hình 3.14 Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất VA6 47 Phổ 1H-NMR hợp chất VA1 64 Phổ 13C-NMR hợp chất VA1 64 Phổ HMBC hợp chất VA1 65 Phổ HSQC hợp chất VA1 .65 Phổ 1H-NMR hợp chất VA2 67 Phổ 13C-NMR hợp chất VA2 67 Phổ HSQC hợp chất VA2 .68 Phổ HMBC hợp chất VA2 68 Phổ 13C-NMR hợp chất VA4 70 Phổ HMBC hợp chất VA4 71 Phổ 1H-NMR hợp chất VA5 73 Phổ 13C-NMR hợp chất VA5 73 Phổ HSQC hợp chất VA5 .74 Phổ HMBC hợp chất VA5 74 Phổ 1H-NMR hợp chất VA6 76 Phổ 13C-NMR hợp chất VA6 76 Phổ HSQC hợp chất VA6 .77 Phổ HMBC hợp chất VA6 77 63 PHỤ LỤC HỢP CHẤT VA1 Công thức phân tử: C30H46O7 Khối lượng phân tử: 518 Phổ 1H-NMR Phổ 13C- NMR Phổ HMBC Phổ HSQC 64 Phổ H-NMR hợp chất VA1 Phổ 13 C-NMR hợp chất VA1 65 Phổ HMBC hợp chất VA1 Phổ HSQC hợp chất VA1 66 PHỤ LỤC HỢP CHẤT VA2 Công thức phân tử: C38H58O13 Khối lượng phân tử: 722 Phổ 1H-NMR Phổ 13C-NMR Phổ HMBC Phổ HSQC 67 Phổ 1H-NMR hợp chất VA2 Phổ 13 C-NMR hợp chất VA2 68 Phổ HSQC hợp chất VA2 Phổ HMBC hợp chất VA2 69 PHỤ LỤC HỢP CHẤT VA4 Công thức phân tử: C35H52O10 Khối lượng phân tử: 632 Phổ 1H-NMR Phổ 13C-NMR Phổ HMBC Phổ HSQC 70 Phổ H-NMR hợp chất VA4 Phổ 13 C-NMR hợp chất VA4 71 Phổ HSQC hợp chất VA4 Phổ HMBC hợp chất VA4 72 PHỤ LỤC HỢP CHẤT VA5 Công thức phân tử: C36H52O12 Khối lượng phân tử: 676 Phổ 1H-NMR Phổ 13C-NMR Phổ HMBC Phổ HSQC 73 Phổ H-NMR hợp chất VA5 Phổ 13 C-NMR hợp chất VA5 74 Phổ HSQC hợp chất VA5 Phổ HMBC hợp chất VA5 75 PHỤ LỤC HỢP CHẤT VA6 Công thức phân tử: C29H42O5 Khối lượng phân tử: 470 Phổ 1H-NMR Phổ 13C-NMR Phổ HMBC Phổ HSQC 76 Phổ H-NMR hợp chất VA6 Phổ 13 C-NMR hợp chất VA6 77 Phổ HSQC hợp chất VA6 Phổ HMBC hợp chất VA6 ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Lê Thị Liên NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC CÁC HỢP... α-glucosidase V amygdalina sinh trưởng Việt Nam Từ sở chọn đề tài: ? ?Nghiên cứu phân lập, xác định cấu trúc đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất steroid từ đắng (Vernonia amygdalina)? ?? 5 CHƯƠNG TỔNG... HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY LÁ ĐẮNG (Vernonia amygdalina) Cho đến nay, giới có số cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi V amygdalina (cây đắng) Các kết nghiên